*n,
***,
"»/
«ł/
»łie
*(?0
■że
fol
1. Wstęp i cel ćwiczenia.
Przeprowadzenie danej reakcji w klasycznej syntezie chemicznej często wymaga stosowania drastycznych warunków reakcji (wysoka temperatura, wysokie ciśnienie, mocne kwasy i zasady), a także obecność katalizatorów chemicznych. Ponadto katalizatory chemiczne są niespecyficzne względem substratu. co może powodować wejście w reakcję oprócz głównego substratu także innych Substancji które dając niepożądane produkty uboczne mogą zanieczyszczać środowisko reakcji.
W tej sytuacji dogodnym jest wykorzystanie enzymów jako katalizatorów reakcji.
W wielu przypadkach korzystna jest immobilizacja czyli uruchomienie aktywnego enzymu. Związanie ze stałym podłożem umożliwia łatwe jego oddzielenie od mieszaniny reakcji, a także zwiększa jego trwałość, co sprawia, że unieruchomiony enzym można wykorzystywać wielokrotnie przez długie okresy czasu.
Celem ćwiczenia jest zapoznanie się z metodyką immobilizacji inwertezy na podłożu organicznym o budowie polisacharydowej oraz zbadanie wpływu niektórych prametrów na wydajnośąć reakcji izomerazowej.
CM - SEPHADEX jest zmodyfikowanym dekstranem uformowanym w kuleczki. Karboksymetylowe grupy funkcyjne są przyłączone wiązaniami eterowymi do jednostem glukozowych łańcuchów dekstranowych. Ich obecność sprawia, że CM - SEPHADEX jest słabo kwasowym kationiteni. Enzym w tym przypadku immobilizowany jest metodą fizyczną (adsorpcja) i wiąże się z nośnikiem wiązaniami jonowymi.
Inwertaza jest enzymem hydrolitycznym rozkładającym sacharozę (cukier nieredukujący) do glukozy i fruktozy o właściwościach redukujących.
W ćwiczeniu immobilizowany enzym wykorzystuje się w reaktorze porcjowym, zbiornikowym z mieszaniem do otrzymywania cukru inwertowanego z sacharozy. Cukier ten ze względu na obecność bardzo słodkiej fruktozy może być stosowany min do produkcji napojów. Próbę zerową stanowi mieszanina j.w., ale zamiast 0.2 ml badanego roztworu zawiera 0.1 ml wody.
°r>.
°lVv
•0
Taeą
'/
- 2 -