3434597441

Biotechnologiczne metody w ochronie środowiska, wybrane zagadnienia z biotechnologii - studia II stopnia Ćwiczenie    Biologiczna defosfatacja

Wykonanie ćwiczenia cz.l

1.    Odczynniki stosowane w analizie:

osad czynny

molibdenian amonu, roztwór (NH₄)₆Mo;0₂a glicerynowy chlorek cyny(ll), roztwór SnCI₂ kwas siarkowy i azotowy, roztwór fenoloftaleina, roztwór 1% roztwór wzorcowy fosforanów barwnik A - błękit metylenowy barwnik B - fiolet krystaliczny barwnik C - chryzoidyna 1% roztwór olejek immersyjny

2.    Przygotowanie roztworu roboczego ścieków

2.1.    Przygotować słoik o pojemności ok. 0,5 dm³ (szkło musi być dokładnie umyte). Do słoika wprowadzić 0,4 dm³ osadu czynnego pobranego cylindrem miarowym, oraz 40 cm³ roztworu wzorcowego fosforanów. Opisać układ badawczy i dokładnie go wymieszać.

2.2.    Wykonać oznaczenie pH. Skorygować jego wartość do poziomu 7,0-9,0 używając 2N H₂S0₄ lub 5N NaOH.

2.3.    Wykonać oznaczenie zawartości fosforanów metoda molibdenową (p. pkt. 3).

2.4.    Roztwór ścieków i osadu odstawić do inkubacji, wprowadzając do słoika wężyk pompki akwarystycznej, celem napowietrzania układu. Układ napowietrzać naprzemiennie (15 minut bez napowietrzania, 15 minut - intensywne napowietrzanie).

3.    Oznaczanie fosforanów metodą molibdenową.

3.1.    Przygotowanie próby do badań

Zmontować zestaw do filtracji próżniowej, użyć sączka celulozowego 0.45pm. Pobrać ok. 10 cm³ badanego roztworu (mieszaniny ścieków i osadu) pipetą szklaną i przenieść do lejka pompki próżniowej. Całość przefiltrować. Po zakończeniu filtracji zlać klarowny przesącz z kolby filtracyjnej do kolbki stożkowej o pojemności 50 cm³.

Następnie umyć dokładnie cały zestaw do filtracji I

3.2.    Przygotowanie krzywej wzorcowej do oznaczania PQ_a³' - wykonanie krzywej skonsultować z prowadzącym !!!

3.2.1.    Do pięciu czystych i przepłukanych wodą destylowaną kolb (miarowych) o pojemności 100 cm³ odmierzyć kolejno 0,0; 3,0; 7,0; 10,0 i 20 cm³ roztworu wzorcowego fosforanów, co odpowiada: 0,0; 0,03; 0,07; 0,10; 0,20 mg P0₄³'.

3.2.2.    Kolbki dopełnić wodą destylowaną do objętości ok. 70 cm³ i poddać takiej samej procedurze oznaczenia jak próbę badaną (p. pkt. 3.3).

WZORCE PRZYGOTOWAĆ DO OZNACZEŃ JEDNOCZEŚNIE Z PRÓBĄ BADANĄ - ODCZYT NALEŻY WYKONAĆ KONIECZNIE MIĘDZY 10 A 12 MINUTĄ OD MOMENTU DODANIA OSTANIEGO ODCZYNNIKA III

Krzywa wzorcowa do obliczenia stężenia PQa^S Imał w próbce na podstawie absorbancii: v-0,4113x

3.3.    Oznaczenie fosforanów

3.3.1.    Odmierzyć do kolby miarowej odpowiednią (1-10 cm³) ilość przefiltrowanej próby badanej - w razie większego stężenia fosforanów mniejszą jej ilość - kolbę dopełnić do objętości ok. 70 cm³ wodą destylowaną.

Stężenie fosforanów nie może przekraczać skali krzywej wzorcowej!!!

3.3.2.    Dodać 2 kroplę roztworu fenoloftaleiny (0,05 cm³) i jeżeli wystąpi różowe zabarwienie, dodać kroplami roztwór kwasów (siarkowego i azotowego) do zaniku zabarwienia.

Jeżeli zużywa się w tym celu powyżej 5 kropli roztworu kwasów, należy przygotować większe rozcieńczenie próby badanej.

3.3.3.    Następnie dodać 2 cm³ roztworu molibdenianu amonu i wymieszać.

Do pobierania molibdenianu amonu używać czystej pipety szklanej II

3.3.4.    Uzupełnić kolbę miarową wodą destylowaną do kreski i ponownie wymieszać.

3.3.5.    Dodać 0,5 cm³ roztworu chlorku cyny (II) bezpośrednio na lustro wody i wymieszać

Roztwór glicerynowy chlorku cyny jest b. eesty - do jego pobrania użyć pipety automatycznej (odciąć nożyczkami 1-2 mm końcówki tipsa. abv poszerzyć iego wlot) roztwór pobierać bardzo wolno i dokładnie. Szybkość powstawania i intensywność zabarwienia kompleksu zależą od temperatury roztworu. Wzrost temp. o 1°C powoduje wzrost zabarwienia o 1 %. Tak więc temperatura próbki, odczynników i wzorców nie powinna się różnić więcej niż o 2°C.

Prowadzący: dr Sławomir Wierzba