Tułaza Łukasz

T.Ż. gr.7

Ćwiczenie 4

Oznaczanie zawartości azotynów i azotanów w warzywach

Metoda to polega na wywołaniu reakcji barwnej z odczynnikiem Griessa I i II, przy czym azotany należy uprzednio zredukować do azotynów przy użyciu kolumny kadmowej.

1. Ekstrakcja badanego materiału:

• Odważamy 15g badanego materiału, obranego i startego w zlewce o poj. 50ml

• Przenosimy próbkę za pomocą 100ml gorącej wody do kolby miarowej o poj. 200ml

• Dodajemy 5ml r-ru boraksu i ogrzewamy na łaźni wodnej ok. 15 minut

• Chłodzimy kolbę i dodajemy po po 1ml odczynników Carreza I i II

• Odstawiamy na 20 minut w ciemne miejsce

• Uzupełniamy wodą do kreski

• Przesączamy przez watę

2. Oznaczamy azotany:

• Pobieramy do probówki pipetą 5ml przesączu

• Dodajemy 5ml mieszaniny odczynników Griessa

• Mieszamy i odstawiamy w ciemne miejsce na 20 minut

• Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm

3. Oznaczamy azotany

• Pobieramy do probówki 2ml eluatu i 3ml wody

• Dodajemy 5 ml mieszaniny odczynników Griessa

• Odstawiamy na 20 minut w ciemne miejsce

• Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm wobec próby ślepej

• Z krzywej wzorcowej odczytujemy zawartość azotynów.

4. Przygotowanie krzywej wzorcowej:

• Do kolby miarowej o poj. 200ml pobieramy 1ml r-ru wzorcowego NaNO₂

• Uzupełniamy r-ór wodą do kreski

• Do kolb miarowych o poj. 100ml pobieramy pipetą odpowiednio:1,2,10,30,40 ml roztworu wcześniej przygotowanego

• Do 6 probówek pobieramy pipetą po 5ml przygotowanych roztworów

• Dodajemy po 5ml odczynników Griessa

• Mieszamy i wstawiamy w ciemne miejsce na 20 minut

• Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm wobec próby ślepej (woda zamiast r-rów wzorcowych)

• Kreślimy krzywą wzorcową.

Obliczenia:

Obliczam zawartość NO₂­­^- w marchwi:

Obliczam zawartość NO₃­­^- w marchwi:

Wnioski:

Zgodnie z Rozporządzeniem Ministra Zdrowia z 13.1.2003r w sprawie maksymalnych poziomów zanieczyszczeń chemicznych i biologicznych, które mogą znajdować się w żywności, składnikach żywności, dozwolonych substancjach dodatkowych, substancjach pomagających w przetwarzaniu, albo znajdujących się na powierzchni żywności Dz.U.nr.37 poz. 326 maksymalny poziom zanieczyszczeń NO₃^- wynosić może 400mg/kg. W badanej przez nas marchwi wynosi on 243,87mg/kg, więc jest on więc zgodny z rozporządzeniem.

Tabele zbiorcze:

y = 0,1437x - 0,0103 to:

x = (y + 0,0103)/0,1437