CCF20111007000

CCF20111007000



które pod wpływem enzymów mogą być rozkładane do produktów dających się łatwo wykryć).

6.    Charakterystyka podstawowych podłóż mikrobiologicznych:

bulion zwykły • podłoże płynne, ogólne dla bakterii, skład: 15 g .suchego bulionu" (wyciąg mięsny z dodatkiem 2 % peptonu), 1000 ml wody destylowanej, pH 7,0 - 7,2; sterylizacja w autoklawie

agar zwykły - MPA (mięsno - peptonowy agar) - podłoże stałe, ogólne dla bakterii, skład 1000 ml bulionu + 2 % agar-agar, temp. rozpuszczania 95 - 99 °C, temp. krzepnięcia 45 - 48 °C, pH 7,4 - 7,6; sterylizacja w autoklawie

żelatyna - podłoże stałe, ogólne dla bakterii proteolitycznych, skład: 1000 ml bulionu + 10 - 20 % żelatyny, pH 7,8; sterylizacja w aparacie Kocha - metodą tyndalizaq'i)

pożywka brzęczkowa (brzeczka) - podłoże stałe, ogólne dla grzybów, skład: 1000 ml brzeczki niechmielowanej (browarnianej) + 2 % agar-agar, pH 5,5 - 5,8, sterylizacja w autoklawie

7.    Metody hodowli;

a.    hodowla statyczna - do czasu wyczerpania składników pokarmowych lub zatrucia własnymi produktami,

b.    hodowla ciągła - stały dopływ pożywki i odpływ zużytego podłoża

8.    Zgodnie z warunkami rozwoju drobnoustrojów stosuje się odpowiednie podłoża, hodowlę prowadzi się w optymalnej temperaturze i odpowiednim składzie atmosfery środowiska. Ogólne warunki hodowli dla większości drobnoustrojów mezofilnych są następujące:

drobnoustroje

pożywka

temp.

Eti

czas hodowli

bakterie

MPA

37 °C

-7

24 h

bulion

37 °C

-7

24 h

bakterie

proteolityczne

żelatyna

20-22 °C

-7

48 h

grzyby

brzeczka

28 °C

- 5,6

3 dni

Mikroorganizmy tlenowe i względnie beztlenowe hoduje się w termostatach (inkubatorach, cieplarkach) lub hodowlę przeprowadza się na wstrząsarkach (napowietrzanie) z łaźnią wodną. Beztlenowce bezwzględne hoduje się pod parafiną olejem, warstwą agaru 3 % itp. lub w obecności mikroorganizmów usuwających tlen z pożywki. Hodowlę beztlenowców można także prowadzić w eksykatorach próżniowych lub specjalnych aparatach - anaerostatach.

9. Przechowywanie drobnoustrojów.

Mikroorganizmy przechowuje się w chłodniach w temperaturze +1 do +4 °C, w zamrażarkach lub w postaci zliofillzowanej (liofilizacja - wysuszenie drobnoustrojów w niskiej temperaturze w próżni).

Podstawowa aparatura i metody stosowane w badaniach mikrobiologicznych

STERYLIZACJA, czyli wyjaławiania - jest to zabicie lub usunięcie wszystkich

drobnoustrojów - zarówno form wegetatywnych, iak j orzetrwalnikowych.

Wszystkie badania mikrobiologiczne należy wykonywać w warunkach jałowych. Z tego powodu sterylizuje się pomieszczenia laboratoryjne, szkło laboratoryjne oraz pożywki na których hoduje się drobnoustroje.

Prace mikrobiologiczne wykonuje się przy palnikach - do 20 cm wokół płomienia znajduje się strefa jałowa.

Metody Sterylizacji

I.    Sterylizacja termiczna - wysokotemperaturowa

1)    NA SUCHO

a.    wyżarzanie - wyjaławianie ezy w płomieniu palnika przed i po posiewie drobnoustrojów

b.    opalanie - wyjaławianie głaszczek, bagietek szklanych, moździerzy przez zanurzenie w alkoholu i opalenie płomieniem palnika, opalanie wlotu probówek i kolbek

c.    suszarka - szafka metalowa ogrzewana elektrycznie, zaopatrzona w termometr i termoregulator oraz izolowana termicznie. Służy do sterylizacji szkła laboratoryjnego (odpowiednio umytego przy użyciu detergentów, wypłukanego w wodzie bieżącej i destylowanej, wysuszonego i zabezpieczonego przed rozjałowieniem - 160 - 180 °C (1,5

-    3 godzin).

2)    NA MOKRO

a.    autoklaw (sterylizator parowy) - jałowienie pożywek (tych, które nie ulegają rozkładowi w temp. pow. 100°C) w parze nasyconej i pod ciśnieniem. Najczęściej stosowane parametry jałowienia: 1 atm (0,1 MPa) - 121°C lub 2 atm (0,2 MPa) -134 °C przez czas 15-45 minut.

b.    aparat Kocha - sterylizuje się w nim pożywki do hodowli drobnoustrojów metodą tyndalizacji, czyłr przez ogrzewanie ich w parze bieżącej w temp. 100°C przez 30 minut

trzykrotnie w odstępach 24 godzin.

Jednokrotne zastosowanie aparatu nie prowadzi do sterylizacji, ponieważ zabiciu ulegają tylko formy wegetatywne. Przez okres 24 godzin przetrwalniki .kiełkują" i przechodzą w formy wegetatywne. Ponowne zastosowanie aparatu Kocha powoduje ich zabicie. Proces powtarzamy trzeci raz, aby na pewno zabić wszystkie formy i uzyskać pełnąjałowość.

II.    Sterylizacja niskotemperaturowa

1.    Sterylizaq'a gazowa (tlenek etylenu, formaldehyd).

2.    Metody radiacyjne

a.    promieniowanie UV (254 nm)

W pracowniach mikrobiologicznych sterylizuje się pomieszczenia prom. UV. Najsilniej działają promienie o dł. fali 230 - 275 nm. Najczęściej jałowi się przez okres 30 minut do 2

-    3 godzin.

b.    promieniowanie jonizujące (beta, gamma, prom. Roentgena)

3.    Filtrowanie


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
CCF20111007000 które pod wpływem enzymów mogą być rozkładane do produktów dających się tatwo wykryć
CCF20121201003 .redukcja pod wpływem enzymów flory, bakteryjnej jelita 4H 4H bitirubina (36 H) mezo
RSCN5911 Rozkład tłuszczów Mikrobiologiczny rozkład tłuszczów zachodzi pod wpływem enzymów zwanych
Do grupy metod aktywizujących, które są najbardziej znane i mogą być stosowane w przedszkolu należą:
Picture9 Glukoza jak i inne cukry ulegają fermentacji alkoholowej pod wpływem enzymów wytwarzanych
ANALIZA DANYCH Model danych - zbiór pojęć, które mogą być użyte do opisu grupy danych i operacji
CCF20110310022 Dwie instalacje uziemiające (uziemienia) mogą być mieć wspólny uziom lub uziomy oddz
30 31 (20) Ścieki mogą być odprowadzane do śródlądowych wód płynących pod warun kiem, że wartości ws
Kontroler ma 12 wyjść TTL, Które Są zatrzaskiwane w rejestrze i mogą być zapisywane 1 odczytywane pr
DSC00165 (18) Pokrycia bitumiczne • Pod pokrycia bitumiczne mogą być stosowane następujące podkłady:

więcej podobnych podstron