OS艁ONY BAKTERYJNE
B艁ONA CYTPLAZMATYCZNA
1. B艂ona cytoplazmatyczna:
- W艂a艣ciwa b艂ona kom贸rkowa, kt贸ra 艣ci艣le otacza cytoplazm臋 i odgradza wn臋trze kom贸rki od 艣ciany kom贸rkowej.
- Jest przegrod膮 wybi贸rczo p贸艂przepuszczaln膮, kt贸ra kontroluje wymian臋 substancji z otoczeniem.
- Tworzy j膮 tr贸warstwowy kompleks lipiodowo - bia艂kowy, w kt贸rym w podw贸jn膮 warstw臋 lipiodow膮 w艂膮czone s膮 bia艂ka integralne.
- Bia艂ka stanowi膮 50 - 75% sk艂adu: s膮 przeno艣nikami 艂. oddechowego , absorbuj臋 艣wiat艂o, transporuj膮( permeazy), s膮 receptorami.
Stosunek bia艂ek do lipid贸 jest cech膮 gatunkow膮.
- Lipidy oboj臋tne i fosfolipidy ( stanowi膮 70 - 90 % wszystkich lipid贸w kom贸rkowych)
- U baktreii gramdodatnich: mono - i difosfatydyloglicerol,
- U bakterii gramujemnych: fosfatydyloinozytol i fosfatydyloetanoloami.
Funkcje b艂ony kom贸rkowej u bakterii:
- Najwa偶niejsza to transport: pierwiastk贸w, substancji od偶ywczych i produkt贸w metabolizmu: ( na zasadzie: dyfuzji prostej, dyfuzji u艂atwionej, transportu aktywnego z udzia艂em ATP)
Ponadto w b艂onie cytoplazmatycznej bakterii: funkcjonuje 艂a艅cuch oddechowy; zachodzi syneza ATP; syntetyzowane s膮 sk艂adniki 艣ciany kom贸rkowej i otoczek; synteyzowane i wydzielane s膮 egzoenozymy; znajduje si臋 centrum replikacji DNA; zakotwiczone s膮 rz臋ski;
Model b艂ony cytoplazmatycznej. Bia艂ka znajduj膮 si臋 w podw贸jnej warstwie lipidowej.
Transport cz膮steczek przez b艂on臋:
niepolarne cz膮steczki hydrofobowe( azot, tlen, alkohol benzylowy, etan, telenek azotu, wod贸r) przechodz膮 przez b艂on臋,
ma艂e cz膮steczki polarne bez 艂adunku ( woda, mocznik, glicerol, dwutlenek w臋gla) przechodz膮 przez b艂on臋,
du偶e cz膮steczki polarne bez 艂adunku ( glukoza, sacharoza) nie przechodz膮 przez b艂on臋,
jony (kationy: sodu, potasu, magnezu, wapnia, aniony: HCO3, chloru, HPO4) nie przechodz膮 przez b艂on臋,
du偶e cz膮steczki polarne z 艂adunkiem ( glukozo - 6- fosforan 2-, ATP4-, aminokwasy) nie s膮 przepuszczane przez b艂on臋.
2.艢ciana kom贸rkowa:
Wraz z b艂on膮 cytoplazmatyczn膮 stanowi 25% s.m. kom贸rki,
Jest zewn臋trzn膮 os艂on膮 kom贸rki i stref膮 kontaktu ze 艣rodowiskiem,
Jest elastyczna, nadaje kszta艂t kom贸rce,
Ca艂kowicie przepuszczalne jest dla soli i substancji drobnocz膮steczkowych,
Jest jedn膮 z najbardziej z艂o偶onych chemiczne i strukturalne cz臋艣ci kom贸rek,
Budowa 艣ciany kom贸rkowej jest kryterium podzia艂u bakterii na gram + i gram --,
Charakterystycznym sk艂adnikiem 艣ciany stanowi膮cym szkielet podoporowy jest peptydoglikan mureina, kt贸ry wyst臋puje u obu grup.
Bakterie metod膮 Grama barwione s膮 na: bakterie gram +( Bacillus cereus) na niebiesko a gram -- (Pseudomonas aeruginosa) na czerwono.
Sk艂adnikami jej s膮: peptydoglikan; kwas tejchojowy; kwas lipotejchojowy; bia艂ka, kt贸re przenikaj膮 peptydoglikan na zewn膮trz.
