8928723482

i

INNOWACYJNA GOSPODARKA

H

Popromienny efekt sąsiedztwa po ekspozycji na promieniowanie ultrafioletowe Aleksandra Krzywoń

Politechnika Śląska

Wydział Automatyki, Elektroniki i Informatyki Instytut Automatyki, Zakład Inżynierii Systemów

Kontakt:

Mail: aleksandra.krzvwon(5>polsl.pl Tel: [phone] Tematyka badawcza:

Komórki organizmu ludzkiego doznają stresu oksydacyjnego, nie tylko w wyniku oksydacyjnych procesów metabolicznych, ale także pod wpływem zewnętrznych czynników fizycznych, m.in. promieniowania ultrafioletowego (UV). Promieniowanie UV może uszkadzać komórki bezpośrednio, ale także może indukować efekt sąsiedztwa (ang. radiation induced bystander effect). Zjawisko to jest obserwowane w komórkach, które nie były bezpośrednio napromieniowane lecz otrzymały sygnały (głównie uszkadzające) wysyłane przez komórki napromieniowane. Promieniowanie UV obejmuje trzy zakresy widma słonecznego: UVA (320-400 nm), UVB (290-320 nm) i UVC (200-290 nm), którego mechanizm oddziaływania jest różny.

Metodyka:

Badania wykonywane były na komórkach ludzkich fibroblastów skóry (NHDF) które były eksponowane na różne dawki promieniowania ultrafioletowego z zakresu UVA, UVB oraz UVC. Układ eksperymentalny polegał na ko-inkubacji komórek napromienianych, rosnących w studzienkach płytek 6-dołkowych, z komórkami nie napromienianymi rosnącymi w specjalnych insertach, które wstawiano do studzienek natychmiast po ich napromienieniu. Transparentna błona stanowiąca dno insertów pozwala na dyfuzję składników podłoża, lecz dzięki średnicy porów 0,4pm nie pozwala na bezpośredni kontakt komórek. Badania obejmowały analizę aktywności proliferacyjnej, indukcję apoptozy, nekrozy, oznaczanie poziomu reaktywnych form tlenu i azotu.

Aparatura:

W badaniach korzystano z cytofluorymetru przepływowego (Becton Dickinson, FBD FACSAria III), generatorów promieniowania UVA, UVB i UVC (Ultraviolet Crosslinkers) oraz spektrofotometru mikropłytkowego.

Przykładowy wynik:

Strona 11

Wykazano indukcję efektu sąsiedztwa pod wpływem promieniowania UVA, UVB oraz UVC w komórkach prawidłowych skóry (NHDF) mierzoną testem MTS.

Projekt „Śląska BIO-FARMA. Centrum Biotechnologii, Bioinżynierii i Bioinformatyki"