ÿþP R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a
n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
M a r e k A d a m c z a k
K a t e d r a B i o t e c h n o l o g i i ¯ y w n o Sc i , U n i w e r s y t e t W a r m i ñ s k o - M a z u r s k i ,
O l s z t y n
E n z y m a t i c m o d i f i c a t i o n o f n a t u r a l t r i a c y l g l y c e r o l s a n d t h e p r o p e r t i e s
o f t h e o b t a i n e d p r o d u c t s
S u m m a r y
S t r u c t u r e d t r i a c y l g l y c e r o l s ( s T A G ) a r e c h e m i c a l c o m p o u n d s w i t h a p r e c i s e l y
d e f i n e d c h e m i c a l a n d s t e r e o c h e m i c a l s t r u c t u r e w h o s e n a t u r a l n u t r i t i o n a l a n d
p h y s i c o - c h e m i c a l p r o p e r t i e s h a v e b e e n m o d i f i e d . M o d i f i e d T A G c a n b e s y n t h e -
s i z e d w i t h t h e a p p l i c a t i o n o f g e n e t i c e n g i n e e r i n g , p h y s i c a l , c h e m i c a l a n d e n z y -
m a t i c m e t h o d s . D u e t o t h e d e m a n d f o r t h e p r e c i s e l y d e t e r m i n e d s t r u c t u r e o f
t h e r e s u l t i n g s T A G , t h e i r s y n t h e s i s w i t h t h e u s e o f l i p a s e s i s p r e f e r r e d .
P r e p a r e d p u r e f a t t y a c i d s o r t h e i r e s t e r s , a s w e l l a s s y n t h e t i c m o n o a c i d
t r i a c y l g l y c e r o l s a r e n e c e s s a r y f o r s T A G s y n t h e s i s . T h e u s e o f s u c h u n n a t u r a l s u b -
s t r a t e s r e q u i r e s a d d i t i o n a l p r o c e s s e s a n d i s c o s t c o n s u m i n g . A d d i t i o n a l l y , i t c a n
l e a d t o l o s s o f v a l u a b l e c o m p o n e n t s p r e s e n t i n n a t u r a l o i l s a n d c o n t r i b u t e t o a
d e c r e a s e i n t h e o x i d a t i v e s t a b i l i t y o f t h e r e s u l t i n g p r o d u c t s . T h e a p p l i c a t i o n o f
n a t u r a l l y o c c u r r i n g f a t s o r o i l s c a n c o n s i d e r a b l y s i m p l i f y s T A G s y n t h e s i s a n d r e -
d u c e t h e c o s t s o f t h e p r o c e s s e s .
R e c e n t l y , m u c h a t t e n t i o n h a s b e e n p a i d t o a n a s s e s s m e n t o f n u t r i t i o n a l
p r o p e r t i e s o f s t r u c t u r e d t r i a c y l g l y c e r o l s o r a c y l g l y c e r o l s .
T h e a i m o f t h i s a r t i c l e i s t o p r e s e n t t h e m e t h o d s o f s T A G s y n t h e s i s , i n c l u d -
A d r e s d o k o r e s p o n d e n c j i i n g e x a m p l e s o f t h e u s e o f n a t u r a l l y o c c u r r i n g t r i a c y l g l y c e r o l s a s s u b s t r a t e s .
M a r e k A d a m c z a k ,
K e y w o r d s :
K a t e d r a B i o t e c h n o l o g i i
b i o c a t a l y s i s , f a t , o i l m o d i f i c a t i o n , l i p a s e , o r g a n i c s o l v e n t , s t r u c t u r e d
¯ y w n o Sc i ,
U n i w e r s y t e t t r i a c y l g l y c e r o l .
W a r m i ñ s k o - M a z u r s k i ,
u l . J . H e w e l i u s z a 1 ,
1 0 - 7 1 8 O l s z t y n ;
e - m a i l :
1 . W s t ê p
m a r e k . a d a m c z a k @
u w m . e d u . p l
S t r u k t u r y z o w a n e t r i a c y l o g l i c e r o l e ( s T A G ) s ¹ z w i ¹ z k a m i c h e -
m i c z n y m i o z m o d y f i k o w a n y c h w s t o s u n k u d o n a t u r a l n y c h t r i a c y -
1 ( 6 8 ) 1 3 1 1 5 1 2 0 0 5
l o g l i c e r o l i w ³ a Sc i w o Sc i a c h ¿ y w i e n i o w y c h i f i z y k o c h e m i c z n y c h ,
M a r e k A d a m c z a k
c h a r a k t e r y z u j ¹ c y m i s i ê Sc i Sl e z d e f i n i o w a n ¹ b u d o w ¹ c h e m i c z n ¹ i s t e r e o c h e m i c z n ¹
( 1 ) . S y n t e z a T A G o z m o d y f i k o w a n y c h w ³ a Sc i w o Sc i a c h , m o ¿ e b y æ p r o w a d z o n a z z a -
s t o s o w a n i e m m e t o d i n ¿ y n i e r i i g e n e t y c z n e j , m e t o d f i z y c z n y c h , c h e m i c z n y c h o r a z
e n z y m a t y c z n y c h ( 2 , 3 ) . Z u w a g i n a w y m a g a n i a d o t y c z ¹ c e Sc i Sl e o k r e Sl o n e j b u d o w y
s T A G i c h s y n t e z a p r e f e r o w a n a j e s t o b e c n i e z u ¿ y c i e m l i p a z .
D o s y n t e z y s T A G s t o s o w a n e s ¹ p r z y g o t o w a n e w t y m c e l u c z y s t e k w a s y t ³ u s z c z o -
w e b ¹ d x i c h e s t r y , a t a k ¿ e s y n t e t y c z n e t r i a c y l o g l i c e r o l e , n a j c z ê Sc i e j m o n o k w a s o w e
( 4 - 6 ) . W y k o r z y s t a n i e t e g o r o d z a j u n i e n a t u r a l n y c h s u b s t r a t ó w w y m a g a r e a l i z a c j i d o -
d a t k o w y c h p r o c e s ó w i j e s t k o s z t o w n e , a p o z a t y m m o ¿ e p r o w a d z i æ d o u t r a t y c e n -
n y c h s k ³ a d n i k ó w o b e c n y c h w n a t u r a l n y c h o l e j a c h i p r z y c z y n i a æ s i ê d o o b n i ¿ e n i a s t a -
b i l n o Sc i o k s y d a c y j n e j o t r z y m a n y c h p r o d u k t ó w . Z a s t o s o w a n i e n a t u r a l n i e w y s t ê p u -
j ¹ c y c h t ³ u s z c z ó w l u b o l e j ó w m o ¿ e z n a c z n i e u ³ a t w i æ p r o c e d u r ê s y n t e z y s T A G o r a z
o b n i ¿ y æ k o s z t y r e a l i z a c j i p r o c e s ó w .
O s t a t n i o w i e l e u w a g i z w r a c a s i ê n a o c e n ê w ³ a Sc i w o Sc i ¿ y w i e n i o w y c h s t r u k t u r y -
z o w a n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i , b ¹ d x a c y l o g l i c e r o l i ( 2 , 7 , 8 ) . C e l e m p u b l i k a c j i j e s t p r z e d -
s t a w i e n i e m e t o d s y n t e z y s T A G , w t y m p r z e d e w s z y s t k i m z a p r e z e n t o w a n i e p r z y -
k ³ a d ó w z a s t o s o w a n i a j a k o s u b s t r a t ó w n a t u r a l n i e w y s t ê p u j ¹ c y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i .
2 . E n z y m a t y c z n a s y n t e z a s t r u k t u r y z o w a n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
W ³ a Sc i w o Sc i l i p a z o r a z w a r u n k i k a t a l i z y z i c h u d z i a ³ e m w m e d i a c h n i e k o n w e n -
c j o n a l n y c h s ¹ p r z e d m i o t e m i n n y c h o p r a c o w a ñ ( 9 - 1 3 ) , d l a t e g o w p r e z e n t o w a n e j p r a -
c y p r z e d s t a w i o n e b ê d ¹ g ³ ó w n i e m o ¿ l i w o Sc i z a s t o s o w a n i a l i p a z w m o d y f i k a c j i t r i a c y -
l o g l i c e r o l i . W y b r a n e p r z y k ³ a d y r e a k c j i k a t a l i z o w a n y c h p r z e z l i p a z y i w y k o r z y s t y w a -
n y c h w s y n t e z i e s T A G p r z e s t a w i o n o n a r y s u n k u 1 i 2 .
O r y g i n a l n ¹ m e t o d ê o t r z y m y w a n i a s T A G z w y d a j n o Sc i ¹ p o n a d 9 0 % z a p r o p o n o w a ³
H a r a l d s s o n z z e s p o ³ e m ( 1 4 - 1 7 ) . P o l e g a o n a n a e n z y m a t y c z n e j s y n t e z i e 1 , 3 - D A G ,
a n a s t ê p n i e w p r o w a d z a n i u k w a s u t ³ u s z c z o w e g o w p o z y c j ê 2 w e f e k c i e r e a k c j i c h e -
m i c z n e j z w y k o r z y s t a n i e m 1 - ( 3 - d i m e t y l o a m i n o p r o p y l ) - 3 - e t y l o k a r b o i m i d u ( E D C I ) ,
w o b e c n o Sc i 4 - d i m e t y l o a m i n o p i r y d y n y ( D M A P ) .
P r o j e k t o w a n i e b u d o w y c h e m i c z n e j s t r u k t u r y z o w a n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i n i e s p r a -
w i a ¿ a d n y c h p r o b l e m ó w , p o n i e w a ¿ z n a n e s ¹ w y m a g a n i a , s k ³ a d c h e m i c z n y i b u d o w a
c h e m i c z n a , j a k i m p o w i n n y s p r o s t a æ T A G o k o r z y s t n y c h w ³ a Sc i w o Sc i a c h ¿ y w i e n i o -
w y c h , l e c z n i c z y c h l u b f u n k c j o n a l n y c h ( t a b . 1 ) .
1 3 2 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
T a b e l a 1
P r z y k ³ a d y z a s t o s o w a ñ w y b r a n y c h s T A G
G r u p a z a s t o s o w a ñ P r z y k ³ a d L i t e r a t u r a
m e d y c y n a i ¿ y w i e n i e c z ³ o w i e k a s u b s t y t u t y m l e k a k o b i e c e g o ( 1 8 , 1 9 )
l i p i d y p o d a w a n e d o ¿ y l n i e ( 2 0 )
t ³ u s z c z e i o l e j e o o b n i ¿ o n e j k a l o r y c z n o Sc i ( 2 1 , 2 2 )
¿ y w n o Sæ f u n k c j o n a l n a t ³ u s z c z e p l a s t y c z n e ( 2 3 - 2 5 )
s u b s t y t u t y m a s ³ a k a k a o w e g o ( 2 6 - 2 8 )
t ³ u s z c z e s m a ¿ a l n i c z e * ( 2 9 - 3 0 )
t ³ u s z c z e o k o r z y s t n y c h w ³ a Sc i w o Sc i a c h r e o l o g i c z n y c h ( 2 3 , 3 1 )
* o l e j e o t r z y m y w a n e g ³ ó w n i e z r o Sl i n t r a n s g e n i c z n y c h
R y s . 1 . M o ¿ l i w o Sc i s y n t e z y s T A G z w y k o r z y s t a n i e m l i p a z o s p e c y f i c z n o Sc i 1 , 3 - s n . ( 1 ) r e a k c j a a c y d o l i -
z y ; ( 2 ) r e a k c j a t r a n s e s t r y f i k a c j i ; ( 3 , 4 ) d w u e t a p o w a s y n t e z a s T A G p o l e g a j ¹ c a n a s y n t e z i e 2 - M A G w r e a k c j i
e t a n o l i z y ( 3 ) , a n a s t ê p n i e e s t r y f i k a c j i o t r z y m a n y c h 2 - M A G z k w a s a m i t ³ u s z c z o w y m i ( 4 ) . M T B E e t e r
m e t y l - t e r t - b u t y l o w y , 1 , 3 - l i p a z a l i p a z a s n - 1 , 3 - s e l e k t y w n a . R e a k c j e p r z e d s t a w i o n o n i e s t e c h i o m e t r y c z -
n i e , b e z w s k a z a n i a p r o d u k t ó w u b o c z n y c h .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 3 3
M a r e k A d a m c z a k
R y s . 2 . K a t a l i z o w a n a p r z e z l i p a z y s y n t e z a s T A G z 1 , 3 - D A G j a k o p r o d u k t e m p o Sr e d n i m .
3 . N a t u r a l n e t ³ u s z c z e i o l e j e s t o s o w a n e d o s y n t e z y s T A G
W ³ a Sc i w o Sc i s T A G d e t e r m i n u j e s k ³ a d k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h o r a z i c h r o z m i e s z -
c z e n i e w c z ¹ s t e c z c e T A G . K o m p o n u j ¹ c , p r o j e k t u j ¹ c b u d o w ê n o w e g o s T A G n a l e ¿ y
u w z g l ê d n i a æ k o r z y s t n e o d d z i a ³ y w a n i e n a o r g a n i z m l u d z k i p o s z c z e g ó l n y c h k w a s ó w
t ³ u s z c z o w y c h ( t a b . 2 ) .
