20111206127

_50 BARWNIKI ROŚLINNE

cności tlenu w cząsteczce i dla karotenoidów nie zawierających tlenu przesunięte jest w stronę fal dłuższych. W miarę wzrostu liczby grup hydrofitowych w szkielecie węglowym karotenoidów położenie maksimum przesuwa się w stronę fal krótszych. Luteina zawiera dwie grupy hydroksylowe, wio-laksantyna dwie grupy hydroksylowe i dwie epoksydowe, a neoksantyna trzy grupy hydroksylowe i jedną epoksydową.

(d) Wyznaczanie maksimum absorpcji chlorofilu a i b Klarowne acetonowe roztwory chlorofilu a I b uzyskane w części (c) przelewamy do szklanych kuwet, przykrywamy szklanymi nakrywkami I w kolory-metrze spektralnym mierzymy absorbancję przy długości fal 420-470 nm oraz 630-680 nm co 5 nm. Próbę ślepą stanowi 100% aceton. Wyniki przedstawiamy na wykresie, na którym na osi x zaznaczone są długości fal, a na osi / wartości absorbancjl.

M: llśolenle ogórka, szpilki cisu

P: moździerz z plstlą, cylinder miarowy k 10 cm³, lejek, kolorymetr spektralny O: piasek kwaroowy CaCOg, 100% aceton, 80% wodny roztwór acetonu, 100% metanol, 90% wodny roztwór metanolu, 95% alkohol etylowy

Rozcieramy w moździerzu 500 mg llśclenl lub llśol ze szozyptą plasku kwarcowego I CaCOg. Do homogenatu wprowadzamy porcjami po 2 om³ wybranego rozpuszczalnika (100% aceton,'80% wodny roztwór acetonu*? 100% metanol, 90% wodny roztwór metanolu luOB%^,alkoFiór etylowy) i każdą porcję sączymy do cylindra miarowego na icfSm³. Objętość przesączu uzupełniamy do 10 cm³ za pomocą użytego rozpuszczalnika I mieszamy. Otrzymany przesącz rozcieńczamy 10-krotnle za pomocą użytego rozpuszczalnika. Wszystkie prace wykonujemy przy słabym świetle, aby zapobiec fotooksydacji chlorofilu. W kolorymetrze spektralnym dokonujemy odczytu absorbancjl (A) przy długościach fal świetlnych uzależnionych od rozpuszczalnika zastosowanego do ekstrakcji, wybranych z poniższych zestawień, ślepą próbę stanowi użyty rozpuszczalnik.

Doświadczenie 43 Oznaczanie zawartości chlorofilu a, chlorofilu b, sumy chlorofilu a i b oraz sumy karotenoidów w tkankach roślin

n

n

c

C

ti

E

C

C

(

(

fi

c

c

c

c

fi

c

c

(

(