2011 10 18 3 jpeg

II. Częsc praktyczna

[. Kontrola mikrobiologiczna powietrza, wody, sprzętu, aparatury i pomieszczeń fabrycznych -pośrednie metody oznaczania ogólnej liczby drobnoustrojów.

a) powietrze - metoda sedymentacyjna Kocha - przygotowane płytki Petriego (z agarem odżywczym) położyć w wybranym miejscu w pozycji poziomej, zdjąć wieczko płytki i położyć obok, wierzchem do góry. Eksponować płytki 15 min., następnie zamknąć wieczkiem, zawinąć w papier i przenieść do termostatu, ustawiając je dnem do góry.

Po inkubacji policzyć wyrosłe kolonie zakładając, że z każdej komórki wyrosła jedna kolonia i obliczyć liczbę drobnoustrojów (x) w 10 dm’ powietrza według wzoru:

a -100

x =

b • c

gdzie:

a- liczba kolonii wyrosłych na płytce

_#    -i

b- powierzchnia płytki w cm ;

c- współczynnik czasu ekspozycji płytki (dla 15 min. c = 3)

100- przeliczenie powierzchni płytki na 100 cm²

Powietrze uznaje się za bardzo czyste, jeśli liczba drobnoustrojów w 10 dm³ nie jest większa od 10, natomiast gdy przekracza 100 - powietrze jest bardzo zanieczyszczone.

b)    powierzchnie - metoda tamponowa - przed oznaczeniem tampon należy włożyć do butelki zawierającej 20 cm³ jałowego płynu do rozcieńczeń. Szablon (25 cm²) zdezynfekować alkoholem, i przyłożyć do badanej powierzchni; wyjąć tampon jałową pęsetą, odcisnąć na ściankach naczynia i wytrzeć dokładnie powierzchnię ograniczoną szablonem. Tampon wrzucić z powrotem do butelki z płynem, wstrząsać przez 2 min. i z otrzymanej zawiesiny wykonać posiew (0,5 cm³) na płytkę metodą powierzchniową. Po okresie inkubacji policzyć wyrosłe na płytce kolonie.

Podać liczbę drobnoustrojów przypadających na 1 cm² zmywanej powierzchni.

c)    opakowania - metoda popłuczyn - do naczynia wlać płyn do rozcieńczeń, w ilości 1/20 objętości naczynia, zamknąć korkiem lub wieczkiem i wytrząsać 25 razy wzdłuż osi poprzecznej i 25 razy wzdłuż osi podłużnej. Z otrzymanej zawiesiny wykonać 3 rozcieńczenia dziesiętne, a następnie z ostatniego rozcieńczenia wykonać posiew na pożywkę. Po okresie inkubacji liczyć wyrosłe na płytce kolonie.

Jako wynik końcowy podać liczbę drobnoustrojów zawartą w 1 cm³ popłuczyn.

d)    opakowania - metoda odciskowa - z badanego opakowania (papieru, pergaminu, folii) wyciąć jałowo kwadrat o boku 5 cm i jałową pęsetą przenieść na płytkę Petriego z odpowiednim podłożem. Po zdjęciu próbki płytkę inkubować.

r    2

Wvniki Dodać iako liczbę komórek na 100 cm oowierzchni.