BORELIA, STREPTOCOCCUS, ENTEROCOCCUS, ARCANOBACTERIUM, CORINOBACTERIUM, RHONOBACTERIUM

Mikrobiologia 28.11.2011

Borelia

Czynniki wirulencji

Lipopolid sacharyd ściany o własciwościach toksycznych oraz peptydoglikan o wlaściwościach prozapalnych -> aktywuje makrofagi które prod IL1 a ta stymuluje limf T co jest ważne w 2 stadium choroby.

Wektor(kleszcz przenosi i nimfy); Erythema nigranis - rumień wędrujący; obiajwy grypopodobne - gorączka bóle mięśniowe. Ten onkres trwa do 30 dni i objawy znikają.ale po kilku tygodniach czy miesiacach zaczynają się objawy nietypowe, bo borelia wedruje z krwią atakujac cun, stawy i serce, zapalenie nerwów twarzowych, reumatoidalne zapalenie stawów (kolano, łokciowy, ramieniowy i bolesność stawów może się przenosic), stany zapalne mieśnia sercowego.

3 stadium - zaniki chrzastki i zanikowe zapalenie skóry

Borelia usadawia się w tkankach jeżeli jest w krwi można ją antybiotykami zabić, natomiast gdy jest w tkance to nie da się wykurzyc

Diagnostyka

Krew plyn stawowy, mozgowo rdzeniowy,

Ogladamy w ciemnym polu albo barwimy giemzą i pod mikroskop, skrawki cienkie i badanie na przeciwciałach; [choroba z Lyme- ludzie zapadali tam na dziwną chorobe objawiajaca się tylko zanikiem chrząstki]

BSK - Kelly, krwe końska , albumina bydleca, antybiotyki neomycyna i amfoterycyna, przez 6 tyg hodujemy i co tydzień sprawdzamy czy rośni; 28-33 stopnie, warunki mikrofilne z dodatkiem CO2,

ELISA

Western-blot

Po 3 tyg pojawiaja się IgM a poźniej IgG i świadczy to o tym ze jest to proces uśpiony, stosunek ilość igM do IgG wskazuje na stadium choroby

Jest szczepionka na bazie białka powierzch A w ameryce, ale u nas może być nieuzyteczna

Paciorkowce

Firmuctus

Klasa : Bacilli

Rząd: Laitobacillaes

Rodzina: Streptococcaceae

Rodzaj: Streptococcus

Enterococcus

Pierwszy podział to podział ze wzg na zdolności hemolityczne paciorkowców:

Beta - najbardziej zjadliwe, alfa, gamma - brak hemolizy

2 podział - podział Shermana biorąc pod uwage objawy choroby:

-ropne albo ropotworcze izolowane z ropy

-mlekowe przy stanach zapalnych gr mlekowego

-kałowe przy st zapal jelit

-zieleniejące z jamy ustnej

3. podział - Lancefield - wł antygenowe, podzial serologiczne, dokladnie dotyczylo to węglowodanu C w ścianie kom:

hodujemy je na bulionie (wyizolowane ze zmian chorobowych), odwirowujemy, wyestrahowujemy HCl i zabijamy w łaźni wodnej lub autoklaw przez 15 min, neutralizujemy do pH obojętnego, jeszcze raz wirujemy i supernatant to antygen.

Surowice mamy gotowe na królikach.

Mianuje się to w teście precipitacji węglanowej; na górze antygen na dole surowica na styku pierścień precypitacyjny.

Gr. A - sterptococcus pyogenes

Gr. B - S. agalactiae

Gr C - S. equi - susp equi i susp zooepidermii; S. dysgalactiae susp dysgalactiae i susp equisimilis - te podkreślone atakują konie

Gr. D - enterococus - E.faecalis, E.faecium, E.durans; w tej gr jest S.suis jest jeszcze gr RST

Gr. E - S. porcinus, ktory jednocześnie należa do PUV

Gr. G - S. canis - u psów i kotów odpowiedzialne za stany ropne

Poza klasyfikacja bardzo ważne są S. uberis i S. pneumonae

Najnowszy podział filogenetyczny - 16srRNA

I paciorkowce ropne (A+B+C+G) - hemoliza beta

II gr mitis (s. mitis, S. sangquinis, S. oralis, S.pneumonae)- alfa albo beta

TE PONIŻEJ SĄ W NADGRUPIE VIRIDANS (ORALIS)

