Widmo wzbudzenia fluorescencji fluoroforu w rozcieńczonym roztworze powinno być identyczne z widmem absorpcji (z kilkoma wyjątkami).
Widmo fluorescencji rejestrowane w takich samych warunkach nie zależy od długości Mi światła wzbudzającego (czas przebywania cząsteczki w stanie wzbudzonym jest wystarczający dla procesu konwersji wewnętrznej)
Długość fali