Adam Łapiński
Maciej Płoński gr.10
Sprawozdanie nr 5
Temat: Analiza mikrobiologiczna powietrza dla celów sanitarnych.
1. Cel ćwiczenia:
Celem ćwiczenia jest przeprowadzenie oceny stopnia zanieczyszczenia powietrza pomieszczeń zamkniętych pod względem mikrobiologicznym, ze szczególnym uwzględnieniem aspektu sanitarnego.
2. Zakres ćwiczenia:
-przeprowadzenie badania mikrobiologicznego powietrza w pomieszczeniach ( w sali oraz na korytarzu) obejmuje oznaczenie: ogólnej liczby bakterii z uwzględnieniem bakterii pigmentowych i sporowych, liczby gronkowców, oraz liczby promieniowców i ogólnej liczby grzybów z uwzględnieniem pleśni i grzybów drożdżopodobnych,
-zinterpretowanie uzyskanych wyników według kryteriów oceny powietrza pod względem mikrobiologicznym zaproponowanych przez Krzysztofika,
-porównanie stopnia zanieczyszczenia powietrza w sali oraz na korytarzu pod względem mikrobiologicznym
3. Sposób wykonania ćwiczenia
Analiza mikrobiologiczna powietrza była wykonywana w dwóch grupach. Jedna grupa pobierała próbki do badań na korytarzu, natomiast druga w sali. W obu przypadkach próbki były pobierana dwoma metodami: metodą sedymentacyjną, oraz metodą zderzeniową.
Metoda sedymentacyjna- metoda ta polega na swobodnym opadaniu z powietrza mikroorganizmów na podłoże stałe w określonym czasie :
-płytki Petriego z odpowiednim podłożem ustawiamy w miejscu przeznaczonym do badania, zdejmujemy z nich wieczka i pozostawiamy otwarte na okres 10 minut w przypadku oznaczania ogólnej liczby bakterii i na 30 minut przy oznaczaniu pozostałych grup mikroorganizmów. Po ekspozycji płytki zakrywamy i poddajemy inkubacji w odpowiedniej temperaturze
Metoda zderzeniowa- metoda polega na wychwytywaniu mikroorganizmów w wyniku działania siły uderzeniowej określonej objętości powietrza, skierowanej na powierzchnię podłoża:
-aparat szczelinowy ustawiamy w miejscu przeznaczonym do badania, zdejmujemy pokrywę aparatu i dezynfekujemy ją dokładnie za pomocą denaturatu. Na stoliku aparatu umieszczamy otwartą płytkę Petriego z odpowiednim podłożem stałym, zamykamy pokrywę i uruchamiamy aparat. W przypadku oznaczania ogólnej liczby bakterii oraz grzybów zasysamy 10dm3 powietrza w czasie 1 minuty, przy oznaczaniu pozostałych bakterii i grzybów zasysamy 20dm3 powietrza w czasie 2 minut.4. Rodzaje podłoża i warunki inkubacji dla określonych grup mikroorganizmów:
1. Oznaczenie ogólnej liczby bakterii z uwzględnieniem bakterii pigmentowych i sporowych:
Używamy podłoża agarowego, czas inkubacji 24 i 48 godzin dla temperatur inkubacji, odpowiednio 37 i 20 0C
2. Oznaczenie liczby gronkowców:
Używamy podłoża agarowego według Chapmana, czas inkubacji 48 godzin, temperatura inkubacji 37oC- do liczenia wybieramy kolonie gronkowców chorobotwórczych (otoczonych żółtą strefą)
3. Oznaczenie liczby promieniowców:
Używamy podłoża agarowego według Pochona, czas inkubacji 6 dni, temperatura inkubacji 26oC - do liczenia wybieramy typowe kolonie promieniowców ( okrągłe, płaskie lub wypukłe, matowe z białawym nalotem, suche, wykazujące zapach „ziemny”)
4. Oznaczenie ogólnej liczby grzybów z uwzględnieniem pleśni i grzybów drożdżopodobnych:
Używamy podłoża agarowego według Sabourauda, czas inkubacji 6 dni, temperatura inkubacji 26oC - liczymy wyrosłe kolonie grzybów określając liczbę pleśni oraz liczbę grzybów drożdżopodobnych
Wyniki podajemy jako liczbę podanych grup organizmów w 1m3 powietrza
Wzory służące do określenia liczby mikroorganizmów w 1m3 powietrza:
Dla metody sedymentacyjnej:
X- średnia ilość mikroorganizmów w 1m3
a-średnia ilość kolonii na powierzchni podłoża
r-promień płytki Petriego, w naszym przypadku 4,5 cm
