20111206128

50 BARWNIKI ROŚLINNE

cności tlenu w cząsteczce i dla karotenoidów nie zawierających tlenu przesunięte jest w stronę fal dłuższych. W miarę wzrostu liczby grup hydrofitowych w szkielecie węglowym karotenoidów położenie maksimum przesuwa się w stronę fal krótszych. Luteina zawiera dwie grupy hydroksylowe, wio-laksantyna dwie grupy hydroksylowe i dwie epoksydowe, a neoksantyna trzy grupy hydroksylowe i jedną epoksydową.

(d) Wyznaczanie maksimum absorpcji chlorofilu a i b Klarowne acetonowe roztwory chlorofilu a i b uzyskane w części (c) przelewamy do szklanych kuwet, przykrywamy szklanymi nakrywkami i w kolory-metrze spektralnym mierzymy absorbancję przy długości fal 420-470 nm oraz 630-680 nm co 5 nm. Próbę ślepą stanowi 100% aceton. Wyniki przedstawiamy na wykresie, na którym na osi xzaznaczone są długości fal, a na osi / wartości absorbancji.

M: liścienie ogórka, szpilki cisu

P: moździerz z pistlą, cylinder miarowy k 10 cm³, lejek, kolorymetr spektralny O: piasek kwarcowy CaCC>3,100% aceton, 80% wodny roztwór acetonu, 100% metanol, 90% wodny roztwór metanolu, 95% alkohol etylowy %JdO My,

Rozcieramy w moździerzu 500 mg liścieni lub liści ze szczyptą piasku kwarcowego i CaC0₃. Do homogenatu wprowadzamy porcjami po 2 cm³ wybranego rozpuszczalnika (100% aceton,0śQ% wodny roztwór acetonu!) 100% metanol, 90% wodny roztwór metanolu lut^95%salkohol etylowy) i każdą porcję sączymy do cylindra miarowego na i(jcm³. Objętość przesączu uzupełniamy do 10 cm³ za pomocą użytego rozpuszczalnika i mieszamy. Otrzymany przesącz rozcieńczamy 10-krotnie za pomocą użytego rozpuszczalnika. Wszystkie prace wykonujemy przy słabym świetle, aby zapobiec fotooksydacji chlorofilu. W kolorymetrze spektralnym dokonujemy odczytu absorbancji (A) przy długościach fal świetlnych uzależnionych od rozpuszczalnika zastosowanego do ekstrakcji, wybranych z poniższych zestawień. Ślepą próbę stanowi użyty rozpuszczalnik.

Doświadczenie 43 Oznaczanie zawartości chlorofilu a, chlorofilu b, sumy chlorofilu a i b oraz sumy karotenoidów w tkankach roślin