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Yariation somaclonale et sślection in vitro chez le riz 273

Caracterisation physiologique ou biochimiąue des vitro-p!ants selectionnes

Les familles ou lignees de vitro-plants dont le niveau de resistance etait le plus eleve ont ete soumises a differents tests et comparees aux varietes dont elles proviennent. La concentration en aluminium dans les feuilles et dans les racines a ete determinee pour les lignees R₀ resistantes, la variete d'origine et une variete resistante (Van Sint Jan et al., 1994). Les lignees resistantes au NaCl ont ete analysees en R, et R₂ pour leur teneur en mineraux, la tolerance tissulaire au NaCl et la permeabilite membranaire (Lutts, 1996). Les familles somaclonales rćsistantes aux basses temperatures ont ete analysees en R₃ pour la permeabilite membranaire (Bertin et al., 1996a). 1'efficience photosynthetiąue (Bertin et al., 1997a) et leurs teneurs en acides gras (Bertin et Bouharmont, 1997).

RESULTATS ET DISCUSSION Tests de resistance des vitro-plants

Pour la resistance a la salinite, 17 familles R, ont presente des tau.\ de survie significativement superieurs a ceux de la variete initiale. Pour la resistance a 1'aluminium, la procedurę de selection menee durant 4 generations (de la R„ a la R,) a conduit a la selection de trois lignees particulierement resistantes. La resistance a ete perdue pour d'autres lignees en R,ou en R₂. Enfin, des resultats similaires ont ete obtenus dans le cas de la resistance au froid.

Lorsqu'elle a ete realisee (cas de 1'etude de la salinite et des basses temperatures). la selection massale n'a jamais permis d'obtenir une telle amelioration, prouvant que celle-ci ne provient pas de la variabilite preexistante au sein des varietes utilisees. mais bien de la selection d'une variabilite produite ou tout au moins revelee par la culture in vitro, ce qui correspond a la variation somaclonale au sens large. Ces resultats suggerent que la variation somaclonale peut presenter un caractere novateur en induisant 1'apparition de caracteristiques qui n'existent pas au sein de la variete initiale et dont certaines, genetiquement transmissibles. pourraient etre utilisees dans un programme d’amelioration.

L'effet de la selection in vitro est plus controverse. II n'y a pas de relation definie entre les performances des familles R, et la dose de NaCl a laquelle la plante parentale R„ a ete selectionnee en phase de culture in vitro ; les lignees resistantes ont ete produites au depart de cals stresses ou non au NaCl. Aucune familie provenant d'une selection en presence de sel en phase d'enracinement ou d'une application progressive des pressions selectives lors de la culture in vitro ne presente d'avantage par rapport a la variete initiale. D'autre part, une des trois familles selectionnees pour la resistance a l’aluminium provient d'un cal n'ayant subi aucune pression de selection. Pour les basses tempćratures, 1'effet de la selection in vitro est lie a la variete utilisee: les familles les plus resistantes ont ćte obtenues par les pressions de selection les plus longues pour la variete la plus resistante, des durees moyennes pour la variete de resistance intermediaire, et en 1'absence de stress in vitro pour les deux varietes sensibles. II semble donc que, pour etre efficace, une pression de selection appliquee in \itro doive faire 1'objet d'un ajustement en fonction du genotype de depart.

Les tests en champs ont mis en evidence la presence d’un tres grand nombre de vitro-plants presentant des caracteres deleteres. Cependant, bon nombre de ceux-ci sont elimines en une seule generation. Des vitro-plants plus resistants ont pu etre obtenus. a condition toutefois d'appliquer une pression de selection (par culture a une altitude suffisamment elevee) au niveau des plantes des la premiere generation.