Obraz1

fragmentów o różnej wielkości co ma niekorzystny wpływ na przepływ substratu w reaktorze enzymatycznym z przepływem ciągłym.

j*H₂

ch₂=ch

HjC=CH

c:=o

I

|-H₂C-CH-CH₂-CH-CH₂-CH-CH₂-CH-}

c=o	O li	c=o 1
NH	NH ^5^	I NH
+ | katalizator | f ^3* H A		1
ch2 — 1	—► ch2 ■ & ■ ■	<j'H2
i NH 1	1NH |	NH i
c=o	1 c=o	c=o
	|-H2C-Ćh-CH2-<..H-CH2-CH-<
Metyleno-bis-
akrylamid	o o
	JL

Pulapkowany enzym (komórki)

c=o

I

nh₂

Akrylamid

Enzym

Rys. 2 Reakcja pułapkowania komórek (lub enzymu) w żelu poliakrylamidowym

cmc£cuiłi . ruzactmc mciuuy uirzymywama iiiemurany ponaKryiamiuowej z immobilizowaną (uwięzioną) inwertazą jako modelowym enzymem oraz zbadanie kinetyki reakcji hydrolizy sacharozy przez immobilizowany enzym.

2. Część eksperymentalna

2.1.    Odczynniki:

1.    Preparat inwertazy z drożdży (otrzymany na poprzednich zajęciach)

2.    o.l * *^{1 r} ’    ‘    ^1TT

3.    Oj 1 M roztwór sacharozy w 0,05 M buforze octanowym, pH 5,0

4.    Roztwór akrylamidu i metyleno-bis-akrylamidu (28% T, 3% C) : rozpuścić 32,5 g akrylamidu i 1,0 g metyleno-bis-akrylamidu w 119,7 ml wody redestylowanej. Przechowywać w lodówce

Uwaga ! Akrylamid jest neurotoksyną przenikającą przez skórę. Należy pracować w rękawiczkach lateksowych

5.    TEMED (N,N,N’,N’ - tetrametylenodiamina)

6.    10% roztwór nadsiarczanu amnrm fnn nr7vcmtnwanin nr7erhnwvwar w Indńwr.p nip dłn7pi

nuL i_yu.z.iv^il

2.2.    Postępowanie:

a) Przygotowanie kasety do polimeryzacji

Przygotować dwie dokładnie umyte i wysuszone płytki szklane o wymiarach około 10 x 15 cm (jedna powinna być krótsza o ok. 3 cm) oraz dwa gumowe paski, grubości 1 mm o wymiarach 2x10 cm, które będą stanowiły przekładki pomiędzy płytkami i określały grubość sppolimeryzowanego żelu.

Ułożyć dokładnie poziomo dłuższą płytkę , umieścić na niej równolegle do siebie obie gumowe przekładki (w odległości około 4 cm od siebie) jak pokazano na Rys. 3:

2