t- czas ekspozycji w minutach
Dla metody zderzeniowej:
X- średnia ilość mikroorganizmów w 1m3
a-średnia ilość kolonii na powierzchni podłoża
v- ilość przepuszczonego powietrza
t- czas pobierania próby powietrza w minutach
Tabela 1. Przedstawiająca wyniki dla prób pobranych w sali
Oznaczenia |
Miejsce poboru prób:sala |
|||||||
|
metoda sedumentacyjna |
metoda zderzeniowa |
||||||
|
liczba mikroorganizmów |
liczba mikroorganizmów |
||||||
|
na płytce |
w m3 powietrza |
na płytce |
w m3 powietrza |
||||
|
20o C |
37 oC |
20 o C |
37 o C |
20 o C |
37 o C |
20 o C |
37 o C |
ogólna liczba bakterii |
27 |
23 |
2123 |
1809 |
91 |
93 |
4550 |
4650 |
liczba bakterii pigmentowych |
17 |
17 |
1337 |
1337 |
77 |
79 |
3850 |
3950 |
liczba bakterii sporowych |
1 |
1 |
79 |
79 |
3 |
1 |
150 |
50 |
liczba gronkowców |
|
10 |
|
262 |
|
15 |
|
188 |
liczba promieniowców |
|
2 |
|
52 |
|
4 |
|
50 |
ogólna liczba grzybów |
|
12 |
|
315 |
|
20 |
|
250 |
liczba pleśni |
|
6 |
|
157 |
|
18 |
|
225 |
liczba grzybów drożdżopodobnych |
|
6 |
|
157 |
|
2 |
|
25 |
Tabela 2. Przedstawiająca wyniki dla prób pobranych na korytarzu
Oznaczenia |
Miejsce poboru prób: korytarz |
|||||||
|
metoda sedumentacyjna |
metoda zderzeniowa |
||||||
|
liczba mikroorganizmów |
liczba mikroorganizmów |
||||||
|
na płytce |
w m3 powietrza |
na płytce |
w m3 powietrza |
||||
|
20 o C |
37 o C |
20 o C |
37 o C |
20 o C |
37 o C |
20 o C |
37 o C |
ogólna liczba bakterii |
33 |
46 |
2595 |
3617 |
62 |
53 |
3100 |
2650 |
liczba bakterii pigmentowych |
24 |
34 |
1887 |
2674 |
53 |
45 |
2650 |
2250 |
liczba bakterii sporowych |
6 |
12 |
472 |
944 |
7 |
7 |
350 |
350 |
liczba gronkowców |
|
10 |
|
262 |
|
16 |
|
200 |
liczba promieniowców |
|
0 |
|
0 |
|
1 |
|
13 |
ogólna liczba grzybów |
|
8 |
|
210 |
|
20 |
|
250 |
liczba pleśni |
|
5 |
|
131 |
|
16 |
|
200 |
liczba grzybów drożdżopodobnych |
|
3 |
|
79 |
|
4 |
|
50 |
Wnioski:
W przypadku metody sedymentacyjnej liczba mikroorganizmów na korytarzu była większa od liczby mikroorganizmów w sali. Natomiast w metodzie zderzeniowej większą liczbę mikroorganizmów otrzymała grupa pobierająca próby w sali. Podejrzewamy, że rzeczywistej liczbie bakterii bardziej odpowiadały wyniki uzyskane z próby sedymentacyjnej, ponieważ na korytarzu przebywa więcej osób, które przenoszą na ubraniu oraz obuwiu duże ilości mikroorganizmów. Metoda zderzeniowa mogła ponadto podlegać błędowi z powodu tego, że podczas pobierania powietrza w naszej grupie (sala) przy aparacie stało kilka osób, natomiast próbki do badań sedymentacyjnych zostały umieszczone nieco dalej.
Analizując wyniki na podstawie tabeli Krzysztofika otrzymujemy następujące wnioski:
Metoda sedymentacyjna
Dla sali: W sali otrzymaliśmy ogólną liczbę bakterii : 2123, widzimy, że jest to wynik mieszczący się w dopuszczalnym zakresie, ogólna liczba grzybów wynosi natomiast 315 co wykracza nieco ponad dopuszczalną wartość.
Dla korytarza (przyjmujemy wartości dopuszczalne jak dla sali szkolnej):
Na korytarzu otrzymaliśmy ogólną liczbę bakterii: 3617 co przekracza dopuszczalną wartość dla sali szkolnej, ale możemy to zaakceptować, gdyż jest to korytarz, ogólna liczba grzybów wynosi natomiast 210 co umieszcza korytarz w dopuszczalnym zakresie dla sal szkolnych.
Metoda zderzeniowa:
Dla sali: Ogólna liczba bakterii w sali dla metody zderzeniowej wynosi 4650 co sytuuje salę poza dopuszczalnym zakresem. Ogólna liczba grzybów wynosi natomiast 250 co mieści się w dopuszczalnym zakresie.
Dla korytarza: Ogólna liczba bakterii wynosi 3100 co wykracza nieznacznie ponad wartość dopuszczalną, natomiast ogólna liczba grzybów wynosi 250 co mieści się w dopuszczalnym zakresie.