B艂ona kom贸rkowa bakterii gramujemnych:
Sk艂adnikami 艣ciany tych bakterii s膮: peptydog膮likan, zewn臋trzna b艂ona cytoplazmatyczna o budowie asymetrycznej (warstwe wewn臋trzn膮 tworz膮 fosfolipidy)m za艣 zewn臋trzn膮 unikatowe zwi膮zki - lipopolisacharydy LPS. Obszar pomi臋dzy obu b艂onami stanowi przestrze艅 peryplazmatyczna; mureina, osmoregulowane glukany, liczne bia艂ka: enzymy kataboliczne, ochronne, wi膮偶膮ce, itegruj膮ce, transportuj膮ce, fuzyjne, itp.
Budowa:
Zawiera tylko 1-3 warstw mureiny, fosfolipidy, bia艂ka, lipoproteiny, lipopolisachatyd -LPS oraz nie zawiera kwas贸w tejchojowych.
Charakterystycznym sk艂adnikiem jest lipopolisacharyd -LPS. Sk艂ada si臋 z 3 cz臋艣膰i: lipidu A, rdzenia R i O-swoistych 艂. bocznych.
1. Lipid A: Disacharyd glukozoaminy, kt贸rego gr. OH s膮 zestryfikowane kwasami t艂uszczowymi ( C13, C14, C16), zakotwiczonymi w b艂onie zewn臋trznej. Najbardziej konseratywna cz臋艣膰 LPS- aktywna endotoksycznie.
2. Rdze艅 R:
Tworz膮 go: - 3 reszty KDO kwasu 2-keto, 3-deoksyoktonowy,
- 2 cz臋艣膰i heptozy ,
- rozga艂臋ziony 艂a艅cuch: Glu, Gal, GluNAc.
Budowa peptydoglikanu - mureiny:
1.) 艁a艅cuchy sacharydowe zbudowane na przemian z N- acetyloglukozoaminy i kwasu N acetylomuraminowego (wi膮z. 脽-1,4- glikozyd.) kt贸ry po艂膮czony jest z pentapeptydem o sk艂adzie charakterystycznym dla gatunku.
2.) Pentapeptyd zawiera aminokwsay szeregu D kwas m- diaminopimelinowy (zwi膮zki nie wyst臋puj膮ce u ro艣lin i zwierz膮t).
Rola peptydoglikanu w kom贸rce:
- Warunkuje kszta艂t bakterii,
- Chroni przed skutkami zmian ci艣nienie, czynnikami chemicznymi, fizycznymi, mechanicznymi,
- Pe艂ni rol臋 sita molekularnego - wi膮偶e jony metali.
U bakterii gram + jest oko艂o 40 warstw mureiny.
Kwasy tejchojowe: s膮 polimerami (8-50 cz膮steczek) fosforanu glicerolu lub fosforanu rybitolu, podstawionymi resztami D- Alaniny.
Kwasy tejchuronowe: s膮 polimerami kwasu uronowego( najcz臋艣ciej N-acetylomannozaminouronowego), lub glukuronowego i innego sacharydu.
Kwasy lipotejchojowe: polimery fosforanu glicerolu (25-40 reszt) powi膮zane wi膮zxaniami fosfodiestrowymi, cz臋sto przedzielone resztami galaktozy. Cech膮 charakterystyczn膮 jest ich wyst臋powanie na ko艅cu 艂a艅cucha glikolipidu zakotwiczonego w b艂onie cytoplazmatycznej.
Strukutra lipoglikanu Bifidobacterium bifudum:
Otoczki:
S膮 to substancje pokrywaj膮ce zewn臋trzn膮 艣cian臋 kom贸rkow膮 bakterii.
Je偶eli s膮 艣ci艣le zwi膮zane z powierzchni膮 kom贸rki, to tworz膮 otoczki; je偶eli lu偶no to - 艣luzy.
Zdolno艣膰 syntezy substancji otoczkowych jest cech膮 gatunkow膮.
Zale偶y od sk艂adu 艣rodowiska i obecno艣ci tlenu.
Sk艂ad chemiczny otoczek jest cech膮 gatunkow膮 lub rodzajow膮.
