976536F5787985401663200398 o

_rCri,ikcia chlamydospor przez Candida albicans■

wykonać preparaty barwione w laktofenolu z błękitem metylowym (Cotton Blu V    ^

-    na szkiełko podstawowe nanieść 2 krople barwnika

-    ezą okrągłą pobrać wybrany grzyb i rozmieszać w barwniku znajdującym się na szkiełk

^u Podstawowym

laktofenol z błękitem metylowym (Cotton Blue) - barwi chitynę, która jest obecna w ściana

większości grzybów. Fenol zabija wszelkie organizmy, a kwas mlekowy zachowuje grzybicze ^ ^komórkowvch

laktofenol z błękitem metylowym (Cotton Blue):    ^{S ruktur}Y-

Cotton Blue (Anilinę Blue) 0.05 g

Phenol Crystals (C6H504) 20 g

Glycerol 40 ml

Lactic acid (CH3CHOH COOH) 20 ml Distilled water 20 ml

Ocena wzrostu Malassezia furfur na modyfikowanych podłożach Sabourauda:

-    przygotować 1 płytkę z agarem Sabourauda oraz 4 płytki z podłożem Sabourauda wzbogacone jed podanych poniżej składników ( płytki średnie (7cm) szklane o pojemności 15 ml):

-    oliwą z oliwek (końcowe stężeniel%)

-    Tween 80 (1%)

-Tween 40 (1%)

-    olejem rzepakowym (1%)

-    wykonać zawiesinę grzyba w lml płynu fizjologicznego (OD550nm= 0,3)

-    wysiać, w postaci kropli, 30 ul zawiesiny grzyba na każdą z 5 płytek

-    inkubować w temperaturze 32°C przez 72-96godz

-    zmierzyć strefę wzrostu grzyba, wyniki przedstawić w formie tabeli

Ocena skuteczności działania szamponów przeciwłupieżowych na wzrost Malassezia furfur

-    rozpuścić podłoże Sabourauda- kolbka lOOml (każdy stół wykonuje 1 płytkę o średnicy 9cm(duża))

-    dodać Tween 80 (lml/100ml)

-    wykonać zawiesinę grzybów w lml płynu fizjologicznego (OD550nm= 0,3) lub wykorzystać hodowlę płynną

-    dodać na płytkę 200ul zawiesiny/hodowli

-    do tak przygotowanej płytki dodać do schłodzonego agaru (ok. 50°C) i dokładnie wymieszać z zawiesiną Malassezia furfur

-jałowym korkoborem (3-4 x wypalić alkohol) wyciąć studzienki(- wycięte korki agarowe wyrzucać do płytki)

-    podpisać studzienki nazwą badanego szamponu

-    150 ul szamponu dodawać do odpowiedniej studzienki

-    płytki inkubować w 32°C przez 7 dni

-    zmierzyć strefę zahamowania wzrostu grzybów, wyniki przedstawić w formie tabeli

testy fermentacyjne (zymogramy) - umożliwia identyfikację gatunków na podstawie zdolności grzyba dc

przekształcania różnych cukrów do alkoholu i dwutlenku węgla (fermentacji) (dodatkowy opis w Ćwiczenia 2 mikologii lekarskiej)

o w wodzie/płynie fizjologicznym wykonać 1 ml zawiesiny wybranego grzyba z rodź

Candida (OD 550 = ok. 0,2) (każdy stół wykonuje 1 szereg cukrowy dla 1 grzyba) o Podpisać szereg probówek (glukoza, galaktoza...) nazwą analizowanego grzyba

° olnwtn^{2 P}Tr^{anym POd}'°^{Żem (w}°^{da peptonowa + b,}<** bromotymolowy dpowiedni cukier) zaszczepić 50ul przygotowanej zawiesiny