Tułaza Łukasz
T.Ż. gr.7
Ćwiczenie 4
Oznaczanie zawartości azotynów i azotanów w warzywach
Metoda to polega na wywołaniu reakcji barwnej z odczynnikiem Griessa I i II, przy czym azotany należy uprzednio zredukować do azotynów przy użyciu kolumny kadmowej.
Ekstrakcja badanego materiału:
Odważamy 15g badanego materiału, obranego i startego w zlewce o poj. 50ml
Przenosimy próbkę za pomocą 100ml gorącej wody do kolby miarowej o poj. 200ml
Dodajemy 5ml r-ru boraksu i ogrzewamy na łaźni wodnej ok. 15 minut
Chłodzimy kolbę i dodajemy po po 1ml odczynników Carreza I i II
Odstawiamy na 20 minut w ciemne miejsce
Uzupełniamy wodą do kreski
Przesączamy przez watę
Oznaczamy azotany:
Pobieramy do probówki pipetą 5ml przesączu
Dodajemy 5ml mieszaniny odczynników Griessa
Mieszamy i odstawiamy w ciemne miejsce na 20 minut
Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm
Oznaczamy azotany
Pobieramy do probówki 2ml eluatu i 3ml wody
Dodajemy 5 ml mieszaniny odczynników Griessa
Odstawiamy na 20 minut w ciemne miejsce
Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm wobec próby ślepej
Z krzywej wzorcowej odczytujemy zawartość azotynów.
Przygotowanie krzywej wzorcowej:
Do kolby miarowej o poj. 200ml pobieramy 1ml r-ru wzorcowego NaNO2
Uzupełniamy r-ór wodą do kreski
Do kolb miarowych o poj. 100ml pobieramy pipetą odpowiednio:1,2,10,30,40 ml roztworu wcześniej przygotowanego
Do 6 probówek pobieramy pipetą po 5ml przygotowanych roztworów
Dodajemy po 5ml odczynników Griessa
Mieszamy i wstawiamy w ciemne miejsce na 20 minut
Mierzymy ekstynkcję r-ru na specolu przy λ=520nm wobec próby ślepej (woda zamiast r-rów wzorcowych)
Kreślimy krzywą wzorcową.
Obliczenia:
Obliczam zawartość NO2- w marchwi:
Obliczam zawartość NO3- w marchwi:
Wnioski:
Zgodnie z Rozporządzeniem Ministra Zdrowia z 13.1.2003r w sprawie maksymalnych poziomów zanieczyszczeń chemicznych i biologicznych, które mogą znajdować się w żywności, składnikach żywności, dozwolonych substancjach dodatkowych, substancjach pomagających w przetwarzaniu, albo znajdujących się na powierzchni żywności Dz.U.nr.37 poz. 326 maksymalny poziom zanieczyszczeń NO3- wynosić może 400mg/kg. W badanej przez nas marchwi wynosi on 243,87mg/kg, więc jest on więc zgodny z rozporządzeniem.
Tabele zbiorcze:
y = 0,1437x - 0,0103 to:
x = (y + 0,0103)/0,1437