T a b e l a 2
W ³ a Sc i w o Sc i k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h s t o s o w a n y c h w s y n t e z i e s T A G ( 2 , 3 2 )
K w a s y t ³ u s z c z o w e W ³ a Sc i w o Sc i
1 2
k r ó t k o ³ a ñ c u c h o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e ( S C F A ) ( C 2 - C 6 ) k w a s y t ³ u s z c z o w e o n i s k i e j k a l o r y c z n o Sc i ( 2 : 0 - 3 , 5 k c a l / g ; 3 : 0 - 5 , 0
k c a l / g ; 4 : 0 - 6 k c a l / g ; 6 : 0 - 7 , 5 k c a l / g ) ;
s z y b k o a b s o r b o w a n e p r z e z o r g a n i z m l u d z k i z u w a g i n a r o z p u s z -
c z a l n o Sæ w w o d z i e i b u d o w ê c h e m i c z n ¹
Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e ( M C F A ) ( C 8 - C 1 2 ) s ¹ t r a n s p o r t o w a n e ¿ y ³ ¹ w r o t n ¹ b e z p o Sr e d n i o d o w ¹ t r o b y z u w a g i
n a w i e l k o Sæ c z ¹ s t e c z k i i r o z p u s z c z a l n o Sæ w w o d z i e ;
m e t a b o l i z m M C F A j e s t t a k s z y b k i j a k g l u k o z y i n i e u z a l e ¿ n i o n y o d
o b e c n o Sc i k a r n i t y n y ;
w y k a z u j ¹ n i e w i e l k ¹ t e n d e n c j ê d o a k u m u l a c j i , j a k o t ³ u s z c z z a p a -
s o w y , z u w a g i n a n i e w i e l k ¹ p o d a t n o Sæ n a r e e s t r y f i k a c j ê d o T A G ;
m o g ¹ p o w o d o w a æ w z r o s t p o z i o m u c h o l e s t e r o l u w s e r u m
1 3 4 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
1 2
d ³ u g o ³ a ñ c u c h o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e ( L C F A ) ( C 1 4 - C 2 4 ) ; p r e k u r s o r y s y n t e z y e i k o z a n o i d ó w ;
p o l i e n o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e ( P E F A ) N N K T k w a s y t ³ u s z c z o w e z r o d z i n y n - 6 i n - 3 , n i e s y n t e t y z o w a -
n e p r z e z o r g a n i z m l u d z k i ;
z w i ê k s z a j ¹ u d z i a ³ c h o l e s t e r o l u H D L i j e d n o c z e Sn i e o b n i ¿ a j ¹ z a -
w a r t o Sæ L D L i V L D L ;
o b n i ¿ a j ¹ z a w a r t o Sæ c h o l e s t e r o l u o g ó ³ e m w p l a z m i e
s p r z ê ¿ o n y k w a s l i n o l o w y * w y k a z a n e w ³ a Sc i w o Sc i a n t y k a n c e r o g e n n e w u k ³ a d a c h m o d e l o w y c h
* s p r z ê ¿ o n y k w a s l i n o l o w y j e s t k w a s e m d ³ u g o ³ a ñ c u c h o w y m , a l e w y o d r ê b n i o n o g o w z e s t a w i e n i u d l a w y k a z a n i a j e g o k o r z y s t -
n y c h , u n i k a t o w y c h w ³ a Sc i w o Sc i ¿ y w i e n i o w y c h
N a l e ¿ y j e d n o c z e Sn i e p a m i ê t a æ o t y m , ¿ e l i p a z a t r z u s t k o w a c h a r a k t e r y z u j e s i ê
s n - 1 , 3 s e l e k t y w n o Sc i ¹ p o z y c y j n ¹ . P o h y d r o l i z i e t r i a c y l o g l i c e r o l i p o w s t a j ¹ w o l n e k w a -
s y t ³ u s z c z o w e o r a z 2 - m o n o a c y l o - s n - g l i c e r o l , k t ó r y n a s t ê p n i e j e s t r e e s t r y f i k o w a n y d o
T A G . L i p a z a t a r ó w n i e ¿ w y k a z u j e s e l e k t y w n o Sæ w o b e c k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , t j .
d ³ u g o Sc i i c h ³ a ñ c u c h a w ê g l o w e g o o r a z s t o p n i a n i e n a s y c e n i a . S z y b c i e j u w a l n i a n e s ¹
z a c y l o g l i c e r o l i M C F A n i ¿ L C F A .
3 . 1 . O l e j e r o Sl i n n e w s y n t e z i e s T A G
W i ê k s z o Sæ o l e j ó w r o Sl i n n y c h z a w i e r a k w a s y t ³ u s z c z o w e p o l i e n o w e w p o z y c j i s n - 2
i n a s y c o n e k w a s y t ³ u s z c z o w e w p o z y c j a c h z e w n ê t r z n y c h ( t a b . 3 ) . T a k a b u d o w a n a t u -
r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i m o ¿ e u m o ¿ l i w i æ i c h z a s t o s o w a n i e j a k o xr ó d ³ a p o l i e n o w y c h
k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , a w s p e c y f i c z n y c h w a r u n k a c h j a k o s u b s t r a t u d o s y n t e z y m o n o -
a c y l o g l i c e r o l i z a w i e r a j ¹ c y c h w p o z y c j i s n - 2 p o l i e n o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e ( 3 3 - 3 5 ) .
T a b e l a 3
P r z y k ³ a d y t r i a c y l o g l i c e r o l i n i e k t ó r y c h o l e j ó w r o Sl i n n y c h i t ³ u s z c z ó w s t o s o w a n y c h w s y n t e z i e s T A G
T ³ u s z c z / O l e j T A G
m a s ³ o k a k a o w e P O S S O S P O P
o l e j k o k o s o w y D D D C D D C D M
o l e j z n a s i o n p a l m o w y c h D D D M O D O D O
o l e j z o l i w e k O O O O O P O L O
o l e j z o g ó r e c z n i k a L L L P G G O O O
o l e j z w i e s i o ³ k a L L L P G G O O O
o l e j p a l m o w y P O P P O O O L O
o l e j z o r z e s z k ó w z i e m n y c h O O L P O L O L L
o l e j c a n o l a O O L i O O O O O L n
o l e j z k r o k o s z a L L L L L O L L P
o l e j s ³ o n e c z n i k o w y L L L L L O L L P
o l e j l n i a n y L n L n L n L n L n L L n L n O
C 1 0 : 0 ( k w a s k a p r y l o w y ) , D 1 2 : 0 ( k w a s l a u r y n o w y ) , M - 1 4 : 0 ( k w a s m i r y s t y n o w y ) , P 1 6 : 0 ( k w a s p a l m i t y n o w y ) ,
S 1 8 : 0 ( k w a s s t e a r y n o w y ) , O 1 8 : 1 ( k w a s o l e i n o w y ) , L 1 8 : 2 ( k w a s l i n o l o w y ) , L n 1 8 : 3 ( k w a s l i n o l e n o w y ) ,
G 1 8 : 3 ( k w a s - l i n o l e n o w y ) .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 3 5
M a r e k A d a m c z a k
O l e j e s ¹ m o d y f i k o w a n e i w y k o r z y s t y w a n e w c h e m i c z n e j l u b e n z y m a t y c z n e j s y n -
t e z i e t ³ u s z c z ó w p i e k a r s k i c h , c u k i e r n i c z y c h i m a r g a r y n ( t a b . 4 ) . Z a s t o s o w a n i e m e t o d
e n z y m a t y c z n y c h w s y n t e z i e t ³ u s z c z ó w s p e c j a l n e g o p r z e z n a c z e n i a j e s t s z e r o k o o p i -
s a n e w l i t e r a t u r z e , j e d n a k w p r o c e s a c h p r z e m y s ³ o w y c h p o w s z e c h n i e w y k o r z y s t y w a -
n e s ¹ w c i ¹ ¿ m e t o d y c h e m i c z n e . M o ¿ n a p o d a æ j e d n a k p r z y k ³ a d y , k t ó r e w y r a xn i e
w s k a z u j ¹ n a z a l e t y m e t o d e n z y m a t y c z n y c h . P r o w a d z ¹ c e n z y m a t y c z n ¹ i n t e r e s t r y f i k a -
c j ê c z ê Sc i o w o u w o d o r n i o n e g o o l e j u s o j o w e g o z m i e s z a n i n ¹ i n n y c h o l e j ó w o t r z y m a -
n o , n p . s T A G , w k t ó r y c h u d z i a ³ n i e n a s y c o n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h t y p u t r a n s z o -
s t a ³ z n a c z n i e o b n i ¿ o n y w p o r ó w n a n i u d o p r o d u k t ó w o t r z y m a n y c h m e t o d ¹ s y n t e z y
c h e m i c z n e j ( 3 6 , 3 7 ) . Z n a c z n e z m n i e j s z e n i e u d z i a ³ u k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h t y p u t r a n s
w o t r z y m a n y m p r o d u k c i e u z y s k a n o p r o w a d z ¹ c r e a k c j ê e n z y m a t y c z n ¹ w Sr o d o w i s k u
n a d k r y t y c z n e g o C O 2 i w o d o r u ( 3 8 ) .
T a b e l a 4
P r z y k ³ a d y p r a k t y c z n e g o w y k o r z y s t a n i a m o d y f i k a c j i t ³ u s z c z ó w i o l e j ó w
O l e j e / T ³ u s z c z e P r o c e s Z a s t o s o w a n i e L i t e r a t u r a
o l e j p a l m o w y e n z y m a t y c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a p r o d u k t y c u k i e r n i c z e ( 3 9 )
o l e j z o l i w e k e n z y m a t y c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a p r o d u k t y c u k i e r n i c z e ( 4 0 )
o l e j s ³ o n e c z n i k o w y i r z e p a k o w y e n z y m a t y c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a p r o d u k t y c u k i e r n i c z e ( 4 1 )
o l e j s ³ o n e c z n i k o w y c h e m i c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a t ³ u s z c z p i e k a r n i c z y ( 4 2 , 4 3 )
o l e j s o j o w y c h e m i c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a p r o d u k t y c u k i e r n i c z e ( 3 6 , 3 7 )
s t e a r y n a p a l m o w a i o l e j k o k o s o w y e n z y m a t y c z n a i n t e r e s t r y f i k a c j a m a r g a r y n y ( 4 4 )
o l e j s o j o w y u w o d o r n i e n i e m a r g a r y n y ( 3 8 )
J e d n y m z n a j b a r d z i e j c e n i o n y c h t ³ u s z c z ó w c u k i e r n i c z y c h j e s t m a s ³ o k a k a o w e , a l e
j e g o w y s o k a c e n a z m u s z a d o p o s z u k i w a ñ m e t o d s y n t e z y p r o d u k t ó w z b l i ¿ o n y c h
s k ³ a d e m , b u d o w ¹ c h e m i c z n ¹ , a t a k ¿ e w ³ a Sc i w o Sc i a m i f i z y k o c h e m i c z n y m i , d o n a t u -
r a l n e g o m a s ³ a k a k a o w e g o . T ³ u s z c z m a s ³ a k a k a o w e g o c h a r a k t e r y z u j e s i ê s p e c y f i c z n ¹
b u d o w ¹ t r i a c y l o g l i c e r o l i i u n i k a t o w y m s k ³ a d e m k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , z a t e m d o
j e g o s y n t e z y s ¹ p r e f e r o w a n e s e l e k t y w n e s u b s t r a t o w o i p o z y c y j n i e l i p a z y . P r z y k ³ a d y
s k ³ a d u f r a k c j i t r i a c y l o g l i c e r o l i o t r z y m a n y c h p o e n z y m a t y c z n e j i n t e r e s t r y f i k a c j i o l e -
i n y p a l m o w e j p r z e d s t a w i o n o w t a b e l i 5 .
O l e j e r o Sl i n n e s t o s o w a n e s ¹ t a k ¿ e j a k o s u b s t r a t d o s y n t e z y s T A G s p e ³ n i a j ¹ c y c h
s p e c y f i c z n e w y m a g a n i a ¿ y w i e n i o w e . Z o l e j u p a l m o w e g o m e t o d ¹ s y n t e z y e n z y m a -
t y c z n e j o t r z y m a n o s u b s t y t u t y t ³ u s z c z u m l e k o w e g o , k t ó r e n a s t ê p n i e z a s t o s o w a n o
w ¿ y w i e n i u n i e m o w l ¹ t ( 4 6 ) . L i p a z y w y k o r z y s t a n o t a k ¿ e j a k o k a t a l i z a t o r r e a k c j i a c y -
d o l i z y , m a j ¹ c e j n a c e l u w y m i a n ê d ³ u g o ³ a ñ c u c h o w y c h n a s y c o n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o -
w y c h w p o z y c j i s n - 3 t r i a c y l o g l i c e r o l i o l e j u z o r z e s z k ó w z i e m n y c h , n a k w a s o l e i n o w y
( 4 7 ) . W o s t a t n i m c z a s i e s t o s u j ¹ c r e g r e s j ê w i e l o m i a n o w ¹ z o p t y m a l i z o w a n o w a r u n k i
r e a k c j i e n z y m a t y c z n e j u m o ¿ l i w i a j ¹ c e j w p r o w a d z e n i e d o o l e j u k o k o s o w e g o k w a s ó w
p o l i e n o w y c h z g r u p y n - 3 i n - 6 ( 4 8 ) .
1 3 6 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
T a b e l a 5
S k ³ a d k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h f r a k c j i t r i a c y l o g l i c e r o l i w p r o d u k c i e o t r z y m a n y m p o i n t e r e s t r y f i k a c j i o l e i n y p a l -
m o w e j ( 4 5 )
U d z i a ³ t r i a c y l o g l i c e r o l i ( % )
P r o d u k t
O O L P O L P O O P O P S O O P O S S O S S S S
C B 0 , 2 2 , 4 2 , 2 1 8 , 9 2 , 4 4 1 , 3 2 9 , 7 1 , 9
1 0 , 4 1 , 4 2 , 3 1 5 , 3 2 , 9 4 4 , 1 2 9 , 6 1 , 5
2 0 , 7 2 , 1 6 , 0 1 6 , 0 6 , 1 3 8 , 7 2 3 , 1 0 , 7
3 0 , 7 1 , 5 1 , 7 1 3 , 7 3 , 6 3 8 , 5 2 4 , 8 0 , 7
C B - m a s ³ o k a k a o w e , O - k w a s o l e i n o w y , P - k w a s p a l m i t y n o w y , L - k w a s l i n o l e n o w y ; f r a k c j e t r i a c y l o g l i c e r o l i o t r z y m a n e p o w y -
t r ¹ c e n i u z w y k o r z y s t a n i e m h e k s a n u i a c e t o n u w p r o p o r c j i d o m i e s z a n i n y r e a k c y j n e j 1 : 1 0 ( w / v ) ( f r a k c j a 1 ) l u b 1 : 5 ( w / v )
( f r a k c j a 2 ) o r a z a c e t o n u ( f r a k c j a 3 , 1 : 1 0 ( w / v ) .
