Sprawozdanie 1. Poniedziałek 8:30-11:45

Magdalena Firek

Ilona Frączek

Katarzyna Dyl

Ilościowe oznaczanie stężenia białka metodą Lowry’ego

Po dwie próbki o numerach:	Objętość roztworu albuminy	Objętość wody
1	50µl	250 µl
2	100 µl	200 µl
3	150 µl	150 µl
4	200 µl	100 µl
5	250 µl	50 µl
6	300 µl	0
Po dwie próbki	Objętość roztworu surowicy	Objętość wody
P1	150 µl	150 µl
P2	300 µl	0

Po wykonaniu określonej ilości próbek zmierzyłyśmy absorbancje każdej z nich. Wyniki przedstawia poniższa tabela:

Seria pierwsza	Absorbancja	Seria druga	Absorbancja	Średnia absorbancja dwóch próbek
1	0.095	1	0.095	0.095
2	0.150	2	0.190	0.170
3	0.245	3	0.260	0.2525
4	0.330	4	0.330	0.330
5	0.360	5	0.350	0.355
6	0.420	6	0.455	0.4375
P1	0.290	P1	0.250	0.27
P2	0.390	P2	0.590	0.49

Stężenie albuminy w probówkach:

1. 1 mg – 1000 μl

x - 50 μl

x = 0,05 mg

0,05 mg substancji jest zawarte w 0,3 ml roztworu

0,05 mg – 0,3 ml

x - 1 ml

x = 0,17 mg

c = 0,17 mg/ml

1. C = 0,33 mg/ml

2. C = 0,5 mg/ml

3. C = 0,67 mg/ml

4. C = 0,83 mg/ml

5. C = 1 mg/ml

Wykreśliłyśmy krzywą kalibracji. Na podstawie równania prostej obliczyłyśmy stężenie białka w badanych próbkach.

y=0.0456x

x=y/0.0456

Stężenie P1:

Dł. Fali: y=0,27 x= 0,27/0,456= 0,59 mg/ml

Stężenie P2:

Dł.Fali: y=0,49 x= 0,49/0,456=1,07 mg/ml – obarczone błędem, ponieważ duplikaty mają znaczną różnice w długości fali

Żelatyna - bezbarwna lub żółtawa substancja białkowa. Jej cząsteczka zawiera wiele reszt glicyny, proliny, hydroksyproliny, alaniny, lizyny. Nierozpuszczalna w zimnej wodzie, rozpuszcza się w temperaturze powyżej 45°C, a oziębiana zastyga w postaci żelu (galarety). Otrzymywana jest w wyniku hydrolizy kolagenu. Znajduje zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym, medycynie, diagnostyce mikrobiologicznej, a także w technice fotograficznej.