3434597442

Biotechnologiczne metody w ochronie środowiska, wybrane zagadnienia z biotechnologii - studia II stopnia Ćwiczenie    Biologiczna defosfatacja

wobec próby zerowej (kolbka

3.3.6.    Po 10 min, lecz nie później niż po 12 min zmierzyć absorbancję przy X = 690 nm krzywej wzorcowej zawierająca jedynie odczynniki). Wykonać 3 pomiary próby.

3.3.7.    Z krzywej wzorcowej odczytać ilość fosforanów.

3.3.8.    Stężenie fosforanów w ściekach obliczyć ze wzoru:

Wykonanie ćwiczenia cz.2

4.    Po inkubacji wykonujemy ponownie oznaczenia zawartości fosforanów (p. pkt. 3.3)

UWAGA - oznaczamy tylko ilość fosforanów w próbie badanej (nie wykonujemy krzywej wzorcowej). Konieczne może być zastosowanie innego rozcieńczenia badanego roztworu. Proszę przed wykonaniem oznaczeń skonsultować to z prowadzącym.

5.    Opracowanie wyników

5.1. Na podstawie uzyskanych wyników:

5.1.1.    Sporządzić krzywą wzorcową zależności absorbancji od ilości fosforanów

5.1.2.    Obliczyć zawartość jonów fosforanowych w analizowanych ściekach w 1 i 7 dniu trwania procesu na podstawie

_krzywej wzorcowej, wyniki zestawić w tabeli___

Próba    |    rozcieńczenie    |    stężenie [mg/dm³]

___fosforany

Ścieki surowe    I    I

Ścieki oczyszczone_|_|_

5.1.3. Odpowiednio zinterpretować wyniki i wyciągnąć wnioski o przebiegu biologicznej defosfatacji ścieków.

Wykonanie ćwiczenia cz. 3

6.    Ocena bakterii osadu czynnego

6.1.    Wykrywanie materiałów zapasowych (poli-P) - barwienie metoda Neissera

Barwienie pozwala na stwierdzenie obecności w komórkach bakterii materiałów zapasowych w postaci polifosforanów (od fioletu do koloru czarnego)

Barwienie wykonujemy nad wanienką do barwienia, preparat umieszczamy na statywie, do płukania używamy wody destylowanej.

6.1.1.    Przygotować suchy preparat osadu czynnego - w tym celu na odtłuszczone szkiełko podstawowe nanosimy pipetą kroplę osadu czynnego, drugim szkiełkiem wykonujemy jej rozmaz, suszymy preparat (do odparowania wody).

Przygotować świeży roztwór (A+B) składający się z dwóch części roztworu A i jednej części roztworu B - w tym celu wprowadzamy do probówki pipetą 1 ml barwnika A i 0,5 ml barwnika B.

6.1.2.    Nanieś na utrwalony preparat roztwór A+B - po 15 sekundach spłukać wodą nad wanienką

6.1.3.    Nanieść roztwór C - po 45 sekundach spłukać wodą nad wanienką

6.1.4.    Pozostawić preparat do wyschnięcia na ręczniku papierowym/bibule

6.1.5.    Preparat oglądać w jasnym polu stosując powiększenie obiektywu 40x lub 100x z olejkiem immersyjnym -mikroskop jasnego pola pracownia 01

IV preparacie zaobserwować obecność ziaren poli-P (kolor fioletowy do czarnego) wewnątrz komórek bakterii. Barwienie to pozwala również na identyfikację bakterii nitkowatych:

Neisser-ujemne: Sphaerotilus natans. Nocardia. Thiotrix Neisser-dodatnie: Micrithrix pary i cel la

7.    Literatura

7.1.    Fijałkowska E. i wsp.. Osad czynny - biologia i analiza mikroskopowa, Oficyna Wydawnicza IMPULS, Kraków 2005.

7.2.    Dymaczewski Z., Poradnik eksploatatora oczyszczalni ścieków. Polskie Zrzeszenie inż. I tech. Sanitarnych, Poznań, 1997.

7.3.    Hermanowicz W., Fizyczno-chemiczne badanie wody i ścieków. Arkady, Warszawa, 1999.

7.4.    Anielak A.M., Chemiczne i fizykochemiczne oczyszczanie wody. Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa 2000.

Prowadzący: dr Sławomir Wierzba