Scan1

c.    porównanie intensywności fotosyntezy w liściach kontrolnych i chlorotycznych (rośliny z niedoborem żelaza). Pomiaru dokonujemy na liściu kontrolnym i liściach chlorotycznych tak jak to opisano powyżej. Natężenie światła utrzymujemy (programujemy) na wysokości: 200 pmoli fotonów x m-²s' a stężenie C0₂ na wysokości 350 ppm. Po odczycie porównujemy wartości Pn, Gs i Ci dla liści ze wszystkich kombinacji.

Materiał roślinny : 3-tygodniowa hodowla ogórków. Kombinacje: pożywka pełna (4 ml 0,5% Fe na litr, kontrola), pożywka pełna - Fe, pożywka pełna +1 ml 0,5% Fe na litr pożywki.

d.    porównanie intensywności fotosyntezy w liściach kontrolnych i traktowanych wcześniej wybranym metalem ciężkim. Pomiaru dokonujemy jak opisano wcześniej dla liści kontrolnych i chloro tycznych.

Materiał roślinny : Ogórki na etapie dwóch liści (3 tygodnie) traktujemy przez 5-7dni Cu 50 pM i Cd 50 pM

2, Pomiar sprawności fotosystemu PSII poprzez pomiar fluorescencji (fluorymetr FMS 2 -Hansatech)

Fluorescencja - emisja światła dalekiej czerwieni przez elektrony powracające ze stanu wzbudzonego do podstawowego. Pomiar parametrów fluorescencyjnych jest wykorzystywany do określenia transportu elektronów in vivo.

Oznaczane parametry to:

sprawność (wydajność) potencjalna, całkowita (Fv/Fm) po 25 minutowej adaptacji liści w ciemności (chinon CU maksymalnie utleniony i gotowy do przyjęcia elektronów) Po błysku światłem wysycenia (800 umoli fotonów rrf² s'¹) uzyskujemy fluorescencje, a jej wielkość świadczy o tym czy fotosystem II jest sprawny, czy nie jest uszkodzony. Uzyskane wartości powyżej 0,810 świadczą o tym, że fotosystem jest sprawny

sprawność (wydajność) aktualna (<j) PSII) po traktowaniu liścia światłem aktyniczny (naturalnym niezbyt mocnym ale powodującym wybicie elektronów). Sprawność aktualna wykazuje zwykle wartości mniejsze od sprawności potencjalnej. Na jej wielkość rzutuje nie tylko sprawność fotosystemu w normalnych warunkach ale również sprawność fazy ciemnej fotosyntezy a konkretnie „odbioru, zużycia" produktów fazy jasnej ATP i NADPH.

Zmniejszona aktywność enzymów fazy ciemnej np. w wyniku stresu suszy czy stresu metali ciężkich może być przyczyną mniejszego „zużycia" ATP czy NADPFI i obniżonej sprawności aktualnej fotosystemu II

fotochemiczne wygaszanie fluorescencji (qP)-fotochemiczne wykorzystanie energii wybicia elektronu ( w przybliżeniu - wielkość redukcji CU po błysku światłem wysycenia). Wysokie qP świadczy o tym, że energia świetlna jest zużywana na wybijanie i przenoszenie elektronów na łańcuchu fotosyntetycznym. Wartość w granicach 0,6-1,0 świadczy o dobrej sprawności fotosystemu

niefotochemiczne wygaszanie energii (ql\IP)-energia uwalniana w postaci ciepła (w przybliżeniu wielkość formy utlenionej CU )• Wartość ta w wielkości od 0,6 do ponad 1,0 świadczy, że duży procent energii świetlnej „wytracany" jest na produkcję ciepła

Wykonanie ćwiczenia:

Na liście w których chcemy oznaczać parametry fluorescencyjne przyczepiamy charakterystyczne „klipsy "mające za zadanie utrzymać późniejsze pole pomiarowe liścia w ciemności (w tym czasie dochodzi do opuszczenia przez wcześniej wybite elektrony przenośników elektronów w łańcuchu, głównie chodzi o plastochinon A (CU), staje się on