Ćwiczenie nr 57: „Pomiar widm absorpcji i stężeń ryboflawiny w roztworze wodnym za pomocą spektrofotometru.”.
Teoria:
Widmem absorpcji nazywa się w spektroskopii zależność absorpcji ε od długości fali λ, ε(λ). Jak wynika ze wzoru: A(λ)= ε(λ) cl.
Wartość absorbancji A dla danej długości fali λ jest iloczynem wartości współczynnika ε dla tej samej długości fali i stałej wartości cl, która nie zależy od λ. Stąd wniosek, że wykres zależności A(λ) ma taki sam charakter i dostarcza podobnych informacji jak wykres funkcji ε(λ). Wykres zależności A(λ) można traktować również jako widmo absorpcji.
Pomiar widma dokonuje się za pomocą spektrofotometru. Kolejno dla poszczególnych długości fal odczytujemy na skali spektrofotometru absorbancjię A i transmitancję T w zakresie ultrafioletu i w dziedzinie widzialnej lub tylko w dziedzinie widzialnej. Podczas pomiaru absorbancji roztworów jako natężenie światła Io przyjmuje się natężenie światła przechodzącego przez kuwetę z rozpuszczalnikiem. rozpuszczalnikiem ten sposób eliminuje się osłabienie wiązki w wyniku załamanie i rozpraszania światła w kuwecie i rozpuszczalniku.
Lp. |
λ (nm) |
E(A) |
T |
1 |
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|
|
4 |
|
|
|
5 |
|
|
|
6 |
|
|
|
7 |
|
|
|
8 |
|
|
|
9 |
|
|
|
10 |
|
|
|
11 |
|
|
|
12 |
|
|
|
13 |
|
|
|
14 |
|
|
|
15 |
|
|
|
16 |
|
|
|
17 |
|
|
|
18 |
|
|
|
19 |
|
|
|
Tabela z wynikami pomiarów.