W wi臋kszo艣ci otoczki sk艂adaj膮 si臋 z:
-polisacharyd贸w: glukany, aminocukry, ramnozy, kwasy uronowe.
kwas贸w: kwas pirogronowy, kwas octowy,
tak偶e: polipeptyd贸w, peptydoglikan贸w, glikolipid贸w.
Rola otoczek:
Chroni膮 bakterie przed wysychaniem, oraz dzia艂aniem antybiotyk贸w,
Mog膮 wi膮za膰 jony metali ci臋偶kich i kationy potrzebne kom贸rce,
Uczestnicz膮 w nieswoistej adhezji( adherencji)
S膮 czynnikiem zjadliwo艣ci, chroni膮 przed fagocytoz膮,
Bakterie chorobotw贸rcze tworz膮 mikrokolonie w otoczce wielocukru- glikokaliks, kt贸ry chroni je przed fagocytoz膮, oraz s艂u偶y wymianie substancji od偶ywczych.
Przyk艂ady:
- Leuconostoc mesenteroides z sacharozy wytwarza dekstran,
- Streptococus selivans z sacharozy wytwarza lewan,
Bakteryjne warstwy S ( ang. Surface layer)
S膮 to najbardziej zewn臋trzne struktury os艂on bakteryjnych, nie licz膮c otoczek,
Tworzy je pojedyncza warstwa identycznych jednostek bia艂kowych kwa艣nych lub hydrofobowych o M.cz. 10-200kDa, charakterystycznych dla gatunku. Warstw臋 S mog膮 tak偶e tworzy膰glikoproteiny.
Bia艂ka S przylegaj膮 do mureiny lub LPS, kt贸ry przerastaj膮.
Nie s膮 niezb臋dne do 偶ycia, ich rola i funkcja nie jest w pe艂ni poznana.
Mog膮 pe艂ni膰 rol臋 sita molekularnego ( wi膮偶膮 kationy wapnia i magnezu), hamnowa膰 adhezj臋 do fibroblast贸w, mie膰 funkcj臋 ochronn膮.
Wyst臋puj膮 u archebakterii: u kt贸rych stanowi膮 jedyn膮 struktur臋 powierzchniow膮 obok b艂ony plazmatycznej, u Arcinetobacter, Aquaspirillum, Bacilllus, Clostridium.
Bia艂ka amyloidalne:
Amyloidy s膮 to w艂贸kniste struktury bia艂kowe 10nm x 0,1-10mikrometrow.
Maj膮 wsp贸lny motyw strukturalny tzw: poprzeczn膮 struktur臋 尾.
Obecno艣膰 fibryli amyloidalnych jest cech膮 diagnostyczn膮 chor贸b: Alzheimera, Creudzfedta-Jacoba.
W 2002 r. wykazano, 偶e tworz膮 one p艂aszcz na powierzchni patogen贸w.
- U promieniowc贸w i bakterii gramujemnych ( brak jej warstwy S),
- U Streptomyces wyst臋puj膮 chapliny(8 rodz.), kt贸re formuju膮 regularne struktury w postaci b艂onki, kt贸ra u艂atwia wnikanie do kom贸rki gospodarza,
- U bakrerii Salmonella i E.coli bia艂ka te tworz膮 fimbrie spiralne lub agregacyjne.
Strukt贸ry zewn膮trzkom贸rkowe:
1. Rz臋ski:
- S膮 to organelle ruchu, zbudowane z kurczliwego bia艂ka flagelliny(M.cz. 15-70 kDa) o strukt. lewoskr臋tnej helisy, pustej w 艣rodku. S膮 immunogenne - tzw. antygen H.
- 11 spiralnie zwini臋tych jednostek tworzy w艂贸kno 脴 10-20 nm, d艂ug. 5-50 mikrometr贸w, w ilo艣ci 1-100/kom贸rk臋.
- Sk艂adaj膮 si臋 z cia艂ka podstawowego zaczepionego w b艂onie cytpolazmatycznej, w艂贸kna i haczyka.
- Osadzone s膮 biegunowo lub bocznie.
- Wyst臋powanie i spos贸b u艂o偶enia s膮 cech膮 taksonomiczn膮. Antygeny rz臋skowe H wykorzystywane s膮 w serodiagnostyce.
- Rz臋ska bakterii gramdodatnich ma prost膮 budow臋: rdze艅, 2 pier艣cienie M i S w warstwie mureiny, hak i w艂贸kno.
