6. Techniki inżynierii genetycznej
I ETAP: BADANIA I IZOLOWANIE GENU |
II ETAP: WPROWADZANIE GENU DO GENOMU INNEGO ORGAN IZMU |
HYBRYDYZACJA DNA z użyciem sondy molekularnej - służy do poszukiwania określonego genu. Sonda molekularna jest to jednoniciowy fragment dna komplementarny do genu, którego szukamy, oznaczony znacznikim fluorescencyjnym. |
KLONOWANIE DNA I ETAP: wprowadzenie wybranego genu do wektora. Otrzymujemy zrekombinowany wektor. II ETAP: wprowadzenie wektora zrekombinowanego do komórki. |
ANALIZA RESTRYKCYJNA polega na rozcinaniu DNA za pomocg enzymów restrykcyjnych i porównywaniu długości fragmentów. |
WEKTOR - służy do przenoszenia i wprowadzania obcych genów do genomu organizmu. |
ELEKTROFOREZA rozdzielenie fragmentów DNA w polu elektrycznym, będq się one przemieszczały w kierunku katody, ponieważ ich reszty fosforanowe sq ujemnie naładowane, krótsze fragmenty przemieszczajq się szybciej niż dłuższe. |
Dzieli się na: plazmidy, bakterie i wirusy oraz sztuczne chromosomy ( sq to liniowe czqsteczki DNA) |
ŁAŃCUCHOWA REAKCJA POLIMERAZY PCR służy do powielania fragmentów DNA, enzym polimerazy DNA katalizy. Wykorzystuje się w diagnostyce chorób dziedzicznych, medycynie sqdowej i paleontologi. |
TRANSFORMACJA GENETYCZNA wprowadzanie obcego DNA do komórki. POŚREDNIE - za pomocq wektora BEZPOŚREDNIE - bez wektora |
SEKWENCJONOWANIE DNA polega na ustaleniu sekwencji czyli kolejności nukleotydów w DNA. |
* I SPOSOB • zwiększenie przepuszczalności błony komórkowej za pomocą sub. chem. II SPOSÓB - impuls elektryczny * III SPOSOB - mikroustrzeliwanie za pomocą mikroskopijnej złotej kulki IV SPOSÓB mikromireakcja |