IMG 121112 0623

Cześć praktyczna:

1.    Znakowanie szkieletu aktynowego w komórkach nabłonka jamy ustnej nrrv qj>ęn falloidvnv sprzężonej z rodamina

(doświadczenie można alternatyw nie wykonać na komórkach skórki cebuli hib na k*a**rkacfc i hodowli in vitro),

a)    Pobierz szpatułką lub szkiełkiem nakrywkowym wymaz komórek z wewnętrznej tfraay pofecaftai i awńcsc $ na szkiełku podstawowym. Rozmaz komórek wysusz;

Pamiętaj, aby w czasie wszystkich operacji powierzchnia szkiełka z komórkami bjb r* niewart do góry!

b)    Utrwal materiał w 10% formalinie przez 10 minut.

c)    Przephicz szkiełko w buforze PBS i pozostaw w nim na 10 minut.

d)    Umieść materiał w 0.2% roztworze Tryton X* 100 na 5 minut (w edu zwiększenu przepuszczalności błon komórkowych).

e) Do roztworu wyjściowego falloidyny sprzężonej z rodaminą (100 pg, ml) należ) ócóae \    G. \ \ PBS aby otrzymać roztwór falloidyny o stężeniu 1 pg/ml.

0 Przeprowadź inkubację materiału w roztworze falloidyny sprzężonej z rodsnsia (1 pi mi'. w temperaturze pokojowej przez 30 minut Od momentu użycia fełłoidysy sprzężone? r twJammą wszystkie czynności powinny być przeprowadzane w ciemności \» czas ink;:bac: i szfciefca zamknij w szalce Pctriego zaciemnionej folią aluminiową

g)    Po zakończonej inkubacji zlej roztwór falloidyny do butelki!!!

h)    Przepłucz materiał w buforze PBS i pozostaw w nim na 5 minut

i)    Przeprowadź obserwacje w mikroskopie fluorescenc) jn>m.

j)    Sporządź w zeszycie rysunek z przeprowadzonych obserwacji

2.    Obserwacja preparatów histologicznych mięśni poprzecznie prążków *«\ ch:

•    Obejrzyj pod mikroskopem świetlnym jasnego pola preparat ? mięśni prążkowanych;

•    Sporządź rysunek fragmentu włókna mięśniowego z uwzględnieniem rilamcmew aktynowych i miozynowych.

3.    Wić jako organ ruchu w plemnikach:

•    Obejrzyj pod mikroskopem świetlnym jasnego pola preparat: plemników byka.

•    Wykonaj rysunek komórek plemnikowych z uwzględnieniem wxi

4.    Obserwacja komórek nabłonka migawkowego (urzęsionego) żaby

•    Obejrzyj pod mikroskopem świetlnym jasnego poła preparat; komorci .uS\v_A,» migawkowego żaby;

•    Wykonaj rysunek jednej komórki z uwzględnieniem rzęsek