W a ¿ n ¹ g r u p ê o l e j ó w r o Sl i n n y c h s t a n o w i ¹ t e , k t ó r e z a w i e r a j ¹ d u ¿ e i l o Sc i k w a s u
- l i n o l e n o w e g o ( 1 8 : 3 , n - 6 ; G L A ) . G L A j e s t s t o s o w a n y w l e c z e n i u r ó ¿ n y c h c h o r ó b o r a z
j a k o s k ³ a d n i k k o s m e t y k ó w . J e s t t o r ó w n i e ¿ p r o d u k t p o Sr e d n i w s y n t e z i e k w a s u a r a -
c h i d o n o w e g o ( 2 0 : 4 , n - 6 ; A A ) . G ³ ó w n y m xr ó d ³ e m G L A j e s t o l e j z O e n o t h e r a b i e n n i s
( w i e s i o ³ e k d w u l e t n i ) ( 4 9 ) , B o r a g o o f f i c i n a l i s ( o g ó r e c z n i k ) ( 5 0 ) i R i b e s n i g r u m ( c z a r n a
p o r z e c z k a ) ( 5 1 ) . W c i ¹ ¿ j e d n a k p o s z u k i w a n e s ¹ n o w e xr ó d ³ a t e g o k w a s u t ³ u s z c z o w e -
g o ( 5 2 ) . D u ¿ e z a i n t e r e s o w a n i e w z b u d z a w o s t a t n i m c z a s i e o l e j z E c h i u m v u l g a r e L .
( ¿ m i j o w i e c p o s p o l i t y ) , j a k o xr ó d ³ o k w a s u - l i n o l e n o w e g o o r a z s t e a r y d y n o w e g o
( 1 8 : 4 ) . W o s t a t n i m c z a s i e w y k a z a n o w i e l e p o z y t y w n y c h a s p e k t ó w o d d z i a ³ y w a n i a
k w a s u s t e a r y d y n o w e g o n a o r g a n i z m l u d z k i , w t y m d z i a ³ a n i e p r z e c i w n o w o t w o r o w e
( 5 3 ) .
O l e j e z w i e r a j ¹ c e d u ¿ e i l o Sc i G L A s t o s o w a n o j a k o s u b s t r a t y w s y n t e z i e s T A G b o -
g a t y c h w n - 3 P E K T l u b G L A , n p . w w y n i k u r e a k c j i a c y d o l i z y Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w y c h
k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h z o l e j e m z w i e s i o ³ k a ( 5 4 - 5 5 ) l u b o g ó r e c z n i k a ( 5 6 - 6 0 ) .
O l e j e b o g a t e w G L A s t o s u j e s i ê t a k ¿ e d o o t r z y m y w a n i a k o n c e n t r a t ó w t e g o k w a -
s u p o s e l e k t y w n e j h y d r o l i z i e ( r y s . 3 . 1 . ) b ¹ d x w z b o g a c a n i a w G L A f r a k c j i a c y l o g l i c e r o -
l i ( r y s . 3 . 2 . ) l u b w o l n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h ( r y s . 3 . 3 ) . S h i m a d a i w s p . ( 6 1 , 6 2 ) w y -
k o r z y s t u j ¹ c l i p a z ê z R h i z o p u s d e l e m a r u z y s k a l i f r a k c j ê w o l n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h
z a w i e r a j ¹ c ¹ p o n a d 9 7 % G L A . R a h m a t u l l a h i w s p . ( 6 3 , 6 4 ) w y k a z a l i p r z y d a t n o Sæ l i p a z
d o o t r z y m y w a n i a p r o d u k t ó w b o g a t y c h w G L A d w i e m a m e t o d a m i s t o s u j ¹ c :
1 ) p r e p a r a t L i p o z y m e R M I M d o e s t r y f i k a c j i w o l n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h u z y -
s k a n y c h z o l e j ó w z o g ó r e c z n i k a i w i e s i o ³ k a , z w i ê k s z o n o z a w a r t o Sæ G L A w e f r a k c j i
w o l n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h d o o k o ³ o 7 0 % ,
2 ) l i p a z ê z C a n d i d a r u g o s a d o h y d r o l i z y b i o o l e j ó w u z y s k a n o f r a k c j ê a c y l o g l i c e r o l i
z a w i e r a j ¹ c ¹ o k o ³ o 5 0 % G L A .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 3 7
M a r e k A d a m c z a k
R y s . 3 . P r z y k ³ a d y o t r z y m y w a n i a k o n c e n t r a t ó w k w a s u - l i n o l o w e g o ( G L A ) , w e f r a k c j i w o l n y c h k w a -
s ó w t ³ u s z c z o w y c h w w y n i k u r e a k c j i h y d r o l i z y k a t a l i z o w a n e j , p r z e z s e l e k t y w n ¹ l i p a z ê w z g l ê d e m G L A ( 1 )
l u b w e f r a k c j i a c y l o g l i c e r o l i z u ¿ y c i e m l i p a z y n i e s e l e k t y w n e j w o b e c G L A ( 2 ) ; w e f r a k c j i w o l n y c h k w a s ó w
t ³ u s z c z o w y c h w w y n i k u r e a k c j i e s t r y f i k a c j i z z a s t o s o w a n i e m l i p a z y n i e s e l e k t y w n e j w o b e c G L A ( 3 ) .
3 . 2 . O l e j e r y b i e w s y n t e z i e s T A G
O l e j e r y b i e z a w i e r a j ¹ o k o ³ o 5 0 r ó ¿ n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h i s ¹ g ³ ó w n y m
xr ó d ³ e m k w a s u e i k o z a p e n t a e n o w e g o ( E P A ) o r a z d o k o z a h e k s a e n o w e g o ( D H A ) ( r y s . 4 ) .
W o s t a t n i m c z a s i e o p u b l i k o w a n o k i l k a p r a c z z a k r e s u s y n t e z y s T A G n a b a z i e o l e j ó w
r y b i c h z a w i e r a j ¹ c y c h Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w e k w a s y t ³ u s z c z o w e w p o z y c j i s n - 1 i s n - 3
o r a z P E K T w p o z y c j i s n - 2 ( 6 5 - 6 8 ) . W t a b e l i 6 p r z e d s t a w i o n o s k ³ a d k w a s ó w t ³ u s z c z o -
w y c h o l e j u z t u ñ c z y k a o r a z s T A G o t r z y m a n y c h p o r e a k c j i a c y d o l i z y z t y m o l e j e m .
R ó ¿ n o r o d n o Sæ k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h w o l e j a c h r y b i c h s p r a w i a z w y k l e t r u d n o Sc i
w u z y s k a n i u c z y s t y c h k o n c e n t r a t ó w D H A l u b E P A . B r a k j e s t l i p a z , k t ó r e w y k a z u j ¹ s e -
l e k t y w n o Sæ w s t o s u n k u d o t y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h . T r i a c y l o g l i c e r o l e z a w i e r a j ¹ c e
D H A i E P A b y ³ y s y n t e t y z o w a n e p r z e z H a r a l d s s o n a i w s p . ( 6 9 , 7 0 ) . K o n c e n t r a c j a D H A
i E P A w t r i a c y l o g l i c e r o l a c h b y ³ a w y ¿ s z a n i ¿ 9 0 % , p o p r z e p r o w a d z e n i u k i n e t y c z n e g o
r o z d z i a ³ u k a t a l i z o w a n e g o p r z e z l i p a z y o r a z p o z a s t o s o w a n i u r ó ¿ n y c h t e c h n i k c h r o -
m a t o g r a f i c z n y c h ( H P L C l u b c h r o m a t o g r a f i a n a j o n a c h s r e b r o w y c h ) ( 8 ) .
1 3 8 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 3 9
R y s . 4 . P o r ó w n a n i e s k ³ a d u g ³ ó w n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h o l e j ó w r y b i c h .
M a r e k A d a m c z a k
T a b e l a 6
P o r ó w n a n i e s k ³ a d u k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h w y s t ê p u j ¹ c y c h w p o z y c j i s n - 1 ( 3 ) - i s n - 2 t r i a c y l o g l i c e r o l i o l e j u
z t u ñ c z y k a o r a z s T A G p o a c y d o l i z i e t e g o o l e j u 1
Z a w a r t o Sæ k w a s u t ³ u s z c z o w e g o ( m o l % )
K w a s t ³ u s z c z o w y o l e j z t u ñ c z y k a s T A G
s n - 1 ( 3 ) s n - 2 s n - 1 ( 3 ) s n - 2
8 : 0 N D N D 4 1 , 9 0 , 5
1 4 : 0 1 , 9 1 , 8 0 , 9 1 , 8
1 6 : 0 1 4 , 7 7 , 2 3 , 7 7 , 1
1 6 : 1 4 , 9 0 , 8 1 . 1 1 , 1
1 7 : 0 0 , 8 0 , 4 0 , 3 0 , 5
1 7 : 1 1 , 1 0 , 4 0 , 3 0 , 3
1 8 : 0 5 , 0 0 , 4 0 , 7 0 , 4
1 8 : 1 1 5 , 4 3 , 3 2 , 5 3 , 2
1 8 : 2 1 , 0 0 , 4 0 , 3 0 , 3
2 0 : 4 2 , 0 0 , 7 0 , 7 0 , 6
2 0 : 5 3 , 5 2 , 2 1 , 6 2 , 1
2 2 : 6 8 , 8 1 1 , 9 7 , 8 1 2 , 4
N D n i e o z n a c z a n o
1
r e a k c j a a c y d o l i z y o l e j u z t u ñ c z y k a i k w a s u k a p r y l o w e g o , k a t a l i z o w a n a p r z e z l i p a z ê R h i z o p u s d e l e m a r
L i p a z y s t o s o w a n e d o k o n c e n t r a c j i i o c z y s z c z a n i a E P A i D H A m o g ¹ b y æ p o d z i e l o -
n e n a d w i e k a t e g o r i e : s e l e k t y w n e w s t o s u n k u d o k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h z r o d z i n y
n - 3 , i n n y c h n i ¿ E P A i D H A o r a z t e , k t ó r e d z i a ³ a j ¹ n a E P A l u b D H A . D o p i e r w s z e j k a t e -
g o r i i n a l e ¿ ¹ l i p a z y z P s e u d o m o n a s s p . ( 7 1 ) , P s e u d o m o n a s f l u o r e s c e n s ( 7 2 ) , C a n d i d a
a n t a r c t i c a ( l i p a z a B ) ( 7 3 ) i G e o t r i c h u m c a n d i d u m ( 7 4 ) . L i p a z y z C a n d i d a r u g o s a ( 7 5 ) ,
R h i z o p u s d e l e m a r ( 7 6 ) i R h i z o m u c o r m i e h e i ( 7 7 ) u m o ¿ l i w i a j ¹ r o z d z i e l e n i e E P A i D H A ,
d z i a ³ a j ¹ c s e l e k t y w n i e n a E P A .
3 . 3 . M o d y f i k a c j a t ³ u s z c z u m i k r o b i o l o g i c z n e g o i t ³ u s z c z u z a l g
M i k r o o r g a n i z m y t z w . o l e j o d a j n e g r o m a d z ¹ t ³ u s z c z w i l o Sc i p o n a d 2 0 % o g ó l n e j
z a w a r t o Sc i s k ³ a d n i k ó w s u c h e j m a s y b i o m a s y ( 7 8 ) . N a j b a r d z i e j p r z y d a t n e o l e j e m i -
k r o b i o l o g i c z n e s ¹ p r o d u k o w a n e p r z e z g r z y b y m i k r o s k o p o w e i d r o ¿ d ¿ e . S ¹ o n e w a r -
t o Sc i o w y m xr ó d ³ e m P E K T z r o d z i n y n - 3 i n - 6 o r a z k w a s u - l i n o l e n o w e g o ( G L A , 1 8 : 3 ,
n - 6 ) , d i h o m o - - l i n o l e n o w e g o ( D H G L A ; 2 0 : 3 , n - 6 ) , k w a s u a r a c h i d o n o w e g o ( A A , 2 0 : 4 ,
n - 6 ) , E P A ( 2 0 : 5 , n - 3 ) l u b D H A ( 2 2 : 6 , n - 3 ) ( t a b . 7 ) .
O l e j m i k r o b i o l o g i c z n y ( S C O , S i n g l e C e l l O i l ) m o ¿ e b y æ t a k ¿ e z b l i ¿ o n y s w o i m
s k ³ a d e m i w ³ a Sc i w o Sc i a m i d o m a s ³ a k a k a o w e g o , n p . w y t w a r z a n y p r z e z m u t a n t y l u b
h y b r y d y C r y p t o c o c c u s c u r v a t u s z z a b l o k o w a n ¹ a k t y w n o Sc i ¹ d e s a t u r a z y 9 ( 7 8 ) .
1 4 0 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
T a b e l a 7
G ³ ó w n e xr ó d ³ a p o l i e n o w y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h ( 7 8 )
C a ³ k o w i t a z a w a r t o Sæ P E K T W y d a j n o Sæ s y n t e z y P E K T
R o d z a j k w a s u p o l i e n o w e g o r ó d ³ o k w a s u
( % ) ( m g / g o l e j u )
n - 6 r o Sl i n y :
G L A w i e s i o ³ e k 6 - 1 0
o g ó r e c z n i k 1 9 - 2 5
c z a r n a p o r z e c z k a 1 7
g r z y b y m i k r o s k o p o w e :
M o r t i e r e l l a i s a b e l i n a 1 0 5 5
M u c o r c i r c i n e l l o i d e s 1 5 - 1 8
D H G L A g r z y b y m i k r o s k o p o w e :
M o r t i e r e l l a a l p i n a 1 S - 4 7 - 2 3 2 8 - 1 2 3
a l g i
A A
P o r p h y r i d i u m c r u e n t u m 5 - 3 6 2 0 - 8 0
g r z y b y m i k r o s k o p o w e :
M o r t i e r e l l a a l p i n a 1 S - 4 5 8 2 7 5
n - 3
E P A o l e j r y b i 1 0 - 1 5 2 0
a l g i
C h l o r e l l a m i n u t i s s i m a 3 5 - 4 0
g r z y b y m i k r o s k o p o w e :
M o r t i e r e l l a a l p i n a 1 S - 4 2 0 6 4
P y t h i u m i r r e g u l a r e 2 5 2 5
D H A o l e j r y b i 7 - 1 4
g r z y b y m i k r o s k o p o w e :
T h r a u s t o c h y t r i u m a u r e u m 4 9 7 0
W y s o k o w a r t o Sc i o w e ¿ y w i e n i o w o t ³ u s z c z e m o ¿ n a u z y s k a æ z a l g l u b c y j a n o b a k t e -
r i i , n p . B o t r y t o c o c c u s b r a u n i i , D u n a l i e l l a s a l i n a , N a n n o c h l o r i s s p . , M a n a l a n t h u s s a l i n a l u b
C h l o r e l l a p y r e n o i d o s a ( 7 8 ) . G e n e r a l n i e z a w a r t o Sæ k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h w s u c h e j m a -
s i e m i k r o a l g ( 2 0 - 4 0 % l i p i d ó w w s u c h e j b i o m a s i e ) w y n o s i 3 - 6 % . N a p o d s t a w i e m a t e -
r i a ³ ó w p r z e d s t a w i o n y c h p r z e z j a p o ñ s k ¹ f i r m ê S u n C h l o r e l l a w y n i k a , ¿ e s t o s o w a n e
p r z e z n i c h m i k r o a l g i z a w i e r a j ¹ 8 1 , 8 % n i e n a s y c o n y c h i 1 8 , 2 % n a s y c o n y c h k w a s ó w
t ³ u s z c z o w y c h .