Budowa rz臋ski:
Rz臋sk臋 bakterii gramujemnej buduje 25 r贸偶nych bia艂ek, z czego 20 cia艂o podstawowe. Ma 4 pier艣cienie.
Cia艂o podstawowe- obrotowy motor, kt贸ry nadaje ruch, oraz kotwiczy rz臋sk臋 w os艂onkach kom贸rkowych.
Jest najbardziej z艂o偶on膮 cz臋艣ci膮: 4 pier艣cienie, przez kt贸re przechodzi centralny pusty rdze艅:
1. pier艣cie艅 MS zbudowany z bia艂ka FliF, od wewn膮trz zwi膮zany z bia艂kiem FliG zakotwiczony w b艂onie cytoplazmatycznej.
2. pier艣cie艅 P zbudowany z bia艂ka FliI zakotwiczony w mureinie
3. pier艣cie艅 L zbudowany z bia艂ka FliH zakotwiczony w warstwie lipopolisacharydowej b艂ony zewn臋trznej
4. pier艣cie艅 C (cytoplazmatyczny) zbudowany z bia艂ka FliM i FliN, poni偶ej ppier艣c. MS- zwi膮zany z wieloma bia艂kami transportowanymi do haka i w艂贸kna. Bia艂ka C i FliG tworz膮 rotor. Na pozpiomie pier艣cienia MS zwi膮zane s膮 bia艂ka statora.
Drobnoustroje urz臋sione reaguj膮 na bod偶ce ukierunkowanym ruchem - taksj膮:
1. Chemotaksja- ruch w kierunku substancji chemiczne (atraktanta) np,. glukozy 10-5 - 10-8 M, lub ucieczka z miejsca (repelenta).
2. Fototaksja - ruch w kierunku 艣wiat艂a. Wra偶liwo艣膰 kom贸rek Chromatium zbli偶ona do oka ludzkiego. Zmiany ruchu b. szybkie (reakcja przestraszenia).
3. Aerotaksja - zachowanie ruchy wzgl臋dem tlenu, np. skupianie bakterii beztlenowych na 艣rodku szkie艂ka, a tlenowych przy brzegach.
4. Magnetotaksja - orientacja w polu magnetycznym wzd艂u偶 linii si艂 pola. Beztlenowce osad贸w dennych gromadz膮 w kom贸rkach ferromagnetyczny tlenej 偶elaza dzi臋ki kt贸remu d膮偶膮 w kierunku p贸艂nocnego bieguna magnetycznego - miejsca ich budowania.
5. Termotaksja - ruch w kierunku optymalnej temperatury: mezofile, psychrofile, termofile.
2. Fimbrie (Fimbria 艂ac. ni膰, w艂贸kno; pilus 艂ac. w艂os)
Nitkowate struktury bia艂kowe odchodz膮ce od kom贸rki w stron臋 艣rodowiska o wymiarach 脴 10nm (wewn. 0,2), d艂ug 0,5-2 mikrometra, bardzo zr贸偶nicowane.
- Zbudowane z bia艂ka piliny(fimbryny) o M.cz. 26kDa.
- Wyst臋puj膮 u bakterii urz臋sionych i nieuurz臋sionych, g艂贸wnie gram--, w ilo艣ci 10 - kilka tys.
Ich rola jest r贸偶norodna:
- Niekt贸re po艣rednicz膮 w koniugacji zwi臋kszaj膮c powierzchni臋 absorbcyjn膮 kom贸rki (F)
- Maj膮 zdolno艣ci adhezyjne do kom贸rek ro艣linnych i zwierzecych, co wskazuje na ich funkcj臋 ekologiczn膮
- Nadaj膮 kom贸rkom zdolno艣膰 do agregacji co umo偶liwia im wzrost w postaci biofilmu lub b艂onki na pod艂o偶ach sta艂ych
- Pilusy p艂ciowe typu F wyst臋puj膮 pojedynczo u szczep贸w E. coli K12 zawieraj膮cych czynik F(Fim+).
