______
I Pkisdwddo ***¥•"• tm łc*krmd»*J«>«nkj
|^tyow%dt«r.« do «udMn« rd«*1r*«gro*mnyoł.. 9««liur« komflrsk roiumyc*
R S»f « pr«*Cl w««ł*m
f r^ł^łP^oksydsucłsranow^ )
iii P^rseiwodo t pcsoksyosrąe/irrsnow* v*«t« a«
|loifttml*i« Rwi»m»cjr«y,rvMv«*^łp<wv»KfW. prrsd *>«**#• m
.'Mprowadran* do studosnM bsit^yw^go substrdu da p»aok»nd*r» c#vianov^j TM0
Bdsbsrwoy «ub*'«*
cfmrowł prraprowsdn barv^>y produ kS
Jt łr *
%AV
IV Paoklidłn IMHwbmwip
Barwny produkt
V Zabarwiony rodwór )««t marzony «pakUololom*lryorr»a
Bal«ks;a modyfikaop gsnstycunąi komórki roMinrwJ matodąlnumnoanłymatyoirai Zastosowany gan mar karowy NPT II, kod/jący lodolrandarat« kanamycjny Parosydata cłaranowa jako arwym priaprowadrajacy raakc.f barowy Substrd TM0
■
_
1. następuje związanie uwolnionego z komórek enzymu z przeciwciałami opłaszczonymi na powierzchni studzienek.
2. Następnie dodawane jest kolejne przeciwciało związane z enzymem, które także wiąże się z fosfotransferazą kanamycyny.
3. Enzym związany z wprowadzanym przeciwciałem ma za zadanie przeprowadzić reakcję, dającą barwny produkt -możliwy do detekcji spektrofotometrem.
4. Enzymem tym jest często peroksydaza chrzanowa (HRP).
5. Substratem, który przeprowadzany jest barwny produkt może być tetrametylobenzydyna (TMB).
6. Powstały produkt będzie barwy żółtej, a intensywność
zabarw ienia roztworu w studzience jest proporcjonalna do ilości związanej łosłotransferazy kanamycyny.