Biofizyka (7)

Mikroskop optyczny

• Schemat układu optycznego dla prostego mikroskopu

Podstawowymi elementami układu optycznego mikroskopu są dwie soczewki skupiające, jedna z nich pełni rolę obiektywu, a druga okularu. Kondensator, to soczewka prowadząca promieniowanie pochodzące ze źródła, optymalnie oświetlająca obiekt.

Schemat mikroskop polaryzacyjnego

W biologii mikroskop polaryzacyjny stosuje się do analizy układów posiadających pewne uporządkowanie wewnętrzne, które powoduje, Ze wykazują one zdolność podwójnego załamania światła. Przedmiotem analizy może być również aktywność optyczna preparatów biologicznych. Polaryzator służy do przetworzenia światła niespolaryzowanego na światło spolaryzowane liniowo.

Analizator służy do badania kierunku polaryzacji światła przechodzącego przez preparat.

okular

Barwniki fluorescencyjne

W mikroskopii immunofluorescencyjnej obserwuje się położenie wprowadzonych sztucznie do komórki barwników fluorescencyjnych, które łączy się chemicznie z przeciwciałem specyficznym dla określonej makrocząsteczki. Oznakowane przeciwciało jest następnie wprowadzane do preparatu lub odpowiednio przygotowanej komórki. W mikroskopie widoczne są tylko te miejsca, w których doszło dowiązania przeciwciała.

Schemat mikroskopu optycznego z kontrastem fazowym

W badaniach biologicznych preparaty są przeźroczyste i nie absorbują światła. Powoduje to zmianę fazy przychodzących promieni. Dlatego wprowadzono modyfikację mikroskopu.

Kontrast fazowy polega na przekształceniu zmian fazowych światła na zmiany natężenia światła.

światło

Schemat mikroskopu epifluorescencyjnego

Preparaty oświetla się falą padającą z góry. Źródłem światła jest laser, którego promieniowanie pada na zwierciadło dichroniczne, które odbija promieniowanie o długości fali z pewnego niewielkiego zakresu, a promieniowanie pozostałe przepuszcza, którego zadaniem jest wzbudzenie fluorescencji.    ___

j ifetektor _j

r

okular l_______

światło

Schemat mikroskopu konfokalnego - skaningowego

Oświetlony jest tylko niewielki obszar preparatu - obszar punktowy wyznaczony przez objętość ogniska optycznego. Preparat natomiast jest przesuwany systematycznie względem wiązki promieniowania. W ten sposób jest analizowany punkt po punkcie. Źródłem światła jest zwykle