skanuj0008

oznaczane są zawartości zawiesin ogólnych osadu, w których skład wchodzą żywe organizmy i zawiesiny jako wynik oznaczania przyjmuje się iloraz ilości TF do zawartości zawiesin ogólnych.

Uzupełnieniem metody TTC jest określenie aktywności katalazy - enzymu biorącego czynny udział w rozkładzie nadtlenku wodoru, który jest silnym inhibitorem enzymów i jest toksyczny dla komórki. Mechanizm działania katalaz:nrzv małych stężeniach H2O2 mechanizm działania jest taki sam jak mechanizm działania peroksydaz, które jednocześnie utleniają określony substrat:    H

A —|    + H2O2⁼A + 2H2O

H

Przy dużych stężeniach H2O2 katalaza przenosi 2 elektrony i 2 protony z jednej cząsteczki nadtlenku wodoru na drugą cząsteczkę tego związku. W ten sposób z dwóch cząsteczek H2O2 powstają dwie cząsteczki H2O i tlen cząsteczkowy.

H₂0₂+ H₂0₂ = 2 H₂0 + 0₂

U bakterii tlenowych wykształciły się specjalne mechanizmy ochronne przed utleniająceymi rodnikami np. u E.coli czynne są dwie różne katalazy: peroksydaza i reduktaza alkilonadtlenkowa redukujące organiczne nadtlenki (silnie toksyczne).

Test na badanie aktywności katalazy polega na dodaniu do zawiesiny bakterii osadu czynnego nadtlenku wodoru jako substartu dla katalazy. Próbę kontrolną stanowi zawiesina martwych komórek bakterii poddanych działaniu temperatury 100°C, w której nastapiła inaktywacja katalazy. Zmiareczkowanie nadtlenku wodoru w próbie kontrolnej i badanej oraz obliczenie ilości uwolnionego tlenu jest podstawą do obliczenia aktywności katalazy.

Oprócz aktywności dehydrogenaz i katalaz w osadzie czynnym można badać aktywność innych enzymów np. fosfatazy, ureazy, enzymów proteolitycznych czy amylazy.

Fosfatazy są enzymami katalizującymi hydrolizę estrowych połączeń kwasu fosforoweg. U bakterii występuję fosfataza alkaliczna i kwaśna.

Enzym ureaza katalizuje hydrolizę mocznika. Badanie aktywności ureazowej jest celowe, gdy oczyszczaniu biologicznemu poddawane są ścieki bytowo-gospodarcze. Podobnie uzasadnione jest badanie aktywności proteolitycznej, decydującej o hydrolizie białek i polipeptydów, gdyż w ściekach tych znajduje się bardzo dużo azotu organicznego.

Wyniki testów enzymatycznych podaje się w jednostakch umownych. Za taka jednostkę przyjmuje się ilość rozłożonego substratu lub ilość powstałego produktu w czasie i warunkach podanych w danej metodzie w przeliczeniu na 1 mg białka.