R o b l e s - M e d i n a i w s p . ( 7 9 ) p r z e d s t a w i l i w y d a j n ¹ m e t o d ê s y n t e z y s T A G z a w i e -
r a j ¹ c y c h d u ¿ e i l o Sc i P E K T . Z a s t o s o w a l i l i p a z ê z C a n d i d a a n t a r c t i c a d o e s t r y f i k a c j i g l i -
c e r o l u i k o n c e n t r a t u P E K T u z y s k a n e g o z m i k r o a l g . S t o s u j ¹ c k w a s y t ³ u s z c z o w e
z P h a e o d a c t y l u m t r i c o r n u t u m o t r z y m a l i t r i a c y l o g l i c e r o l e z a w i e r a j ¹ c e 4 2 , 5 % E P A , z a S
w m o d y f i k a c j i l i p i d ó w z P o r p h y r i d i u m c r u e n t u m p o w s t a ³ e t r i a c y l o g l i c e r o l e z a w i e r a ³ y
4 3 , 4 % A A ( k w a s a r a c h i d o n o w y ) i 4 5 , 6 % E P A .
I w a s a k i i w s p . ( 8 0 ) o p r a c o w a l i w a r u n k i s y n t e z y s T A G t y p u M L M s t o s u j ¹ c o l e j z a -
w i e r a j ¹ c y d u ¿ e i l o Sc i D H A i D P A , w y t w a r z a n y p r z e z S c h i z o c h y t r i u m s p . S R 2 1 . P r o d u k t
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 4 1
M a r e k A d a m c z a k
r e a k c j i z a w i e r a ³ k w a s k a p r y l o w y w p o z y c j i s n - 1 i s n - 3 t r i a c y l o g l i c e r o l i , a D H A l u b
D P A w p o z y c j i s n - 2 . Z z a s t o s o w a n i e m l i p a z y z P s e u d o m o n a s s p . K W I - 5 6 o t r z y m a n o
3 6 % p o ¿ ¹ d a n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i , z c z e g o 7 7 - 7 8 % c h a r a k t e r y z o w a ³ o s i ê w ³ a Sc i w ¹
k o n f i g u r a c j ¹ t y p u M L M , a s t o s u j ¹ c l i p a z ê z R h i z o m u c o r m i e h e i o t r z y m a n o 2 2 % s T A G
z a w i e r a j ¹ c y c h P E K T w p o z y c j i s n - 2 .
3 . 4 . M o d y f i k a c j a t ³ u s z c z u m l e k o w e g o
Z m n i e j s z a j ¹ c e s i ê s p o ¿ y c i e t ³ u s z c z u m l e k o w e g o o r a z w y s o k o t ³ u s z c z o w y c h p r o -
d u k t ó w m l e c z n y c h s p o w o d o w a ³ o w z r o s t z a i n t e r e s o w a n i a n o w y m i m e t o d a m i p r o -
d u k c j i s t r u k t u r y z o w a n e g o t ³ u s z c z u l u b m o d y f i k o w a n e g o t ³ u s z c z u m l e k o w e g o o l e p -
s z y c h w ³ a Sc i w o Sc i a c h f i z y c z n y c h , z m n i e j s z o n e j k a l o r y c z n o Sc i i p o ¿ ¹ d a n y c h w a l o -
r a c h s m a k o w o - z a p a c h o w y c h ( 8 1 ) . E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a t ³ u s z c z u m l e k o w e g o
n a j c z ê Sc i e j p r o w a d z o n a j e s t m e t o d ¹ i n t e r e s t r y f i k a c j i ( t a b . 8 ) . P r o d u k t y t e g o t y p u r e -
a k c j i c h a r a k t e r y z u j ¹ s i ê t y m s a m y m s k ³ a d e m k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , z m i a n i e u l e g a
r o z m i e s z c z e n i e k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h w T A G , c o p r o w a d z i d o z m i a n f i z y c z n y c h
w ³ a Sc i w o Sc i t ³ u s z c z u m l e k o w e g o ( t a b . 9 ) .
T a b e l a 8
P r z y k ³ a d y l i p a z s t o s o w a n y c h d o k a t a l i z y i n t e r e s t r y f i k a c j i t ³ u s z c z u m l e k o w e g o
P r e p a r a t y l i p a z Rr o d o w i s k o r e a k c j i L i t e r a t u r a
M u c o r m i e h e i ( L i p o z y m e 1 0 . 0 0 0 L ) m i k r o e m u l s j a ( 8 2 )
M u c o r m i e h e i ( L i p o z y m e 1 0 . 0 0 0 L ) r o z p u s z c z a l n i k o r g a n i c z n y ( 8 3 )
R h i z o p u s n i v e u s ( L i p a s e N ) o d w r ó c o n e m i c e l e ( 8 4 )
P s e u d o m o n a s f l u o r e s c e n s Sr o d o w i s k a o r ó ¿ n y c h i l o Sc i a c h w o d y ( 8 5 )
P s e u d o m o n a s f r a g i m i k r o e m u l s j a ( 8 6 )
P s e u d o m o n a s f l u o r e s c e n s i z o o k t a n ( 8 5 )
R h i z o m u c o r m i e h e i b e z r o z p u s z c z a l n i k a ( 8 7 )
T a b e l a 9
P o r ó w n a n i e z m i a n p o z y c j i w y b r a n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h w t ³ u s z c z u m l e k o w y m p o r e a k c j i i n t e r e s t r y f i k a -
c j i k a t a l i z o w a n e j p r z e z l i p a z ê z R h i z o p u s n i v e u s w u k ³ a d z i e o d w r ó c o n y c h m i c e l i ( 8 4 )
K w a s t ³ u s z c z o w y w p o z y c j i s n - 2 ( % ) K w a s t ³ u s z c z o w y w p o z y c j i s n - 1 , 3 ( % )
K w a s t ³ u s z c z o w y
A B A B
1 2 : 0 5 , 9 4 , 2 3 , 9 5 , 0
1 4 : 0 1 8 , 1 1 9 , 3 1 1 , 5 1 1 , 2
1 6 : 0 3 2 , 1 3 7 , 2 2 7 , 0 1 9 , 9
1 8 : 0 8 , 1 9 , 0 7 , 4 4 , 5
1 8 : 1 1 9 , 1 1 8 , 9 1 7 , 5 2 3 , 8
A t ³ u s z c z n a t y w n y , B t ³ u s z c z p o i n t e r e s t r y f i k a c j i
1 4 2 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
B a l c a o i w s p . ( 8 8 ) p r o w a d z i l i m o d y f i k a c j ê t ³ u s z c z u m l e k o w e g o w k o m b i n o w a -
n y m p r o c e s i e p o l e g a j ¹ c y m n a h y d r o l i z i e i i n t e r e s t r y f i k a c j i k a t a l i z o w a n e j p r z e z l i p a -
z ê z M u c o r j a v a n i c u s , i m m o b i l i z o w a n ¹ n a h y d r o f o b o w e j m e m b r a n i e t y p u h o l l o w f i b e r .
P r o d u k t c h a r a k t e r y z o w a ³ s i ê l e p s z y m i w ³ a Sc i w o Sc i ¿ y w i e n i o w y m i , o b n i ¿ o n a z o s t a ³ a
z a w a r t o Sæ k w a s u l a u r y n o w e g o , m i r y s t y n o w e g o i p a l m i t y n o w e g o , a z w i ê k s z o n a z a -
w a r t o Sæ m o n o e n o w y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h .
A c y d o l i z a b e z w o d n e g o t ³ u s z c z u m l e k o w e g o z k w a s e m o l e i n o w y m z o s t a ³ a s z e r o -
k o o p i s a n a p r z e z B a l c a o i w s p . ( 8 9 - 9 2 ) . W y k a z a l i o n i , ¿ e l i p a z a z M u c o r c i r c i n e l l o i d e s
( w c z e Sn i e j n a z y w a n y M u c o r j a v a n i c u s ) i m m o b i l i z o w a n a n a m e m b r a n i e t y p u h o l l o w f i -
b e r w y k a z y w a ³ a n i s k ¹ s e l e k t y w n o Sæ w s t o s u n k u d o k r ó t k o ³ a ñ c u c h o w y c h k w a s ó w
t ³ u s z c z o w y c h , a k a t a l i z o w a ³ a g ³ ó w n i e w y m i a n ê k w a s u m i r y s t y n o w e g o , p a l m i t y n o -
w e g o i s t e a r y n o w e g o n a k w a s o l e i n o w y . Z m o d y f i k o w a n y t ³ u s z c z m l e k o w y c h a r a k t e -
r y z o w a ³ s i ê w y ¿ s z ¹ t e m p e r a t u r ¹ t o p n i e n i a i z a w i e r a ³ o 2 7 % w i ê c e j k w a s u o l e i n o w e -
g o , z a S m n i e j l a u r y n o w e g o ( 7 , 5 % ) , m i r y s t y n o w e g o ( 5 , 7 % ) i p a l m i t y n o w e g o ( 6 , 1 % )
( 9 2 ) .
C h r i s t e n s e n i H o l m e r ( 1 9 ) p o d d a l i t ³ u s z c z m l e k o w y a c y d o l i z i e , u ¿ y w a j ¹ c k o n c e n -
t r a t p o l i e n o w y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h ( 1 8 : 1 , 1 8 : 2 , 2 0 : 5 , 2 2 : 6 ) i p r e p a r a t L i p o z y m e
R M I M . O t r z y m a n e t r i a c y l o g l i c e r o l e c e c h o w a ³ y s i ê z b l i ¿ o n y m s k ³ a d e m k w a s ó w t ³ u s z -
c z o w y c h i w ³ a Sc i w o Sc i a m i d o t y c h z a w a r t y c h w m l e k u k o b i e c y m , i p r z y d a t n e b y ³ y ,
p o d o b n i e j a k s u b s t y t u t m l e k a k o b i e c e g o B e t a p o l , w ¿ y w i e n i u n i e m o w l ¹ t .
T ³ u s z c z m l e k o w y w p o d w y ¿ s z o n e j t e m p e r a t u r z e ( > 3 0 ° C ) j e s t p ³ y n n y i d l a t e g o
n i e j e s t s t o s o w a n y w p i e k a r n i c t w i e , c u k i e r n i c t w i e , p r o d u k c j i m a r g a r y n y , e t c . Z m i a n y
t e m p e r a t u r y t o p n i e n i a o r a z u d z i a ³ u f r a k c j i t ³ u s z c z u s t a ³ e g o o s i ¹ g n i ê t o p o e n z y m a -
t y c z n e j i n t e r e s t r y f i k a c j i t ³ u s z c z u m l e k o w e g o z o l e j a m i : r z e p a k o w y m ( 9 3 ) , s ³ o n e c z n i -
k o w y m l u b s o j o w y m ( 9 4 ) , c a n o l a ( 3 1 , 9 5 ) i s t e a r y n i a n e m p a l m o w y m ( 9 6 , 9 7 ) .
Z u w a g i n a b a r d z o k o r z y s t n e w ³ a Sc i w o Sc i C L A o p r a c o w u j e s i ê w a r u n k i p r o w a -
d z e n i a r e a k c j i e n z y m a t y c z n y c h w c e l u o t r z y m a n i a t r i a c y l o g l i c e r o l i o z w i ê k s z o n y m
u d z i a l e t e g o k w a s u ( t a b . 1 0 ) .
T a b e l a 1 0
C h a r a k t e r y s t y k a e n z y m a t y c z n i e m o d y f i k o w a n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i o z w i ê k s z o n y m u d z i a l e C L A
I l o Sæ w b u d o w a n e g o
P r e p a r a t l i p a z y S u b s t r a t y L i t e r a t u r a
d o t r i a c y l o g l i c e r o l i C L A
L i p o z y m e I M o l e j p a l m o w y + e s t e r l a u r y n o w y C L A 3 0 % ( w / w ) ( 9 8 )
L i p o z y m e I M 6 0 o l e j k u k u r y d z i a n y + C L A 8 0 % ( w / w ) ( 9 9 )
C h i r a z y m e L 2
C a n d i d a r u g o s a o l e j m e n h a d e n + C L A 2 0 m o l % ( 1 0 0 )
C a n d i d a a n t a r c t i c a t ³ u s z c z m l e k o w y + C L A 6 % ( w / w ) ( 1 0 1 )
M u c o r m i e h e i
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 4 3
M a r e k A d a m c z a k
D o g r u p y s t r u k t u r y z o w a n y c h l i p i d ó w z a l i c z y æ m o ¿ n a t a k ¿ e s t r u k t u r y z o w a n e d i a -
c y l o g l i c e r o l e ( s D A G ) , t j . 1 , 3 - d i - s n - a c y l o g l i c e r o l e , c h a r a k t e r y z u j ¹ c e s i ê p r z e d e w s z y s t -
k i m z d e f i n i o w a n ¹ b u d o w ¹ c h e m i c z n ¹ . D A G w y k o r z y s t y w a n e s ¹ j a k o e m u l g a t o r y .
