3784496009

Załącznik nr 2. Tomasz Mroczek - Autoreferat w języku polskim metanolu, etanolu, dodatków kwasowych do metanolu takich jak: 1% kwas winowy w metanolu, 2,5% kwas solny, 5% kwas octowy, czy też alkaliczną fazę organiczną (chloroform-metanol); opisanych w publikacji [4], Badałem wpływ temperatury oraz czasu ekstrakcji na wydajność ekstrakcji toksycznych alkaloidów pirolizydynowych. Stężenie alkaloidów obliczałem w oparciu o metodę spektrofotometrii UV-VIS wg metody Dann-Mattock’sa oraz poziom substancji koekstrahujących się w postaci podniesienia tła w widmie UV-VIS adduktów 3,4-dehydro-PAs w odniesieniu do substancji wzorcowej - monokrotaliny. Najlepszą wydajność ekstrakcji oraz najmniejszy poziom substancji balastowych stwierdziłem podczas ekstrakcji 2h wrzącym 1% r-rem kwasu winowego w metanolu, co nie zostało dotychczas opisane w literaturze naukowej z zakresu ekstrakcji PAs.

Powyższą metodę ekstrakcji PAs zostosowałem na większą skalę w celu wyodrębnienia frakcji alkaloidowych z żywokostu sercowatego (publikacja [3]). Następnym zadaniem analitycznym, przed którym stanąłem było opracowanie metod oczyszczania ekstraktów zawierających PAs pod kątem analizy z wykorzystaniem metody HPLC/DAD/APCI-IT-MS, również rozwiązanym w tej publikacji. W tym celu wykorzystałem na początku tradycyjne podejście w oparciu o zwykłą ekstrakcję ciecz-ciecz (LLP), którą następnie rozwinąłem na ciecz-ciecz na sorbencie stałym (SSLLP- solid supported liquid-liquid partitioning), z wykorzystaniem niedrogiego szerokoporowatego adsorbentu na bazie ziemi okrzemkowej (Extrelut). Metoda SSLLP okazała się znaczniej bardziej ekonomiczna i mniej czasochłonna niż tradycyjna LLP, a także dała lepsze odzyski substancji wzorcowych, które zostały dodane do surowych ekstraktów przed samym procesem SSLLP (72,83% odzysk dla retrorsyny oraz 117,78% odzysk dla N-tlenku retrorsyny). Jest to nowa metoda wydzielania obu form PAs w oparciu o proces SSLLP.

W publikacji [5], w której opisałem wstępne wyniki ekstrakcji głównych alkaloidów indolowych z rodzaju Psilocybe: psylocybiny i beocystyny ekstrahowanych z Psilocybe semilanceata L., zasugerowałem konieczność podjęcia bardziej szczegółowych badań nad ekstrakcją tych związków z materiału roślinnego. Po wcześniejszej ekstrakcji na łaźni wodnej 75% r-rem metanolu w wodzie, a następnie tym samym rozpuszczalnikiem na łaźni ultradźwiękowej (metoda UAE) okazało się, że sama ekstrakcja na łaźni wodnej nie jest wystarczająca, aby móc całkowicie wyekstrahować oba te alkaloidy z grzybów halucynogennych. Ponadto, pozostałość po ekstrakcji UAE zawiera również pewną zawartość: psylocybiny i beocystyny, które są wyekstrahowane dopiero chloroformem. Badania te nie były dalej kontynuowane, jednakże wyraźnie wskazują na konieczność optymalizowania nie

9