Og贸lnie fimbrie dziel膮 si臋na 2 grupy: kodowane przez nukleoid = f. pospolite
kodowane przez plazmidy = f. p艂ciowe F
- fimbrie pospolite zlepiaj膮 erytrocyty, co mo偶e hamowa膰 mannoza= Msh
- je偶eli mannoza nie hamuje hemaglutynacji = f. Mrh - mannozooporne
Podzia艂 fimbri u bakterii:
- pospolite:
Typ I: Msh - mannozowra偶liwe;
Typ II: Mrh - mannozooporne (P, S, FIC, G)
- p艂ciowe
f.P - Pap zbudowane z 6 r贸偶nych bia艂ek, wyst臋puj膮 na bakteriach wywo艂uj膮cych odmiedniczkowe zapalenie nerek, warunkuj膮 przyleganie bakterii do nab艂onka dr贸g moczowych.
f.S - wyst臋puj膮 u E. coli, kt贸re r贸wnie偶 wywo艂uj膮 zaka偶enie dr贸g moczowych
Mannozowra偶liwe f.Msh wyst臋puj膮 powszechnie na bakteriach:E,coli, Klebsiella, Salmonella, Shigella, Serratia, Proteus. Tworz膮 prawoskr臋tn膮 spirale o 脴 7 nm; wi膮偶膮 si臋 z receptorami zawieraj膮cymi Man, na kom贸rkach nab艂onka: jamy ustnej, jelita, pochwy.
Obecnie pilusy dziel膮 si臋 na 4 klasy:
I. fimbrie o 脴 7 nm, maj膮 wewn臋trzny kana艂 2 nm. Bia艂ko dystalne jest inne ni偶 w trzonie. Przedstaiwciele: fimbrie typu I i fimbrie P
II. fimbrie cienkie o 脴2-3 nm, d艂ugie i gi臋tkie np. 987P
III. fimbrie spiralne- curli o 脴 2-4 nm, silnie zwini臋te struktury powierzchniowe. Wytwarzane przez E. coli i Salmonella
IV. fimbrie gi臋tkie o 脴 4-6 nm, d艂ugo艣ci do 4 mikrom, tworz膮 wi膮zki np. TFP
Niekt贸re nie daj膮 si臋 sklazyfikowa膰: pilusy p艂ciowe - E.coli i pilusy T - Agrobacterium tumefaciens.
Fimbrie typu IV ( TFP - ang. type four pili)
- Uczestnicz膮 w ruchu na pod艂o偶u sta艂ym, wywo艂uj膮 ruch drgaj膮cy(ang. twitching), kr贸tkie przerywane szarpni臋cia.
- Wi膮偶膮 si臋 niespecyficznie z pod艂o偶em, a nast臋pnie skracaj膮c, ci膮gn膮 kom贸rke do przodu.
- Umieszczone s膮 biegunowo, nie maj膮 centralnego kana艂u.
- Niekt贸re pe艂ni膮 funkcj臋 adhezyn - wi膮偶膮 si臋 z receptorami kom贸rek eukariotycznych
- TFP Geobacter sulfurreducens uczestnicz膮 w adhesji, a tak偶e s艂u偶a jako biologiczne przewodniki, przenosz膮 elektrony od powierzchni kom贸rki do ko艅cowego akceptora Fe(III).
Wyr贸偶nia si臋 3 szlaki biogenezy pilus贸w u enterotoksycznych E.coli:
- Piliny dostaj膮 si臋 na zewn膮trz kom贸rki szlakiem og贸lnej sekrecji np. fimbrie P
- Translokacja pilus贸w typu IV z udzia艂em specjalnych bia艂ek b艂ony zewn臋trznej o charakterze supersekretnym
- Sk艂adanie pilus贸w typu curli.
3. Celulosomy
S膮 to du偶e, wielobia艂kowe kompleksy (0,7-2 Mda) zwi膮zane z powierzchni膮 kom贸rek niekt贸rych beztlenowych bakterii celulolitycznych np. Clostridium cellulolyticum, Bacteroides cellulsolvens.
- Charakteryzuj膮 si臋 skuteczn膮 degradacj膮 krystalicznej celulozy i innych polisacharyd贸w 艣cian kom贸rkowych ro艣lin.
- Celulosomy sk艂adaj膮 si臋 z wielu enzym贸w celulolitycznych i pokrewnych ( mannanazy, chitynazy, ksylanazy, endo- i egzoglukanazy) silnie zwi膮zanych z bia艂kami fibrylarnymi tworz膮cymi rusztowanie, nazywanych skafoldynami ( ang. scaffold).