W o s t a t n i m c z a s i e n a p o d s t a w i e d ³ u g o l e t n i c h b a d a ñ w y k a z a n o , ¿ e s p o ¿ y w a n i e D A G
w o d r ó ¿ n i e n i u d o T A G p o w o d u j e z m n i e j s z e n i e a k u m u l a c j i t ³ u s z c z u w o r g a n i z m i e
l u d z k i m . W o s t a t n i m c z a s i e z a p r o p o n o w a n o z a t e m w a r u n k i w y d a j n e j s y n t e z y D A G ,
z b u d o w a n y c h z C L A ( 1 0 2 , 1 0 3 ) .
4 . M e t o d y a n a l i z y s T A G
N i e z a l e ¿ n i e o d t e g o c z y s y n t e z ê s T A G p r o w a d z i s i ê m e t o d ¹ c h e m i c z n ¹ c z y e n z y -
m a t y c z n ¹ , n a j w a ¿ n i e j s z a j e s t w ³ a Sc i w a a n a l i z a p r o d u k t ó w r e a k c j i . S z c z e g ó l n ¹ u w a -
g ê z w r a c a s i ê n a a n a l i z ê s t e r e o c h e m i c z n e j b u d o w y t r i a c y l o g l i c e r o l i i r o z l o k o w a n i a
k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , o c z y w i Sc i e p o z a a n a l i z ¹ c a ³ k o w i t e g o s k ³ a d u k w a s ó w t ³ u s z -
c z o w y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i . K o n i e c z n e j e s t t a k ¿ e o p r a c o w a n i e m e t o d p o z w a l a j ¹ c y c h
n a ³ a t w e i w i a r y g o d n e o k r e Sl e n i e s k ³ a d u m i e s z a n i n y r e a k c y j n e j o r a z k o n t r o l ê z m i a n
s k ³ a d u i b u d o w y s y n t e t y z o w a n y c h s T A G . W o s t a t n i m c z a s i e Y a m a n e p r z e d s t a w i ³
m e t o d y i t e c h n i k i p r z y d a t n e w a n a l i z i e s k ³ a d u m i e s z a n i n r e a k c y j n y c h o r a z s t e r e o -
c h e m i c z n e j b u d o w y t r i a c y l o g l i c e r o l i .
J e d n a z n a j s t a r s z y c h m e t o d a n a l i z y s t r u k t u r y T A G p o l e g a n a e n z y m a t y c z n e j i c h
h y d r o l i z i e z w y k o r z y s t a n i e m s n - 1 , 3 - r e g i o s e l e k t y w n e j w i e p r z o w e j l i p a z y t r z u s t k o w e j
( P P L ) , a n a s t ê p n i e o k r e Sl e n i u s k ³ a d u k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h 2 - m o n o a c y l o - s n - g l i c e r o l i ,
1 , 2 ( 2 , 3 ) - d i a c y l o - s n - g l i c e r o l i i w o l n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h ( 1 0 4 ) . W P o l s c e i n f o r -
m a c j e o z a s t o s o w a n i u t e j m e t o d y d o a n a l i z y s t r u k t u r y T A G p r z e d s t a w i ³ D r o z d o w s k i
( 1 0 5 , 1 0 6 ) .
K w a s y t ³ u s z c z o w e o b e c n e w r ó ¿ n y c h f r a k c j a c h e s t r ó w g l i c e r o l u , p o m e t y l a c j i
m o g ¹ b y æ a n a l i z o w a n e z a p o m o c ¹ c h r o m a t o g r a f i i g a z o w e j l u b H P L C . N i e s t e t y , w i e l e
w s k a z u j e n a t o , ¿ e P P L n i e m o ¿ e b y æ u ¿ y t a d o a n a l i z y s t r u k t u r y w s z y s t k i c h s T A G ,
g d y ¿ n i e h y d r o l i z u j e o n a , l u b h y d r o l i z u j e z m a ³ ¹ w y d a j n o Sc i ¹ w i ¹ z a n i a e s t r o w e p o -
m i ê d z y g l i c e r o l e m a k w a s a m i t ³ u s z c z o w y m i k r ó t s z y m i n i ¿ 1 2 a t o m ó w w ê g l a , P E K T
d ³ u ¿ s z y m i n i ¿ 2 0 a t o m ó w w ê g l a i k w a s a m i t ³ u s z c z o w y m i z g r u p a m i u t l e n i o n y m i .
A l t e r n a t y w n i e s t r u k t u r a T A G m o ¿ e b y æ o k r e Sl o n a p o p r z e p r o w a d z e n i u r e a k c j i
z w y k o r z y s t a n i e m o d c z y n n i k a G r i g n a r d a ( b r o m e k e t y l o w o m a g n e z o w y ) , k t ó r a p r o -
w a d z i d o o t r z y m a n i a 1 , 2 ( 2 , 3 ) - d i a c y l o - s n - g l i c e r o l i . M e t o d a t a j e s t b a r d z i e j w i a r y g o d -
n a , l e c z ¿ m u d n a i c z a s o c h ³ o n n a , a c z a s a m i z n i e z n a n y c h p r z y c z y n r e a k c j a n i e j e s t
m o ¿ l i w a d o p r z e p r o w a d z e n i a ( 1 0 7 ) . D o k ³ a d n o Sæ m e t o d y b a d a n i a s t r u k t u r y s T A G
m o ¿ n a z w i ê k s z y æ s t o s u j ¹ c d o a n a l i z y D A G c h r o m a t o g r a f i i c i e n k o w a r s t w o w e j , c h i r a l -
n e j H P L C l u b c i e c z o w e j c h r o m a t o g r a f i i c h i r a l n e j z d e t e k t o r e m m a s o w y m e l e k t r o r o z -
p r a s z a n i a j o n i z a c y j n e g o ( 1 0 8 ) .
A l t e r n a t y w ¹ d l a s t o s o w a n i a P P L d o o k r e Sl a n i a s t r u k t u r y s T A G m o g ¹ b y æ i n n e
s n - 1 , 3 - s e l e k t y w n e l i p a z y , j a k n p . l i p a z a z R h i z o p u s a r r h i z u s ( 1 0 9 ) c z y L i p o z y m e I M 2 0
1 4 4 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
( 1 1 0 ) . W i l l i a m s i w s p . ( 1 1 1 ) o p i s a l i n a t o m i a s t m e t o d ê a n a l i z y s t r u k t u r y T A G l u b f o s -
f o l i p i d ó w z z a s t o s o w a n i e m r ó w n i e ¿ l i p a z y R h i z o p u s a r r h i z u s l u b f o s f o l i p a z y A 2 .
W m e t o d z i e t e j w y k o r z y s t u j e s i ê w ³ a Sc i w o Sæ m e t a n o l o w e g o r o z t w o r u N a O H d o m e -
t y l a c j i j e d y n i e e s t r ó w , p o d c z a s g d y m e t a n o l o w y r o z t w ó r H C l u m o ¿ l i w i a m e t y l a c j ê
z a r ó w n o w o l n y c h j a k i z e s t r y f i k o w a n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h .
J e d n ¹ z n a j l e p s z y c h t e c h n i k a n a l i z y s t r u k t u r y s T A G j e s t m e t o d a r e z o n a n s u m a -
1 3
g n e t y c z n e g o , C ( M N R ) l u b u l e p s z o n a m e t o d a r e z o n a n s u m a g n e t y c z n e g o o u l t r a -
w y s o k i e j r o z d z i e l c z o Sc i ( 1 1 2 ) . T e c h n i k i t e j u ¿ y l i z p o w o d z e n i e m Z a m o r a i w s p .
( 1 1 3 ) d o a n a l i z y r ó ¿ n y c h r o d z a j ó w o l e j ó w z o l i w e k , n a t o m i a s t C h a n d l e r i w s p . ( 1 1 4 )
1 3
z a p o m o c ¹ t e c h n i k i N M R C o k r e Sl a l i s e l e k t y w n o Sæ l i p a z k a t a l i z u j ¹ c y c h r e a k c j ê a c y -
d o l i z y .
G r u p a Y a m a n e ( U n i w e r s y t e t w N a g o i ) p r z e d s t a w i ³ a m o ¿ l i w o Sæ w y k o r z y s t a n i a d o
a n a l i z y s T A G t e c h n i k i H P L C n a w y p e ³ n i e n i u z j o n a m i s r e b r a ( 8 0 , 1 1 5 ) l u b z z a s t o s o -
w a n i e m c h i r a l n y c h k o l u m n ( 1 1 6 ) . C h r o m a t o g r a f i a n a j o n a c h s r e b r a u m o ¿ l i w i a r o z -
d z i a ³ n i e n a s y c o n y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h n a p o d s t a w i e l i c z b y z a w a r t y c h w n i c h
w i ¹ z a ñ p o d w ó j n y c h , i c h u m i e j s c o w i e n i a o r a z i c h p r z e s t r z e n n e g o u ³ o ¿ e n i a . M e t o d a
c h r o m a t o g r a f i i n a z ³ o ¿ a c h c h i r a l n y c h u m o ¿ l i w i a a n a l i z ê s t e r e o i z o m e r ó w p o o t r z y -
m a n i u d i a s t e r e o i z o m e r ó w a c y l o g l i c e r o l i .
B a r d z o c z ê s t o d o a n a l i z y s t r u k t u r y s T A G s t o s u j e s i ê t e c h n i k ê H P L C z d e t e k t o r e m
l a s e r o w y m Sw i a t ³ a r o z p r o s z o n e g o ( E L S D , E v a p o r a t i v e L i g h t S c a t t e r i n g D e t e c t o r )
( 1 1 7 , 1 1 8 ) . Z a s a d a d z i a ³ a n i a d e t e k t o r a p o l e g a n a t y m , ¿ e r o z p u s z c z a l n i k o d p a r o w y -
w a n y j e s t w s t r u m i e n i u g a z u n o Sn e g o , w k o m o r z e g r z e w c z e j , z a S a n a l i t j e s t r o z p r a -
s z a n y i w p o s t a c i d r o b n y c h k r o p l i t r a f i a d o k o m o r y d e t e k t o r a , w k t ó r e j Sw i a t ³ o l a s e -
r o w e j e s t r o z p r a s z a n e i o d b i j a n e . I l o Sæ Sw i a t ³ a r o z p r o s z o n e g o j e s t m i e r z o n a i p r z e l i -
c z a n a n a k o n c e n t r a c j ê a n a l i t u . Z z a s t o s o w a n i e m t e j m e t o d y m o ¿ l i w y j e s t r o z d z i a ³
r ó ¿ n y c h T A G i o k r e Sl e n i e r o z m i e s z c z e n i a k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , w t y m n a s y c o n y c h ,
c o n i e j e s t m o ¿ l i w e z w y k o r z y s t a n i e m t r a d y c y j n y c h d e t e k t o r ó w ( 1 1 9 - 1 2 2 ) .
D o a n a l i z y s k ³ a d u m i e s z a n i n y r e a k c y j n e j p o d c z a s s y n t e z y s T A G s t o s o w a n a j e s t
c h r o m a t o g r a f i a c i e n k o w a r s t w o w a z d e t e k t o r e m p ³ o m i e n i o w o - j o n i z a c y j n y m ( T L C - F I D ,
I a t r o s c a n ) . N i e s t e t y , t e c h n i k a t a u m o ¿ l i w i a a n a l i z ê a c y l o g l i c e r o l i , T A G i w o l n y c h
k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h , a l e b e z r o z d z i e l e n i a p o s z c z e g ó l n y c h r o d z a j ó w T A G ( 1 2 3 ) .
C h r o m a t o g r a f i a g a z o w a j e s t p o w s z e c h n i e s t o s o w a n a d o o k r e Sl e n i a s k ³ a d u e s -
t r ó w m e t y l o w y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h i t y l k o n i e k t ó r y c h a c y l o g l i c e r o l i , p o n i e w a ¿
a c y l o g l i c e r o l e n i e s ¹ z w i ¹ z k a m i l o t n y m i w w a r u n k a c h a n a l i z y p r o w a d z o n e j z w y k o -
r z y s t a n i e m c h r o m a t o g r a f u g a z o w e g o . I s t n i e j e j e d n a k m o ¿ l i w o Sæ z a s t o s o w a n i a s p e -
c j a l n y c h t e c h n i k n a s t r z y k i w a n i a p r ó b e k n a k o l u m n ê c h r o m a t o g r a f u g a z o w e g o , c o
u m o ¿ l i w i a a n a l i z ê T A G z a p o m o c ¹ t e c h n i k i w y s o k o t e m p e r a t u r o w e j c h r o m a t o g r a f i i
g a z o w e j ( H T G C ) ( 8 0 , 1 1 5 ) .
M o d y f i k o w a n e T A G m o g ¹ w y s t ê p o w a æ j a k o r ó ¿ n e f o r m y p o l i m o r f i c z n e , c o w p ³ y -
w a n a w ³ a Sc i w o Sc i t o p n i e n i a i k r z e p n i ê c i a t ³ u s z c z u , z a w a r t o Sæ f r a k c j i t ³ u s z c z u s t a -
³ e g o , e t c . D o a n a l i z y t y c h w ³ a Sc i w o Sc i s t o s u j e s i ê r ó ¿ n i c o w ¹ k a l o r y m e t r i ê s k a n i n -
g o w ¹ ( D S C , D i f f e r e n t i a l S c a n n i n g C a l o r i m e t r y ) . W y k o r z y s t u j ¹ c t ê t e c h n i k ê z b a d a n o
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 4 5
M a r e k A d a m c z a k
w ³ a Sc i w o Sc i p r o d u k t ó w i n t e r e s t r y f i k a c j i t r i o l e i n o i l o g l i c e r o l u i t r i p a l m i t y n o i l o g l i c e -
r o l u ( 1 2 4 ) o r a z a c y d o l i z y k w a s u s t e a r y n o w e g o z o l e j e m k o k o s o w y m ( 1 2 5 ) l u b t r i o l e -
i n o i l o g l i c e r o l e m ( 1 2 6 ) .
