Mikrobiologia
Metody barwienia i morfologia drobnoustrojów.
Mikrobiologia drobnoustrojów:
Opis komórki - kształt
- wielkość
- ułożenie
- sposób barwienia
Struktury komórkowe- rzęski
- otoczka
- przetrwalniki
- zmiana wolutynowe
Podział drobnoustrojów ze względu na kształt i ułożenie.
Kuliste- dzwonki
- czwórki
- pakietowce
- granulowce
- paciorkowce
Cylindryczne- pałeczki
- laseczki
- formy nieregularne
Spiralne- przecinkowce
- śrubowce
- krętki
Typy ułożenia przetrwalników przetrwalników komórce.
terminalne (biegunowo)
subterminalne (podbiegunowo)
paracentralne (przyśrodkowo)
centralne (środkowo)
Typy urzęsienia komórki bakteryjnej
Monotricha - jednorzędne
Ditricha - 2rzęsne
Lofotricha - jednobiegunowe (2-6 rzęsek)
Antyfricha - jednobiegunowe
Antytricha - 2 biegunowe
Pertitricha - wielorzęsne
Nietypowe
Typy wzrostu bakterii w podłożonych płynach
(zapotrzebowanie na tlen)
bezwzględne - tlenowe
względne tlenowe
mikroaerofile
bezwzględne - beztlenowe
- ścisłe
- umiarkowane
Rodzaje preparatów
- bezpośredni - wykonany z materiału klinicznego
pobranego od pacjenta
- pośredni - wykonany z 18-24 godz.
Hodowli drobnoustrojów
Przygotowanie preparatu:
-odtłuścić szkło podstawowe
- zawiesić kolonie bakteryjną w kropli NaCl
- pozostawić preparat do wyschnięcia w temp.pok.
- ustawić preparat w płomieniu palnika
Metody barwienia drobnoustrojów
- proste ( 1 barwnik)
- złożone (min 2 barwniki)
- pozytywne ( wybarwiamy komórki)
- negatywne (wybieramy tło, kolory czarne)
Barwienie matodą Grama
Bakteria gram+ bakteria gram-
-Fiolet krystaliczny( fioletowy)2-3 min. (fiolet)
-Płyn lugula (fiolet) 1 min. (fiolet)
-odbarwiacz (fiolet) (bezbarwny)
- fuksyna (fiolet) (czerwony)
Podział bakterii w barwieniu metodą grama
- gram dodatni ( staphylococus sp. Balilus sp.)
-gram ujemny ( entyrobacteriace sp. Neisseria sp.)
-gram chwiejne ( corynebacterium sp.)
-atypowe ( chlanydia sp.)
Metody hodowli i identyfikacji bakterii
Metody chatektrystyki drobnoustrojów
- metody mikroskopowe
- metody izolacji na odpowiednich pożywkach
- metody immunologiczne i genetyczne
- biologiczne
Diagnostyka bakteriologiczna
- bakterioskopia
- pożywki bakteriologiczne
- identyfikacje biochemiczne
- identyfikacje serologiczne
- identyfikacje genetyczne
Podziały podłóż
- płynna> bulion mięsny> bulion peptonowy
> bulion drożdżowy
- półpłynna> agar(0.5%- 1%)
- stała> zestalone agarem(1,5-3%)
Zawartość substancji
- syntetyczne
- półsyntetyczne
- naturalne
Ilość jakość składników odrzwczych
- proste (podstawowe)np. woda peptydowa,
agar zwykły / gronkowce/
- złożone(wzbogacone) np. agar z krwią
/paciorkowce/
- wybiórcze(selektywne) np. pożywka z
centrymidem dla pseudonomas
pożywka z eskuliną dla enterococus
- wybiórczo-(namarzające) np. bulion z
żółcią+agar dla salmonella
- wybiórczo (różnicujące) np. pożywka
champana dla stophylococcus
- specjalne np. pożywka Lorensteina-Jansena
dla Mycobacteriumagar czekoladowy dla
Hoenphilus, Neisseria
- transportowe(umożliwiaja transport
szczepów w laboratorium
Wstępna identyfikacja bakterii>
posiew redukcyjny
Kolonia bakteryjna - zespół osobników
powstałych z 1komórki macierzystej na
podłożu stałym
Morfologia kolonii
-kształ -wyniosłość
-kolor -przejrzystość
-wielkoś -zapach
-struktura -konsystencja
-brzeg -zawieszalność
-powierzchnia typ.hemolizy(podłoża
z krwią baranią-a b i y)
Identyfikacja bakterii
*biochemiczne - badanie jednej cechy
-szeregi biochemiczne
GLU+, ARA- ,ODC+, CIT+
*serologiczna - wykrywanie antygenów
-aglutynacja
-precypitacja
-metody znakowania
*genetyczna - izolacja materiału genetycznego
-hybrydyzacja kwasów nukleinowych
-PFGE(elektrofaza w zmiennym polu elektrycznym)
-PCR(reakcja łańcuchowej polimerazy)
-LCR(reakcja łańcuchowej ligazy)