HPLC 3

Chemiczna analiza instrumentalna - ćwiczenia [MSZ]

prędkość poruszania się pasma składnika

K : ---

prędkość poruszania się fazy ruchomej

Obliczony jest za pomocą równania:

k = (tR — to) / to = t*R / to

gdzie:

tR - czas retencji,

Fr - redukowany czas retencji,

to - czas retencji związku nie zatrzymywanego.

Czas odpowiadający elucji maksimum piku, zwany czasem retencji (czas przebywania substancji chromatografowanej w kolumnie) jest funkcją równowagowego współczynnika podziału (K).

Czas elucji jest funkcją prędkości fazy ruchomej i objętości eluentu potizebnego do wymycia składnika z kolumny, tzw. objętości retencji (V_R), zdefiniowanej jako:

Vr - F tR

gdzie:

F - objętościowa prędkość przepływu fazy ruchomej.

Substancja, która zupełnie nie oddziałuje na fazę stacjonarną, tzn. K-O, wymaga także

—*—    ‘    "......'"**.........^....................... i

skończonego czasu na przejście przez kolumnę od momentu wstrzyknięcia do pojawienia się

......    * ^..........*'***'•*•    w

sygnału na rejestratorze w postaci piku. Ten czas jest zerowym czasem retencji t₀. Iloczyn tego czasu przez prędkość przepływu eluenta daje analogicznie zerową objętość retencji V₀.

v..,„

Zerowy czas retencji, czyli czas przebywania składnika w fazie ruchomej nie jest cechą charakterystyczną substancji. Natomiast czas oddziaływania substancji na fazę stacjonarną nazywany jest zredukowanym czasem retencji, tR⁵ i jest równy różnicy całkowitego czasu retencji i zerowego czasu retencji.

tR⁵ = tR - to

3