W o s t a t n i m c z a s i e b a r d z o d u ¿ e z a i n t e r e s o w a n i e t o w a r z y s z y w y k o r z y s t a n i u t e c h -
n i k i M A L D I - T O F . Z n a j d u j e o n a r ó w n i e ¿ z a s t o s o w a n i e w a n a l i z i e l i p i d ó w i p r a w d o p o -
d o b n i e b ê d z i e t e ¿ n i e d ³ u g o u ¿ y w a n a w a n a l i z i e b u d o w y s T A G .
5 . P o d s u m o w a n i e
D o n i e d a w n a s T A G o k r e Sl a n e b y ³ y j a k o n i e k o n w e n c j o n a l n e t ³ u s z c z e p r z y s z ³ o Sc i
( 1 2 7 , 1 2 8 ) . O b e c n i e p r o d u k t y p o d h a n d l o w y m i n a z w a m i B e t a p o l , S a l a t r i m , C a p t e x ,
C a p r e n i n , I m p a c t , e t c . , d o s t ê p n e s ¹ n a r y n k u . W i e l u t ³ u s z c z o m i o l e j o m p o c h o d z e n i a
n a t u r a l n e g o p r z y p i s u j e s i ê w ³ a Sc i w o Sc i p r o z d r o w o t n e l u b n a w e t l e c z n i c z e , a n i e k t ó -
r y m s p o Sr ó d n i c h n i e k o r z y s t n e o d d z i a ³ y w a n i e n a o r g a n i z m l u d z k i . N a t u r a l n e t r i a c y -
l o g l i c e r o l e z r ó ¿ n i c o w a n e p o d w z g l ê d e m w ³ a Sc i w o Sc i f i z y c z n y c h , c h e m i c z n y c h i b i o -
c h e m i c z n y c h m o g ¹ b y æ w ³ a t w y s p o s ó b , z w y k o r z y s t a n i e m n a t u r a l n y c h k a t a l i z a t o -
r ó w , m o d y f i k o w a n e i d o s k o n a l o n e . Z a l e t ¹ w y k o r z y s t a n i a n a t u r a l n y c h s u b s t r a t ó w d o
m o d y f i k a c j i j e s t z a c h o w a n i e w s t a n i e n i e n a r u s z o n y m n a t u r a l n y c h z w i ¹ z k ó w c h e -
m i c z n y c h o b e c n y c h w l i p i d a c h , n p . t o k o f e r o l i , z w i ¹ z k ó w p o l i f e n o l o w y c h .
P r z e d s t a w i o n e p r z y k ³ a d y p o t w i e r d z a j ¹ o g r o m n e m o ¿ l i w o Sc i k a t a l i t y c z n e l i p a z
w e n z y m a t y c z n e j s y n t e z i e s T A G i w s k a z u j ¹ n a w z r a s t a j ¹ c e z n a c z e n i e m e t o d e n z y -
m a t y c z n y c h z a s t ê p u j ¹ c y c h c h e m i c z n ¹ i n t e r e s t r y f i k a c j ê . Z a s t o s o w a n i e s y n t e z y e n z y -
m a t y c z n e j u m o ¿ l i w i ³ o o p r a c o w a n i e w i e l u p r o c e s ó w z w y k o r z y s t a n i e m s z e r o k i e j p a -
l e t y s u b s t r a t ó w . D z i ê k i m e t o d o m e n z y m a t y c z n y m m o ¿ l i w e j e s t o t r z y m y w a n i e w a r -
t o Sc i o w y c h p r o d u k t ó w o p o ¿ ¹ d a n y c h w ³ a Sc i w o Sc i a c h ¿ y w i e n i o w y c h i l e c z n i c z y c h .
W n i e d a l e k i e j p r z y s z ³ o Sc i t e c h n o l o g i e o p r a c o w a n e w s k a l i l a b o r a t o r y j n e j , j a k s i ê
w y d a j e , b ê d ¹ w d r o ¿ o n e w p r z e m y s ³ o w e j p r o d u k c j i s T A G . W c i ¹ ¿ j e d n a k a s p e k t y e k o -
n o m i c z n e n i e p o z w a l a j ¹ n a p e ³ n e w y k o r z y s t a n i e p r z e d s t a w i o n y c h b i o p r o c e s ó w .
N i e z b ê d n e j e s t d a l s z e p o s z u k i w a n i e n o w y c h , b a r d z i e j a k t y w n y c h i s e l e k t y w n y c h
o r a z s t a b i l n y c h l i p a z . W i e l e w s k a z u j e n a t o , ¿ e n o w e l i p a z y p o z y s k i w a n e b ê d ¹ z t a -
n i c h xr ó d e ³ r o Sl i n n y c h ( 1 2 9 , 1 3 0 ) . P o n a d t o , o p r ó c z s k r i n i n g u n o w y c h l i p a z m i k r o b i o -
l o g i c z n y c h p r o w a d z o n e b ê d ¹ p r a c e n a d m o d y f i k a c j ¹ i c h w ³ a Sc i w o Sc i z w y k o r z y s t a -
n i e m , n p . u k i e r u n k o w a n e j e w o l u c j i m o l e k u l a r n e j l u b m e t a g e n o m u .
O b o k u s t a l e n i a p a r a m e t r ó w b i o k a t a l i z y w a ¿ n e s ¹ b a d a n i a k l i n i c z n e n a d o d -
d z i a ³ y w a n i e m u z y s k a n y c h s T A G n a o r g a n i z m l u d z k i . K o n i e c z n e s ¹ t a k ¿ e b a d a n i a n a d
s t a b i l n o Sc i ¹ o k s y d a c y j n ¹ s T A G i c h a r a k t e r y s t y k a i c h w ³ a Sc i w o Sc i f i z y k o c h e m i c z n y c h ,
w t y m o p r a c o w a n i e w i a r y g o d n y c h m e t o d b a d a n i a i c h s t r u k t u r y .
W i ê c e j i n f o r m a c j i o e n z y m a t y c z n e j s y n t e z i e s T A G z a w i e r a j ¹ p r a c e p r z e g l ¹ d o w e
( 3 , 3 2 , 1 3 1 - 1 4 0 ) .
1 4 6 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
W y k a z s t o s o w a n y c h s k r ó t ó w * :
1 , 2 - D A G , 1 , 3 - D A G , 2 , 3 - D A G o d p o w i e d n i o : 1 , 2 - , 1 , 3 - , 2 , 3 - d i a c y l o - s n - g l i c e r o l e
2 - M A G 2 - m o n o a c y l o - s n - g l i c e r o l
C L A s p r z ê ¿ o n y k w a s l i n o l o w y
D A G d i a c y l o g l i c e r o l
D H A d o k o z a h e k s a e n o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( 2 0 : 6 )
E P A e i k o z a p e n t a e n o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( 2 2 : 5 )
F F A w o l n y k w a s t ³ u s z c z o w y
G L A - l i n o l e n o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( 1 8 : 3 , n - 6 )
L C F A d ³ u g o ³ a ñ c u c h o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( C 1 4 - C 2 4 )
M A G m o n o a c y l o g l i c e r o l
M C F A Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( C 8 - C 1 2 )
M C T Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w y t r i a c y l o g l i c e r o l
M L M t r i a c y l o g l i c e r o l z b u d o w a n y z e Sr e d n i o ³ a ñ c u c h o w y c h k w a s ó w t ³ u s z c z o w y c h z e s t r y f i k o w a -
n y c h w p o z y c j i s n - 1 i s n - 3 o r a z k w a s u d ³ u g o ³ a ñ c u c h c o w e g o w p o z y c j i s n - 2
N N K T n i e z b ê d n y n i e n a s y c o n y k w a s t ³ u s z c z o w y
P E K T p o l i e n o w y k w a s t ³ u s z c z o w y
S C F A k r ó t k o ³ a ñ c u c h o w y k w a s t ³ u s z c z o w y ( C 2 - C 6 )
s D A G s t r u k t u r y z o w a n y d i a c y l o g l i c e r o l
s T A G s t r u k t u r y z o w a n y t r i a c y l o g l i c e r o l
T A G t r i a c y l o g l i c e r o l
* Z n a c z e n i e p o z o s t a ³ y c h s k r ó t ó w p r z e d s t a w i o n o w t e k Sc i e p r a c y .
P o d z i ê k o w a n i a
A u t o r s k ³ a d a s e r d e c z n e p o d z i ê k o w a n i a P a n u P r o f e s o r o w i W ³ o d z i m i e r z o w i B e d n a r s k i e m u ( U n i w e r -
s y t e t W a r m i ñ s k o - M a z u r s k i w O l s z t y n i e ) z a c e n n e d y s k u s j e i r a d y p o d c z a s p r z y g o t o w a n i a t e j p u b l i k a c j i .
P u b l i k a c j a p r z y g o t o w a n a w r a m a c h r e a l i z a c j i g r a n t ó w K B N ( P B Z - K B N / 0 2 1 / P 0 6 / 9 9 o r a z 3 P 0 6 T 0 6 0 2 4 ) .
L i t e r a t u r a :
1 . Y a m a n e T . , ( 2 0 0 0 ) , L i p a s e - c a t a l y z e d s y n t h e s i s o f s t r u c t u r e d t r i a c y l g l y c e r o l s c o n t a i n i n g p o l y u n s a t u r a t e d f a t -
t y a c i d s : m o n i t o r i n g t h e r e a c t i o n a n d i n c r e a s i n g t h e y i e l d , i n : E n z y m e s i n l i p i d m o d i f i c a t i o n , E d .
B o r n s c h e u e r U . T . , W i l e y - V C H , W e i n h e i m , 1 4 8 - 1 6 9 .
2 . O s b o r n H . T . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 2 ) , C o m p . R e v . F o o d S c i . F o o d S a f e t y , 3 , 9 3 - 1 0 3 .
3 . B e d n a r s k i W . , A d a m c z a k M . , ( 2 0 0 3 ) , M o d i f i e d l i p i d s a n d f a t m i m e t i c s , i n : C h e m i c a l a n d f u n c t i o n a l p r o -
p e r t i e s o f f o o d l i p i d s , E d s . S i k o r s k i Z . E . , K o l a k o w s k a A . , C R C P r e s s , B o c a R a t o n , 3 0 9 - 3 2 4 .
4 . Y a n k a h V . V . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 7 , 5 , 4 9 5 - 5 0 0 .
5 . F o m u s o L . B . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 3 , 4 0 5 - 4 1 0 .
6 . F o m u s o L . B . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 2 ) , F o o d R e s . I n t e r n a t . , 3 5 , 1 5 - 2 1 .
7 . D i e r i c k N . A . , D e c u y p e r e J . A . , M o l l y K . , v a n B e e k E . , V a n d e r b e k e E . , ( 2 0 0 2 ) , L i v e s t o c k P r o d . S c i . , 7 5 ,
1 2 9 - 1 4 2 .
8 . H a r a l d s s o n G . G . , H j a l t a s o n B . , ( 2 0 0 1 ) , F i s h o i l s a s s o u r c e s o f i m p o r t a n t p o l y u n s t a t u r a t e d f a t t y a c i d s , i n :
S t r u c t u r e d a n d m o d i f i e d l i p i d s , E d s . G u n s t o n e F . D . , M a r c e l D e k k e r , I n c . , N e w Y o r k , 3 1 3 - 3 5 0 .
9 . A n t c z a k T . , G r a c z y k J . , ( 2 0 0 2 ) , B i o t e c h n o l o g i a , 2 , 5 7 , 1 3 0 - 1 4 5 .
1 0 . B o r n s c h e u e r U . T . , A d a m c z a k M . , S o u m a n o u M . M . , ( 2 0 0 3 ) , L i p a s e - c a t a l y s e d s y n t h e s i s o f m o d i f i e d l i -
p i d s , i n : L i p i d s f o r f u n c t i o n a l f o o d s a n d n u t r a c e u t i c a l s , E d . G u n s t o n e F . D . , T h e O i l P r e s s , B r i d g w a t e r ,
1 4 9 - 1 8 2 .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 4 7
M a r e k A d a m c z a k
1 1 . B o r n s c h e u e r U . T . , K a z l a u s k a s R . J . , ( 1 9 9 9 ) , H y d r o l a s e s i n o r g a n i c s y n t h e s i s : r e g i o - a n d s t e r e o s e l e c t i v e
b i o t r a n s f o r m a t i o n , W i l e y - V C H , W e i n h e i m .
1 2 . A n t c z a k T . , S z c z ê s n a - A n t c z a k M . , ( 2 0 0 3 ) , B i o t e c h n o l o g i a , 6 2 , 3 , 1 2 4 - 1 3 8 .
1 3 . A n t c z a k T . , S z c z ê s n a - A n t c z a k M . , ( 2 0 0 3 ) , B i o t e c h n o l o g i a , 6 2 , 3 , 1 3 9 - 1 5 8 .
1 4 . H a r a l d s s o n G . G . , H a l l d o r s s o n A . , K u l a s E . , B r e i v i k H . , ( 2 0 0 0 ) , A O C S A n n u a l M e e t i n g & E x p o , S a n D i e -
g o , A p r i l 2 5 - 2 8 , 2 3 .
1 5 . H a r a l d s s o n G . G . , H a l l d o r s s o n A . , K u l a s E . , ( 2 0 0 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 7 , 1 1 , 1 1 3 9 - 1 1 4 5 .
1 6 . H a l l d o r s s o n A . , M a g n u s s o n C . D . , H a r a l d s s o n G . G . , ( 2 0 0 1 ) , T e t r a h e d r o n L e t t . , 4 2 , 7 6 7 5 - 7 6 7 7 .
1 7 . H a l l d o r s s o n A . , M a g n u s s o n C . D . , H a r a l d s s o n G . G . , ( 2 0 0 3 ) , T e t r a h e d r o n , 5 9 , 9 1 0 1 - 9 1 0 9 .
1 8 . Y a n g T . , X u X . , H e C . , L i L . , ( 2 0 0 3 ) , F o o d C h e m . , 8 0 , 4 7 3 - 4 8 1 .
1 9 . C h r i s t e n s e n T . C . , H o l m e r G . , ( 1 9 9 3 ) , M i l c h w i s s e n s c h a f t , 4 8 , 1 0 , 5 4 3 - 5 4 8 .
2 0 . L e e L . - T . , A k o h C . C . , F l a t t W . P . , L e e J . H . , ( 2 0 0 0 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 4 8 , 1 1 , 5 6 9 6 - 5 7 0 1 .
