skanuj0001

eh

yszczące z czarno

emniejszymi środkami cznego zaczernienia rwa pożywki jest

unatnoczarną strefą mogą być zielone ikiem mtrum

pych cechę [%]

■li zostały zaklasyfi-ae w celu wykrycia i H. Badania wyko-tygenowego Kauff-się stosować suro-tości antygenów Vi umożliwia określe-

wet do 5 dni, dla-je się już po 22-4$ uzyskać także sto-anoustrojów, takie >ALM (ang. Diag-a. Rambach Agar s), Agar Compass h chromogennych

Wśród metod alternatywnych do wykrywania pałeczek Salmonella w żywności coraz częściej wykorzystuje się testy immunoenzymatyczne ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), takie jak Salmonella-Tek, Salmonella Capture Tek (Organon Teknika), Tecra Uniąue Salmonella (Tecra Diagnostics); testy immunochromatografi-czne, tj. Transia Card Salmonella (Diffchamb), Singlepath® Salmonella (Merck); DuPont™ Lateral Flow System (Du Pont); aglutynacyjne testy lateksowe, np. Salmonella Latex Test (Oxoid). Metody te opisano w części I, rozdz.7 (t. 1).

W pełni zautomatyzowaną metodą, wykorzystującą technikę immunoenzymofluo-rescencyjną (ELFA, ang. enzyme linked fluorescent assay) do detekcji bakterii Salmonella w żywności, jest system VIDAS (bioMerieux). Pasek testowy Vidas SLM zawiera mieszaninę wysoce specyficznych przeciwciał monoklonalnych skierowanych zarówno przeciw antygenom O, jak i H. Pozwala na wykrywanie ruchliwych oraz nieruchliwych pałeczek Salmonella. Zastosowanie metod alternatywnych umożliwia skrócenie czasu analizy, jednak w przypadku prób dodatnich (wskazanie obecności Salmonella) wymagane jest potwierdzenie wyniku badania metodą standardową.

5.2.5. Gronkowce chorobotwórcze (koagulazododatnie)

Gronkowce - Staphylococcus są gramdodatnimi, nieruchliwymi, względnie beztlenowymi ziarniakami, szeroko rozpowszechnionymi w różnych środowiskach. Występują w powietrzu, wodzie, ściekach, a także na skórze ludzi i zwierząt, na błonach śluzowych, w jamie nosowo-gardłowej, w górnych drogach oddechowych człowieka, w przewodach strzykowych u krów. Rozwijają się w szerokim zakresie temperatury' od 7 do 48°C, w pH 4,2-9,3 i aktywności wody powyżej 0,85. Bakterie te są oporne na wysuszenie, tolerują duże stężenie sacharydów (50-60%) oraz chlorku sodu (10-20%), jak również wykazują dużą oporność na środki dezynfekcyjne, w tym chlor. Standardowe metody wykrywania bądź oznaczania liczby gronkowców koagulazododatnich przedstawiono na rysunku VII-5.5.

Wykrywanie obecności bakterii Staphylococcus aureus obejmuje trzy etapy:

I    - namnażanie selektywne w pożywce płynnej,

II    - różnicowanie na pożywkach stałych,

III    - badania potwierdzające (zdolność wytwarzania koagulazy).

Podczas badania produktów o niskim poziomie zanieczyszczenia gronkowcami lub możliwości występowania komórek uszkodzonych stosuje się płynną pożywkę namna-żającą Giolitti-Cantoni. Do pożywki tej wprowadza się określoną ilość badanej próbki i inkubuje 24-48 godz. w temperaturze 37°C, w warunkach beztlenowych (powierzchnia pożywki pokryta agarem wodnym). Na obecność gronkowców wskazuje zaczernienie pożywki i/lub czarno-szary osad. Bakterie namnożone w pożywce Giolitti-Cantoni przesiewa się metodą posiewu redukcyjnego na pożywkę Baird-Parkera (B-P) i następnie wykonuje test na obecność koagulazy, bądź na pożywkę Baird-Parkera z plazmą króliczą i fibrynogenem (pożywka B-P z dodatkiem suplementu RPF, ang. rabbit plasma fibrinogen). Pożywka Baird-Parkera oprócz podstawowych składników, zapewniających dobry wzrost gronkowców, zawiera emulsję żółtka jaja. Pożywka Baird-Parkera z RPF zawiera dodatkowo roztwór fibrynogenu krwi bydlęcej i roztwór plazmy króliczej z inhibitorem trypsyny. Obie pożywki zawierają także czynniki

317