III anginosis (milleri) - S.anginosus, S.intermedius - HEMOLIZA ALFA

IV mutans - S.mutans, S.ratti, S.sobrinus - HEM ALFA

V salicarius- S.salivarius, S. thermophilus - BRAK HEMOLIZY

VI bovis - ma 3 biotypy -1, 2 ,3, S.equinus - BRAK HEMOLIZY

MORFOLOGIA

Ziarniaki G+ tworza łańcuszki różnej długości i poniżej 1 mikrometra (gronkowce powyżej), te zjadliwe posiadają otoczki-> peogenes - kw hialuronowy(operon has, a,b,c), to podj kw glukoloronowego, i N-acetyloglukozaminy; agalacrtiae - kw schialowy, glukoza, galaktoza, glukozamina; pneumonie - otoczka polisacharydowa wielocukrowa; bakt sa tlenowcami , ale są wzg beztlenowcami (5%CO2 poprawia wzrost), katalazo i oksydazo negatywne, bez rzęsek i przetrwalników

Czynniki wirulencji

Białko M o wł cytotoksycznych, antyfagocytarnych i antykomplementarnych; ma charakter antygenowy. Jest 148 genow każdy koduje inny rodzaj białka M - jeżeli mamy angine to wyleczenie nie powoduje wyleczenia z innego [pani się załamała bo ostatnio jak czytała to było 80]

Otoczka - antyfagocytarne

Białko F - o wlaś adhezyjnych

Białko G - o właś antyfagocytarnych

Egzotoksyny

SPE/Spe - A,B,C

Wywołuje szkarlatynę u dzieci i te toksyny wywołują wybroczyny (cytolityczne właściwości). Normalna kom ma tylko jeden gen który koduje toksyne B, ale jest taki fag który koduje A i C i jeżeli zaatakuje kom baktreryjna to wczepia te geny to zaczyna je produkować. Jeżeli ma toksyne A, białko M1, proteinaza - szok toksyczny. toksyny te sa superantygenami, a najwieksze takie wlas ma toksyna A, które pobudzaja limf T do odczynu zapalnego.

Są jeszcze białka hemolizyny O i S. S nie ma charateru antygenowego, wytw hemolizę beta. Bardzo niebezpieczna jest hemolizynaO - indukuje odpowiedz humoralna i powstaja przeciwciała anty O (ASO-antystreptolizy O), miano 200 i powyżej swiadczy o tym ze styknelismy się z paciorkowcem który wytw hemolizyne O. Przeciwciała wykazuja powinowactwo do miozyny mieśniowych włókien i mięśni szkieletowych i sercowych i bardzo często są przy infekcji dlugotrwalej one atakuja miesień sercowy - może dojsc do bloku i łącza się z bakteriami i atakują stawy.

Hemolizyna O wiaze cholesterol scian kom i stają się one hydrofilne (cytolityczne właściwości.

Czynniki rozprzestrzeniania się:

Patogeneza

Stany ropne atakuja wszystkie uklady i narzady, te z białkiem M ciezkie do wyniszczenia

Diagnostyka

Wysięk, ropa, mleko(odwirować), zeskrobiny ze zmian skórnych, płyn mózgowo-rdzeniowy, zmienione tkanki. Przy transporcie próbek nie może dojsc do wysuszenia bo na to sa wrazliwe.

Bad bezpośrednie mikroskopowe - barwienie Grama, pod mikroskopem - granatowe łańcuszki, zwłaszcza z ropy; pneumoniae często wystepuje parami

Bad hodowlane - podłoża wzbogacone najlepiej z krwią, wybiórczo-różnicujące Edwardsa, McConkeya; inkubacja w 38stop, 24-48 h, kolonie sa male szare, ok. 1 mm średnicy, okrągle , błyszczące; susp equi - mukolidalne kolonie (tak samo pneumoniae);

Gram dodatnie - krótsze

Na katalaze negatywny - odróznia od gronkowców!!!!!

Grupujemy w precypitacji

Rtesty biochemiczne - apitesty - przy izolacji końskich paciorkowców, rząd cukrowy krótki - wszystkie rozkladaja maltozę, zooepidem - laktozę, equisimilis - trehalozę;

Mastitis - agalactiae - w tescie CAMPa daje +, uberis - +eskulinę, dysgalactie

Testy

CAMPa - agalactiar

Hydroliza hippuranu sodu - gr B+

Wytw karotenoidu w warunkach beztl - gr B+

Wrażliwość na bacytracynę - gr A+

Wrażliwość na optochinę - pneumoniae

Wraż na żółć - pneumoniae

Reakcja z Amylazą - suis na podłożu ze skrobią, nie wytw acetoiny w szybkim teście

Enterokoki:

Paciorkowce rosnal w 45 stop , 6,5%stez soli, ph 9,6 silnie zasadowy roztwór, 40% żółć, rosnął na Mc Conkeyu jako jedyne!!