2 1 . A u e r b a c h M . H . , C h a n g P . W . , K o s m a r k R . , O N e i l l J . J . , P h i l i p s J . C . , ( 1 9 9 8 ) , S a l a t r i m : a f a m i l y o f r e d u -
c e d - c a l o r i e s t r u c t u r e d l i p i d s , i n : S t r u c t u r a l m o d i f i e d f o o d f a t s : s y n t h e s i s , b i o c h e m i s t r y , a n d u s e , E d . C h r i -
s t o p h e A . B . A O C S P r e s s , C h a m p a i g n , I L , 8 9 - 1 2 0 .
2 2 . F o m u s o L . B . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 7 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 4 , 3 , 2 6 9 - 2 7 2 .
2 3 . F o m u s o L . B . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 1 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 4 9 , 9 , 4 4 8 2 - 4 4 8 7 .
2 4 . S e r i b u r i V . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 1 0 , 1 3 3 9 - 1 3 4 5 .
2 5 . L a i O . M . , G h a z a l i H . M . , C h o n g C . L . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 7 , 8 8 1 - 8 8 6 .
2 6 . U n d u r r a g a D . , M a r k o v i t s A . , E r a z o S . , ( 2 0 0 1 ) , P r o c . B i o c h e m . , 3 6 , 9 3 3 - 9 3 9 .
2 7 . G i t l e s e n T . , S v e n s s o n I . , A d l e r c r e u t z P . , M a t t i a s s o n B . , N i l s s o n J . , ( 1 9 9 5 ) , I n d u s t r i a l C r o p s a n d P r o -
d u c t s , 4 , 1 6 7 - 1 7 1 .
2 8 . S e l l a p p a n S . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 7 , 1 1 , 1 1 2 7 - 1 1 3 3 .
2 9 . W a r n e r K . , K n o w l t o n S . , ( 1 9 9 7 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 4 , 1 0 , 1 3 1 7 - 1 3 2 2 .
3 0 . M o u n t s T . L . , W a r n e r K . , L i s t G . R . , N e f f W . E . , W i l s o n R . F . , ( 1 9 9 4 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 1 , 5 ,
4 9 5 - 4 9 9 .
3 1 . R o u s s e a u D . , M a r a n g o n i A . G . , ( 1 9 9 8 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 4 6 , 2 3 7 5 - 2 3 8 1 .
3 2 . A k o h C . C . ( 1 9 9 8 ) , S t r u c t u r e d l i p i d s , i n : F o o d l i p i d s : c h e m i s t r y , n u t r i t i o n , a n d b i o t e c h n o l o g y , E d s . A k o h
C . C . , M i n D . B . , M a r c e l D e k k e r , I n c . , N e w Y o r k , 6 9 9 - 7 2 7 .
3 3 . A d a m c z a k M . , B o r n s c h e u e r U . T . , B e d n a r s k i W . , ( 2 0 0 3 ) , E n z y m e s i n l i p i d m o d i f i c a t i o n , G r e i f s w a l d
U n i v e r s i t y , A l f r i e d - K r u p p K o l l e g , G r e i f s w a l d , G e r m a n y , 2 7 .
3 4 . A d a m c z a k M . , B o r n s c h e u e r U . T . , B e d n a r s k i W . , ( 2 0 0 3 ) , B i o t r a n s , 6 t h i n t e r n a t i o n a l S y m p o s i u m o n B i o -
c a t a l y s i s a n d B i o t r a n s f o r m a t i o n , O l o m o u c , J u n e 2 8 - J u l y 3 , s u p p l e m e n t .
3 5 . A d a m c z a k M . , ( 2 0 0 3 ) , M e d . F a c . L a n d b o u w w . U n i v . G e n t . , 6 4 9 - 6 5 4 .
3 6 . Z e i t o u n M . A . M . , N e f f W . E . , L i s t G . R . , M o u n t s T . L . , ( 1 9 9 3 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 0 , 4 6 1 - 4 7 1 .
3 7 . H u r t o v a S . , S c h m i d t S . , Z e m a n o v i c J . , S i m o n P . , S e k r e t a r S . , ( 1 9 9 6 ) , F e t t / L i p i d , 9 8 , 6 0 - 6 5 .
3 8 . K i n g J . W . , H o l l i d a y R . L . , L i s t G . R . , S n y d e r J . M . , ( 2 0 0 1 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 8 , 1 0 7 - 1 1 3 .
3 9 . C o l e m a n M . H . , M a c r a e A . R . , ( 1 9 8 0 ) , F a t p r o c e s s a n d c o m p o s i t i o n , U K P a t e n t , 1 5 7 7 9 3 3 .
4 0 . C h a n g M . K . , A b r a h a m G . , J o h n V . T . , ( 1 9 9 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 6 7 , 8 3 2 - 8 3 4 .
4 1 . A d l e r c r e u t z P . , ( 1 9 9 4 ) , B i o t e c h n o l . G e n e t . E n g . R e v . , 1 2 , 2 3 1 - 2 5 4 .
4 2 . F o g l i a T . A . , P a t r u s o K . , F e a i r h e l l e r S . H . , ( 1 9 9 3 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 0 , 3 , 2 8 1 - 2 8 5 .
4 3 . S t e f a n A . , R a d e g h i e r i A . , R o d r i g u e z A . G . V . , H o c h k o e p p l e r A . , ( 2 0 0 1 ) , F E B S L e t t . , 4 9 3 , 1 3 9 - 1 4 3 .
4 4 . Z h a n g H . , X u X . , M u H . , N i l s s o n J . , A d l e r - N i s s e n J . , H o y C . - E . , ( 2 0 0 0 ) , S t a r c h / S t a r k e , 5 2 , 2 2 1 - 2 2 8 .
4 5 . C h o n g C . N . , H o h Y . M . , W a n g C . W . , ( 1 9 9 2 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 6 9 , 2 , 1 3 7 - 1 4 0 .
4 6 . K i n g D . M . , P a d l e y F . B . , ( 1 9 9 0 ) , M i l k f a t s u b s t i t u t e s , E u r o p e a n P a t e n t , E P 0 2 0 9 3 2 7 .
4 7 . S r i d h a r R . , L a k s h m i n a r a y a n a G . , K a i m a l T . N . B . , ( 1 9 9 1 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 3 9 , 2 0 6 9 - 2 0 7 1 .
4 8 . R a o R . , M a n o h a r B . , S a m b a i a h K . , L o k e s h B . R . , ( 2 0 0 2 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 9 , 9 , 8 8 5 - 8 9 0 .
4 9 . H u d s o n B . J . F . ( 1 9 8 4 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 6 1 , 5 4 0 - 5 4 3 .
5 0 . U z z a n A . ( 1 9 8 6 ) , R e v . F r . C o r p s G r a s , 3 3 , 3 8 5 - 3 8 9 .
5 1 . T r a i t l e r H . , W i n t e r H . , R i c h l i n U . , I n g e n b l e e k Y . , ( 1 9 8 4 ) , L i p i d s , 1 9 , 9 2 3 - 9 2 8 .
5 2 . G u i l - G u e r r e r o J . L . , G r a c i a M a r o t o F . F . , G i m e n e z G i m e n e z A . , ( 2 0 0 1 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 8 , 7 ,
6 7 7 - 6 8 4 .
1 4 8 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
5 3 . Y a n g B . , G u n s t o n e F . D . , K a l l i o H . , ( 2 0 0 3 ) , O i l s c o n t a i n i n g o l e i c , p a l m i t o l e i c , g - l i n o l e n i c a n d s t e a r i d o n i c
a c i d , i n : L i p i d s f o r f u n c t i o n a l f o o d s a n d n u t r a c e u t i c a l s , E d . G u n s t o n e F . D . T h e O i l y P r e s s , B r i d g w a t e r ,
2 6 3 - 2 9 0 .
5 4 . A k o h C . C . , J e n n i n g s B . H . , L i l l a r d D . A . , ( 1 9 9 6 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 3 , 8 , 1 0 5 9 - 1 0 6 2 .
5 5 . N a m a l S e n a n a y a k e S . P . J . , S h a h i d i F . , ( 1 9 9 9 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 4 7 , 3 1 0 5 - 3 1 1 2 .
5 6 . A k o h C . C . , M o u s s a t a C . O . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 6 , 6 9 7 - 7 0 1 .
5 7 . J u Y . - H . , H u a n g F . - H . , F a n g C . - H . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 8 , 9 6 1 - 9 6 5 .
5 8 . N a m a l S e n a n a y a k e S . P . J . , S h a h i d i F . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 9 , 1 0 0 9 - 1 0 1 5 .
5 9 . S h i m a d a Y . , S u e n a g a M . , S u g i h a r a A . , N a k a i S . , T o m i n a g a Y . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 2 ,
1 8 9 - 1 9 3 .
6 0 . K a w a s h i m a A . , S h i m a d a Y . , N a g a o T . , O h a r a A . , M a t s u h i s a T . , S u g i h a r a A . , T o m i n a g a Y . , ( 2 0 0 2 ) ,
J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 9 , 9 , 8 7 1 - 8 7 7 .
6 1 . S h i m a d a Y . , S u g i h a r a A . , S h i b a h i r a k i M . , F u j i t a H . , N a k a n o H . , N a g a o A . , T e r a i T . , T o m i n a g a Y . ,
( 1 9 9 7 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 4 , 1 1 , 1 4 6 5 - 1 4 7 0 .
6 2 . S h i m a d a Y . , S a k a i N . , S u g i h a r a A . , F u j i t a H . , H o n d a Y . , T o m i n a g a Y . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . ,
7 5 , 1 1 , 1 5 3 9 - 1 5 4 3 .
6 3 . R a h m a t u l l a h M . S . K . S . S . , S h u k l a V . K . S . , M u k h e r j e e K . D . , ( 1 9 9 4 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 1 , 6 ,
5 6 9 - 5 7 3 .
6 4 . R a h m a t u l l a h M . S . K . S . S . , S h u k l a V . K . S . , M u k h e r j e e K . D . , ( 1 9 9 4 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 1 , 6 ,
5 6 3 - 5 6 7 .
6 5 . S h i m a d a Y . , S u g i h a r a A . , M a r u y a m a K . , N a g a o T . , N a k a y a m a S . , N a k a n o H . , T o m i n a g a Y . , ( 1 9 9 6 ) ,
J . F e r m e n t . B i o e n g . , 8 1 , 4 , 2 9 9 - 3 0 3 .
6 6 . J e n n i n g s B . H . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 1 0 , 1 1 3 3 - 1 1 3 7 .
6 7 . X u X . , F o m u s o L . B . , A k o h C . C . , ( 2 0 0 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 7 , 2 , 1 7 1 - 1 7 6 .
6 8 . Z h o u D . , X u X . , M u H . , H o y C . - E . , A d l e r - N i s s e n J . , ( 2 0 0 0 ) , J . F o o d L i p i d s , 7 , 2 6 3 - 2 7 4 .
6 9 . H a r a l d s s o n G . G . , H o s k u l d s s o n P . A . , S i g u r d s s o n S . T . , T h o r s t e i n s s o n F . , G u d b j a r n a s o n S . , ( 1 9 8 9 ) ,
T e t r a h e d r o n L e t t . , 3 0 , 1 3 , 1 6 7 1 - 1 6 7 4 .
7 0 . H a r a l d s s o n G . G . , G u d m u n d s s o n B . O . , A l m a r s s o n O . , ( 1 9 9 5 ) , T e t r a h e d r o n , 5 1 , 3 , 9 4 1 - 9 5 2 .
7 1 . B r e i v i k H . , H a r a l d s s o n G . G . , K r i s t i n s s o n B . , ( 1 9 9 7 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 4 , 1 1 , 1 4 2 5 - 1 4 2 9 .
7 2 . R a k s h i t S . K . , V a s u h i R . , K o s u g i Y . , ( 2 0 0 0 ) , B i o p r o c e s s E n g . , 2 3 , 2 5 1 - 2 5 5 .
7 3 . E s t e b a n C e r d a n L . , R o b l e s M e d i n a A . , G i m e n e z G i m e n e z A . , I b a n e z G o n z a l e z M . J . , M o l i n a G r i m a E . ,
( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 1 0 , 1 3 2 9 - 1 3 3 7 .
7 4 . S h i m a d a Y . , M a r u y a m a K . , O k a z a k i S . , N a k a m u r a M . , S u g i h a r a A . , T o m i n a g a Y . , ( 1 9 9 4 ) , J . A m . O i l
C h e m . S o c . , 7 1 , 9 , 9 5 1 - 9 5 4 .
7 5 . S c h m i t t - R o z i e r e s M . , D e y r i s V . , C o m e a u L . - C . , ( 2 0 0 0 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 7 , 3 , 3 2 9 - 3 3 2 .
7 6 . S h i m a d a Y . , S u g i h a r a A . , Y o d o n o S . , N a g a o T . , M a r u y a m a K . , N a k a n o H . , K o m e m u s h i S . , T o m i n a g a
Y . , ( 1 9 9 7 ) , J . F e r m e n t . B i o e n g . , 8 4 , 2 , 1 3 8 - 1 4 3 .
7 7 . H a r a l d s s o n G . G . , K r i s t i n s s o n B . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 1 1 , 1 5 5 1 - 1 5 5 6 .
7 8 . L e m a n J . ( 1 9 9 7 ) , A d v . A p p l . M i c r o b i o l . , 4 3 , 1 9 5 - 2 4 3 .
7 9 . R o b l e s - M e d i n a A . , E s t e b a n - C e r d a n L . , G i m e n e z - G i m e n e z A . , C a m a c h o - P a e z B . , I b a n e z - G o n z a l e z
M . J . , M o l i n a - G r i m a E . , ( 1 9 9 9 ) , J . B i o t e c h n o l . , 7 0 , 3 7 9 - 3 9 1 .
8 0 . I w a s a k i Y . , H a n J . J . , N a r i t a M . , R o s u R . , Y a m a n e T . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 5 , 5 6 3 - 5 6 9 .
8 1 . B a l c a o V . M . , M a l c a t a F . X . , ( 1 9 9 8 ) , B i o t e c h n o l . A d v . , 1 6 , 2 , 3 0 9 - 3 4 1 .
