CCF20091118004

CCF20091118004



Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6

Barwienie preparatów parafinowych czerwienią syriuszową [Junąueira i wsp., 1979; Kesler i wsp., 2000]

1. Preparaty parafinowe barwić w roztworze czerwieni Syriusza - 1 godzina.

2.    Preparaty płukać w 1% kwasie octowym- 30 minut.

3.    Preparaty płukać w wodzie destylowanej -3x10 sekund.

4.    Odwodnić preparaty w alkoholu etylowym:

*    I alkohol 99,80% - kilka sekund,

*    II alkohol 99,80% - kilka sekund.

5.    Przesycić preparaty w czystym acetonie - kilka sekund.

6.    Preparaty płukać w czystym ksylenie:

*    I ksylen - kilka sekund,

*    II ksylen - kilka sekund.

3.2. Rejestracja i analiza obrazów preparatów parafinowych barwionych czerwienią syriuszową zmian skórnych w świetle spolaryzowanym

Do rejestracji obrazów i analizie zawartości kolagenu w preparatach parafinowych zmian barwnikowych skóry służy zestaw aparatury, w skład którego wchodzi:

mikroskop świetlny BX41 (Olympus Optical Co. Ltd) z filtrami polaryzującymi -

analizatorem i polaryzatorem,

kamera CCD - DP50 (Olympus Optical Co. Ltd),

komputer NCM Intel Camino 733, P-III-733,

- program komputerowy do rejestracji i analizy - analySIS (Soft Imaging System).

3.1.    Procedura rejestracji i analizy obrazów preparatów parafinowych barwionych czerwienią syriuszową zmian skórnych w świetle spolaryzowanym

1.    Uruchomić komputer.

2.    Uruchomić program analySIS {Soft Imaging System).

3.    Przystawkę z mniejszym filtrem, tzw. analizatorem, należy umieścić w okolicach tubusa mikroskopu.

4.    Większy filtr, tzw. polaryzator należy umieścić tuż nad źródłem światła, czyli pod stolikiem mikroskopu.

5.    Preparaty parafinowe odparafinowane i wybarwione czerwienią syriuszową umieścić na stoliku mikroskopu.

6.    Ustawić polaryzator na 90°.

7.    Ustawić obiektyw 10x.

8.    Wybrać odpowiedni obszar preparatu do rejestracji obrazu (powinien to być brzeg zmiany, centrum i skóra zdrowa otaczająca zmianę).

9.    Zarejestrować obraz.

Aby obraz został prawidłowo zarejestrowany, należy dobrać taki czas rejestracji, przy którym obraz nie byłby zbyt ciemny, ale także nie prześwietlony. Przed przystąpieniem do właściwego zarejestrowania obrazów każdy z nich musi zostać sprawdzony pod kątem ewentualnego niedoświetłenia lub prześwietlenia.

3.1.1.    Procedura określenia optymalnego czasu naświetlania obrazu

1. Zarejestrować obraz w świetle spolaryzowanym (polaryzator ustawiony na 90°) przy wybranym czasie (obraz nr 1).

10


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
CCF20091118004 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Barwienie preparatów parafinowych czerwieni
CCF20091118004 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Barwienie preparatów parafinowych czerwieni
CCF20091118002 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 *    odróżnicowanie preparat
CCF20091118005 _Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 2.    Ten sam obraz zarejes
CCF20091118000 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Ćwiczenie 5 i 6 KOLAGEN W DIAGNOZOWANIU ŁAG
CCF20091118001 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Kolagen jest syntetyzowany przez fibroblast
CCF20091118003 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Molekuły kolagenu będące bogate w aminokwas
CCF20091118006 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 -     Oper , Color Separati
CCF20091118001 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Kolagen jest syntetyzowany przez fibroblast
CCF20091118003 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 Molekuły kolagenu będące bogate w aminokwas
CCF20091118006 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 5 i 6 -     Oper , Color Separati
skanuj0012 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 Uwaga! Oceny jąder komórkowych można dokonywać jedyn
skanuj0012 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 Uwaga! Oceny jąder komórkowych można dokonywać jedyn
skanuj0010 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 Ćwiczenie 3ATYPIA JĄDER KOMÓRKOWYCH JAKO ELEMENT KLA
skanuj0013 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 wyższego rzędu. Na przykład wzrost nowotworu poza to
skanuj0014 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 Przerzuty raka jelita grubego do regionalnych węzłów
skanuj0015 Biologia nowotworzenia — Ćwiczenie 3 Zaobserwuj: przy pow. 200x komórki nowotworowe tworz
skanuj0014 Biologia nowotworzenia - Ćwiczenie 3 Przerzuty raka jelita grubego do regionalnych węzłów

więcej podobnych podstron