Typ I klasaActinobacteria

Rząd - Actinomycetales nocardiaceae

Rodzine - Actinomycetaceae rhodococcus - r. aqui

Arcanobacterium

Gatunki - arcanobacterium haemoliticum i A.peogenes

Corynebacteriaceae

Corynebacterium

C. diphthriae (błonice wywołują)

C. pseudotuberculosis -przerzuwacze, wywołuje serowaciejace zapalenie wezłów chł i naczyń

C. renale, pilosum, cystitidis - przerzuwacze

Arcanobacteriae - atakuje fermy świńskie!!, pałeczki gram +, kokopałeczki do 1,5um dł, bez rzęsek otoczek i przetrwalników; katalazoujemne, wymagają bogatych podłóż, dobrze rosnął na krwi a jeszcze lepiej na Columbii (krew +glukoza), war mikroerofilne?, tlenowce;

Czynniki wirulencji

Piolizyna - cytotoksyna, o właściw hemolitycznych, dermonekrotoksycznych i letalnych, posiada ok. 40% aminokw wspolnych z cholesterolem (podobnie do steptolizynyO), zastepuje tluszcze w ścianie i zmienia ja na hydrofilna, moduluje odp immunologiczna przez stymulację limf T do produkcji cytokin prozapalnych.

Białka adhezyjne -

Enzym DNA-aza - dna neutrofili uszkadza

Neuraminidaza - ułatwia przyczepność bakterii

Proteazy - kazeinaza i żelatynaza, które rozkładają SIgA

Diagnostyka

Wysieki zmienione tk, mleko jeśli mastitis, w

Barwimy gramem (+), siejemy na podloza bogate, 37stop, dluzej się inkubuje ok. 3 dni, drobne kolonie z hemolizą beta.

Autoszczepionki bardzo pomagają.

Corinobaterium - maczugowce

Gram + pałeczki do 5 um długości, roszerzone na jednym biegunie , stad nazwa maczugowce, biegunowo posiadają ziarnistości Ernsta Babesa, które sa skupiskami forsforanu wysokoenergetycznego, nie wytw rzęsek , przetw i otoczek , ale charakterystycznie zbudowana ściana z kw mezodiaminopimelinowego + kw mykolowy w krótkich łańcuchach; cukry arabinoza, galaktoza; kw tłuszczowe - palmitynowy, olejowy, stearynowy, i tuberkulostearynowy(w mykobakterii). Gr renale posiada fimbrie, które ułatwiaja adhezje do śluzówki dróg moczowych

Czynniki wirulencji

Difterie - po zakarzeniu fagiem beta, wytwarza egzotoksyny (konwersja lizogenna!!)

Fosfolipazy - hydrolizuja sfingomielinę wchodzaca w sklad ściany i lipidy

Diagnostyka

Do badania - ropa, mocz(gr renale), zmienione tk(tuberculosis), naczynia limf

Bezpośredni - gram +

Na agar z krwia siejemy, 37stopni, aerofilne w pierwszych pasazach, hodujemy 2-3 dni, charakt kolonie, pseudotuberkulosis przypominaja kolonie prątków, drobne suche, matowe, białe, z warstwa hemolizy beta, ; renale - metne, cystitidis - przejrzyste;

Renale nie rozkłada maltozy , pseudotuberkulosis

Rhodococcus

Gram+ posiadaja otoczke polisacharydową, dzieki kw mykolowymw ścianie wybarwiaja się zmodyfikowaną metodą Ziehl- neelsena, katalazododatnie, na agarze odzywczym z dodatkiem krwi i tyminy??, tlenowe, mikroaerofilne,

Czynniki wirulecji

Namnazaja się w makrofagach nie dopuszczajac do fuzji fagosomu z lizosomem. W plazmidach są geny które kodują syntezę białek VapA i B (białka pow o charakterze adhezji),

Otoczka, kw mykolowe, factor equi- dwa enzymy fosfolipaza C i oksydaza cholesterolowa, które działają cytolitycznie.

Rhodococcus - brochopneumonie wywołuje szczególnie u młodych zwierząt, zaraz z kałem i długo przebywa w glebie.

Wymazy z gr drog oddechowych, pod mikroskopem drobne paleczki gram +, na podłozach wzbogaconych 2-3 dni, drobne kolonie a po 4-5 dniach zrobia się mukoidalne i zabawia się na łososiowy kolor, beta hemoliza