8 2 . S a f a r i M . , K e r m a s h a S . , P a b a i F . , S h e p p a r d J . D . , ( 1 9 9 4 ) , J . F o o d L i p i d s , 1 , 2 4 7 - 2 6 3 .
8 3 . S a f a r i M . , K e r m a s h a S . , P a b a i F . , ( 1 9 9 3 ) , F o o d B i o t e c h n o l . , 7 , 3 , 2 6 5 - 2 7 3 .
8 4 . S a f a r i M . , K e r m a s h a S . , L a m b o u r s a i n L . , S h e p p a r d J . D . , ( 1 9 9 4 ) , B i o s c i . B i o t e c h n o l . B i o c h e m . , 5 8 , 9 ,
1 5 5 3 - 1 5 5 7 .
8 5 . K a l o P . , H u o t a r i H . , A n t i l a M . , ( 1 9 8 9 ) , F i n n i s h J . D a i r y S c i . , X L V I I , 1 , 2 9 - 3 8 .
8 6 . P a b a i F . , K e r m a s h a S . , M o r i n A . , ( 1 9 9 5 ) , A p p l . M i c r o b i o l . B i o t e c h n o l . , 4 3 , 4 2 - 5 1 .
8 7 . L i e w M . Y . B . , G h a z z a l i H . M . , L o n g K . , L a i O . M . , Y a z i d A . M . , ( 2 0 0 1 ) , F o o d C h e m . , 7 2 , 4 4 7 - 4 5 4 .
8 8 . B a l c a o V . M . , K e m p p i n e n A . , M a l c a t a F . X . , K a l o P . J . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 1 0 ,
1 3 4 7 - 1 3 5 8 .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 4 9
M a r e k A d a m c z a k
8 9 . B a l c a o V . M . , M a l c a t a F . X . , ( 1 9 9 7 ) , J . M o l . C a t a l . B : E n z y m . , 3 , 1 6 1 - 1 6 9 .
9 0 . B a l c a o V . M . , K e m p p i n e n A . , M a l c a t a F . X . , K a l o P . J . , ( 1 9 9 8 ) , E n z y m e M i c r o b . T e c h n o l . , 2 3 , 1 1 8 - 1 2 8 .
9 1 . B a l c a o V . M . , M a l c a t a F . X . , ( 1 9 9 8 ) , B i o t e c h n o l . B i o e n g . , 6 0 , 1 1 4 - 1 2 3 .
9 2 . B a l c a o V . M . , M a l c a t a F . X . , ( 1 9 9 8 ) , E n z y m e M i c r o b . T e c h n o l . , 2 2 , 5 1 1 - 5 1 9 .
9 3 . K a l o P . , V a a r a K . , A n t i l a M . , ( 1 9 8 6 ) , F e t t e S e i f e n A n s t r i c h m i t t e l , 9 , 3 6 2 - 3 6 5 .
9 4 . P a l P . K . , B h a t t a c h a r y y a D . K . , G h o s h S . , ( 2 0 0 1 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 8 , 1 , 3 1 - 3 6 .
9 5 . R o u s s e a u D . , M a r a n g o n i A . G . , ( 1 9 9 8 ) , J . A g r i c . F o o d C h e m . , 4 6 , 2 3 6 8 - 2 3 7 4 .
9 6 . L a i O . M . , G h a n a l i H . M . , C h o F . , C h o n g C . L . , ( 2 0 0 0 ) , F o o d C h e m . , 7 0 , 2 1 5 - 2 1 9 .
9 7 . N o r H a y a t i I . N . , A m i n a h A . , M a m o t S . , N o r A i n i I . N . , N o o r L i d a H . M . , ( 2 0 0 0 ) , J . F o o d L i p i d s , 7 ,
1 7 5 - 1 9 3 .
9 8 . M c N e i l l G . P . , R a w l i n s C . , P e i l o w A . C . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 1 1 , 1 2 6 5 - 1 2 6 8 .
9 9 . M a r t i n e z C . E . , V i n a y J . C . , B r i e v a R . , H i l l J r . C . G . , G a r c i a H . S . , ( 1 9 9 9 ) , F o o d B i o t e c h n o l . , 1 3 , 2 ,
1 8 3 - 1 9 3 .
1 0 0 . G r a c i a H . S . , A r c o s J . A . , W a r d D . J . , H i l l J r . C . G . , ( 2 0 0 0 ) , B i o t e c h n o l . B i o e n g . , 7 0 , 5 8 7 - 5 9 1 .
1 0 1 . G r a c i a H . S . , A r c o s J . A . , K e o u g h K . J . , H i l l J r . C . G . , ( 2 0 0 1 ) , J . M o l . C a t a l . B : E n z y m . , 1 1 , 6 2 3 - 6 3 2 .
1 0 2 . L i a o H . - F . , T s a i W . - C . , C a h n g S . - W . , S h i e h C . - J . , ( 2 0 0 3 ) , B i o t e c h n o l . L e t t . , 2 5 , 1 8 5 7 - 1 8 6 1 .
1 0 3 . G u o Z . , S u n Y . , ( 2 0 0 4 ) , B i o t e c h n o l . P r o g . , 2 0 , 6 1 9 - 6 2 2 .
1 0 4 . B r o c k e r h o f f H . ( 1 9 6 5 ) , J . L i p i d R e s . , 6 , 1 0 - 1 5 .
1 0 5 . D r o z d o w s k i B . , ( 1 9 9 4 ) , A n a l i z a s t r u k t u r a l n a l i p i d ó w m e t o d ¹ e n z y m a t y c z n ¹ , w : C h e m i c z n e i f u n k c j o n a l -
n e w ³ a Sc i w o Sc i s k ³ a d n i k ó w ¿ y w n o Sc i , r e d . S i k o r s k i Z . E . , W N T , W a r s z a w a , 2 2 9 - 2 3 1 .
1 0 6 . D r o z d o w s k i B . , ( 1 9 7 4 ) , Z e s z y t y N a u k o w e P o l i t e c h n i k i G d a ñ s k i e j , C h e m i a X X V , 2 1 7 , 3 - 8 6 .
1 0 7 . B r o c k e r h o f f H . , ( 1 9 6 7 ) , J . L i p i d R e s . , 8 , 1 6 7 - 1 6 9 .
1 0 8 . M y h e r J . J . , K u k s i s A . , G e h e r K . , P a r k P . W . , D i e r s e n - S c h a d e D . A . , ( 1 9 9 6 ) , L i p i d s , 3 1 , 2 , 2 0 7 - 2 1 5 .
1 0 9 . A c r o s J . A . , G r a c i a H . S . , H i l l J r . C . G . , ( 2 0 0 0 ) , B i o t e c h n o l . B i o e n g . , 6 8 , 5 6 3 - 5 7 0 .
1 1 0 . D o u r t o g l o u T . , S t e f a n o u E . , L a l a s S . , D o u r t o g l o u V . , P o u l o s C . , ( 2 0 0 1 ) , A n a l y s t , 1 2 6 , 1 0 3 2 - 1 0 3 6 .
1 1 1 . W i l l i a m s J . P . , K h a n M . U . , W o n g D . , ( 1 9 9 5 ) , J . L i p i d R e s . , 3 6 , 1 4 0 7 - 1 4 1 2 .
1 1 2 . S i m o v a S . , I v a n o v a G . , S . L . S . , ( 2 0 0 3 ) , C h e m . P h y s . L i p i d s , 1 2 6 , 1 6 7 - 1 7 6 .
1 1 3 . Z a m o r a R . , A l b a V . , H i d a l g o F . J . , ( 2 0 0 1 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 8 , 1 , 8 9 - 9 4 .
1 1 4 . C h a n d l e r I . C . , H o w a r t h O . W . , C r o u t D . H . G . , ( 2 0 0 1 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 8 , 9 , 9 5 3 - 9 5 8 .
1 1 5 . H a n J . J . , I w a s a k i Y . , Y a m a n e T . , ( 1 9 9 9 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 6 , 1 , 3 1 - 3 9 .
1 1 6 . I w a s a k i Y . , Y a s u i M . , I s h i k a w a T . , I r o m e s c u R . , H a t a K . , Y a m a n e T . , ( 2 0 0 1 ) , J . C h r o m a t o g r . , 9 0 5 , 1 1 1 - 1 1 8 .
1 1 7 . S t o l y h w o A . , C o l i n D . , G u i o c h o n G . , ( 1 9 8 3 ) , J . C h r o m a t o g r . , 2 6 5 , 1 - 1 8 .
1 1 8 . S t o l y h w o A . , M a r t i n M . , G u i o c h o n G . , ( 1 9 8 7 ) , J . L i q u i d C h r o m a t o g r . , 1 0 , 1 2 3 7 - 1 2 5 3 .
1 1 9 . K e r m a s h a S . , K u b o w S . , S a f a r i M . , R e i d A . , ( 1 9 9 3 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 0 , 2 , 1 6 9 - 1 7 3 .
1 2 0 . H o m a n R . , A n d e r s e n M . K . , ( 1 9 9 8 ) , J . C h r o m a t o g r . : B , 7 0 8 , 2 1 - 2 6 .
1 2 1 . N o r d b a c k J . , L u n d b e r g E . , C h r i s t i e W . W . , ( 1 9 9 8 ) , M a r i n e C h e m . , 6 0 , 1 6 5 - 1 7 5 .
1 2 2 . M u H . , K a l o P . , X u X . , H o y C . - E . , ( 2 0 0 0 ) , E u r . J . L i p i d . S c i . T e c h n o l . , 2 0 2 - 2 1 1 .
1 2 3 . T a t a r a T . , F u j i T . , K a w a s e T . , M i n a g a w a M . , ( 1 9 8 3 ) , L i p i d s , 1 8 , 1 0 , 7 3 2 - 7 3 6 .
1 2 4 . S e r i b u r i V . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 6 , 7 1 1 - 7 1 6 .
1 2 5 . R a o R . , S a n k a r K . Y . , S a m b a i a h K . , L o k e s h B . R . , ( 2 0 0 1 ) , E u r . F o o d R e s . T e c h n o l , 2 1 2 , 3 3 4 - 3 4 3 .
1 2 6 . S e r i b u r i V . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 8 ) , J . A m . O i l C h e m . S o c . , 7 5 , 4 , 5 1 1 - 5 1 6 .
1 2 7 . L e m a n J . , ( 1 9 9 3 ) , P r z e m . S p o ¿ . , 4 7 , 4 5 - 4 7 , 5 3 .
1 2 8 . M e g r e m i s C . J . , ( 1 9 9 1 ) , F o o d T e c h n o l . , 2 , 1 0 8 - 1 1 4 .
1 2 9 . V i l l e n e u v e P . , ( 2 0 0 3 ) , E u r . J . L i p i d . S c i . T e c h n o l . , 1 0 5 , 3 0 8 - 3 1 7 .
1 3 0 . C a r o Y . , P i n a M . , T u r o n F . , G u i l b e r t S . , M o u g e o t E . , F e t s c h D . V . , A t t w o o l P . , G r a i l l e J . , ( 2 0 0 2 ) , B i o -
t e c h n o l . B i o e n g . , 7 7 , 6 9 3 - 7 0 3 .
1 3 1 . B o r n s c h e u e r U . T . , ( 2 0 0 1 ) , L i p i d T e c h n o l . , O c t o b e r , 1 0 4 - 1 0 7 .
1 3 2 . B o r n s c h e u e r U . T . , ( 2 0 0 0 ) , E n z y m e s i n l i p i d m o d i f i c a t i o n , W i l e y - V C H , W e i n h e i m .
1 3 3 . B o r n s c h e u e r U . T . , ( 1 9 9 9 ) , R e c e n t R e s . D e v e l . O i l C h e m . , 3 , 9 3 - 1 0 6 .
1 3 4 . K n a u f V . C . , D e l V e c c h i o A . J . , ( 1 9 9 8 ) , G e n e t i c e n g i n e e r i n g o f c r o p s t h a t p r o d u c e v e g e t a b l e o i l , i n : F o o d
l i p i d s : c h e m i s t r y , n u t r i t i o n , a n d b i o t e c h n o l o g y , E d s . A k o h C . C . , M i n D . B . , M a r c e l D e k k e r , I n c . , N e w
Y o r k , 7 7 9 - 8 0 5 .
1 5 0 P R A C E P R Z E G L ¥ D O W E
E n z y m a t y c z n a m o d y f i k a c j a n a t u r a l n y c h t r i a c y l o g l i c e r o l i
1 3 5 . L e e K . - T . , A k o h C . C . , ( 1 9 9 8 ) , F o o d R e v . I n t . , 1 4 , 1 , 1 7 - 3 4 .
1 3 6 . M u k h e r j e e K . D . , ( 1 9 9 8 ) , L i p i d b i o t e c h n o l o g y , i n : F o o d c h e m i s t r y : c h e m i s t r y , n u t r i t i o n , a n d b i o t e c h n o -
l o g y , E d s . A k o h C . C . , M i n D . B . , M a r c e l D e k k e r , I n c . , N e w Y o r k , 5 8 9 - 6 4 0 .
1 3 7 . P a r k i n K . L . , ( 1 9 9 8 ) , B i o s y n t h e s i s o f f a t t y a c i d s a n d s t o r a g e l i p i d s i n o i l - b e a r i n g s e e d a n d f r u i t t i s s u e s o f
p l a n t s , i n : F o o d l i p i d s : c h e m i s t r y , n u t r i t i o n , a n d b i o t e c h n o l o g y , E d s . A k o h C . C . , M i n D . B . , M a r c e l D e k -
k e r , N e w Y o r k , 7 2 9 - 7 7 8 .
1 3 8 . I w a s a k i Y . , Y a m a n e T . , ( 2 0 0 0 ) , J . M o l . C a t a l . B : E n z y m a t i c , 1 0 , 1 2 9 - 1 4 0 .
1 3 9 . X u X . , ( 2 0 0 0 ) , E u r . J . L i p i d . S c i . T e c h n o l . , 1 0 2 , 2 8 7 - 3 0 3 .
1 4 0 . G u n s t o n e F . D . , ( 1 9 9 8 ) , P r o g . L i p i d R e s . , 3 7 , 5 , 2 7 7 - 3 0 5 .
B I O T E C H N O L O G I A 1 ( 6 8 ) 1 3 1 - 1 5 1 2 0 0 5 1 5 1
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