20101117134

Ćwiczenie 2:

aktvwno*d inwertazy

Pomiar aktywności inwertazy Jest oparty na oznaczaniu ilości uwalnianych podczaa reakcji cukrów redukujących za pomocą metody Samogyi Nelson*

Wykonanie krzywej kaibracyinel

1. Przygotuj odczynnik roboczy Nelsona (odczynnik C) - zmieszaj 25 mL odezyrmwa * z " mL odczynnika B.

2 Z roztworu standardowego glukozy o Mązentu 1 mM przygotuj (używając «łj destylowanej jako rozpuszczalnika) S roztworów o oóiątoaci końcowej . = 0 5 - -zawierających glukozę o stę2eniach: 0.2; 0.4. Q.ó, 08 1 mM

3.    Przygotuj próbę ślepą dodając do szóstej probóMu 0.5 mi wody deetyłowanai

4.    Do wszystkich sześciu probówek dodaj po t ml odczynowa Nelsona (C)

5.    Wstaw probówki do wrzącej łaźni wodnej (100*0) na 15 minut

6.    Wyjmij probówki i po dokładnym ich wynudzaniu dodawaj do każdej po 1 mL oaczynn*a arsenomolibdenowego, natychmiast energicznie mieszając każdą probówkę

7.    Do każdej probówki dodaj po 6 mL wody destylowanej i dokładnie wymiesza;

8.    Po 10 minutach zmierz absorbancję przy długości fali 520 nm.

9.    Narysuj na papierze milimetrowym wykres zależności absorbaneji od stężenia gh*ozy

10.    Oblicz współczynnik kalibracji K (C/A).