polarisations immunoassay” (FPIA; fluorescencyjno-polaryzacyjny test immunoasocjacji, test immunofluorescencyjnej polaryzacji).
Dotychczas dostępne testy EMIT wykrywają barbiturany i trójpierścieniowe antydepresanty w osoczu i moczu. Czułość testów dla moczu jest wyższa niż dla osocza. Wyniki badań osocza muszą być zawsze krytycznie oceniane, ponieważ istnieją znaczne różnice czułości poszczególnych leków w obrębie grup.
Czułość testów płytkowych i paskowych wykonywanych metodami EMIT i FPIA: barbiturany w moczu - 0,3 pg/ml (300 ng/ml), trójpierścieniowe antydepresanty w moczu - 1 pg/ml (1000 ng/ml). Barbiturany w moczu można wykrywać tymi metodami w ciągu 24 godzin od uzyskania moczu, a trójpierścieniowe antydepresanty - do 4 dni.
Oznaczenia ilościowe
Do ilościowego oznaczenia barbituranów w materiale biologicznym (surowica, mocz, popłuczyny żołądka) wykorzystuje się:
1) chromatografię gazową z detekcja masową (GC/MS);
2) analizę widma różnicowego (mono- i dianion) w UV (omawiane również jako sposób identyfikacji barbituranów podczas ćwiczeń); stężenia roztworów wzorcowych rzędu 50 pg/ml (0,05 mg/ml), czyli odpowiadające stężeniu toksycznemu w surowicy;
3) wysokosprawną chromatografię cieczową (HLPC);
4) metodę kolorymetryczną z wykorzystaniem reakcji Parriego (reakcja z jonami kobaltawymi w środowisku bezwodnym (metanol) w obecności zasad, w wyniku której powstaje czerwonofioletowy kompleks, A = 560 nm);
5) argentometrycznie;
6) kompleksometrycznie.
Do ilościowego oznaczenia trójpierścieniowych antydepresantów w materiale biologicznym (surowica, mocz) wykorzystuje się:
1) wysokosprawną chromatografię cieczową (HLPC);
2) chromatografię gazową (GC) z detektorem płomieniowo-jonizacyjnym.
8