8851686599

SPIS TREŚCI

Wprowadzenie (Ilona Bednarek).................................... 7

I. Izolacja materiału genetycznego jako punkt wyjścia w procedurach molekularnych (Daniel Sypniewski, Ilona Bednarek).......................... 9

1.    Izolacja DNA........................................................ 9

2.    Izolacja plazmidowego DNA........................................... 11

3.    Izolacja genomowego DNA............................................ 15

4.    Ekstrakcja RNA..................................................... 17

II. Transformacja bakterii - klasyczny przykład klonowania subkomórkowego

( Grzegorz Machnik, Ilona Bednarek)................................. 23

III.    Wprowadzenie informacji genetycznej do komórek, wektory molekularne,

metody transferu (Ilona Bednarek, Krzysztof Cholewa, Magdalena Czajka--Uhryń)......................................................... 29

1.    Wektory wirusowe.................................................... 33

2.    Metody wprowadzania genów do komórek eukariotycznych.................. 41

IV. Transgeneza - zagadnienia ogólne ( Tomasz Loch)..................... 49

1.    Konstrukcje genowe stosowane w transgenezie............................ 49

2.    Techniki otrzymywania zwierząt transgenicznych........................... 53

3.    Systemy warunkowej ekspresji genów.................................... 59

4.    Systemy indukowalnej ekspresji genów................................... 60

5.    Genotypowanie zwierząt transgenicznych................................. 62

6.    Zastosowanie organizmów transgenicznych............................... 64

V. Poszukiwanie roślin transgenicznych jako proces specyficznej reorganizacji

materiału genetycznego (Sabina Gałka)............................... 67

VI. RNA jako regulator ekspresji genów. Potranskrypcyjne wyciszanie genów

techniką interferencji RNA (Ilona Bednarek).......................... 75

VII. Zasady projektowania cząsteczek RNAi oraz tworzenie sekwencji typu consensus {GrzegorzMachnik, Ilona Bednarek)........................... 83

VIII. Ilościowa ocena aktywności transkrypcyjnej genów i ich kopijności na

podstawie techniki Real Time™ PCR {GrzegorzMachnik, Ilona Bednarek) ..    87