- Skafoldyny (Sca) maj膮 miejsca wi膮zania enzym贸w= kohezyny
- Enzymy maj膮 miejsca wi膮zania ze skafoldynami= dokeryny
- Skafoldyna ma 6-9 kohezyn, kt贸re wi膮偶膮 26 r贸偶nych enzym贸w celulosomu, a to zale偶y od obecno艣ci jon贸w Ca2+.
- Opr贸cz kohenzyn maj膮 domeny wi膮偶膮ce celuloz臋 lub w臋glowodany oraz bia艂ka powierzchniowe kom贸rki bakteryjnej.
- Celulosomy mog膮 tworzy膰 skupienia= policelulosomy
- Wydajno艣膰 katalityczna enzym贸w zawartych w celulosomach jest znacznie wy偶sza w por贸wnaniu z enzymami wydzielanymi pozakom贸rkowo.
Regulacja wytwarzania tych struktur jest z艂o偶ona i s艂abo poznana.
Pojawiaj膮 si臋 oko艂o 5 godz. po podaniu do pod艂o偶膮 celulozy, oraz znikaj膮 w ci膮gu 5 min. od jej zast膮pienia innym cukrem.
4. P臋cherzyki b艂onowe
Bakterie gramujemne podczas wzrostu tworz膮 uwypuklenia b艂ony zewn臋trznej nazywane p臋cherzykami b艂onowymi (MVang. membrane vesicles)
P臋cherzyki te o 脴 50 - 250 nm odrywaj膮 si臋 od powierzchni.
Zawieraj膮 one: cz臋艣膰 peryplazmy, bia艂ka b艂ony zewn臋trznej, lipopolisacharyd, fosfolipidy.
W艣r贸d bia艂ek p臋cherzyk贸w MV obecne s膮: autolizyny hydrolizuj膮ce murein臋, fosfolipazy C, proteazy hemoolizyny, 尾 - laktamaz.
Rola pcherzyk贸w:
P臋cherzyki Pseudomonas aeruginosa mog膮 atakowa膰 bakterie gramdodatnie i gramujemne, ulegaj膮 fuzji z ich b艂on膮 zewn臋trzn膮 i uwalniaj膮 swoj膮 tre艣膰 do peryplazmy. Enzymy w perypla藕mie "ofiary" degraduj膮 murein臋 i inne sk艂adniki.
P臋cherzyki Porphyromonas gingivalis uczestnicz膮 w agregacji wielu gatunk贸w w jamie ustnej, co prowadzi do powstania biofilmu i kolonizacji szkliwa.
Szczepy E.coli translokuj膮 czynnik nekrotyczny za pomoc膮 MV.
Mog膮 r贸wznie偶 degradowa膰 bia艂ka i polisacharydy pozakom贸rkowo, ulegaj膮c adhezji do w艂贸kien celulozy.
Mog膮 tak偶e chroni膰 kom贸rk臋 przed bakteriofogami lub zwi膮zkami toksycznymi.
U niekt贸rych bakterii zawieraj膮 DNA, kt贸y w ten sp, chroniony jest przed nukleazami.
Mog膮 tak偶e DNA wprowadza膰 do kom贸rek biorcy np: Neisseria, Salonella, E.coli.
Biofilmy bakteryjne
-W warunkach laboratoryjnych wi臋kszo艣膰 bakterii zar贸wno saprofitycznych jak i patogennych rozmna偶a si臋 na sta艂ych po偶ywkach tworz膮c skupiska w postaci kolonii
-W 艣rodowisku naturalnym wi臋kszo艣膰 bakterii wyst臋puje w postaci biofilm贸w. Ponad80%infekcji w ludzkim org. Wywo艂anych jest przez drobnoustroje, g艂贸wnie bakterie, rosn膮ce w tej postaci. Po raz pierwszy zjawisko tworzenia biofilm贸w zauwa偶y艂 Anton van Leeuwenhoek w 1684r
-najcz臋艣ciej biofilm tworz膮 kom贸rki nale偶膮ce do r贸偶nych gatunk贸w drobnoustroj贸w, przylegaj膮cych do siebie, otoczonych wytwarzan膮 przez nie macierz膮 pozakom贸rkow膮.
Jest on heterogenn膮 zorganizowan膮 przestrzennie struktur膮 dwu- lub tr贸jwymiarow膮 sk艂adaj膮c膮 si臋 z kom贸rek i materia艂u pozakom贸rkowego.
Wyst臋powanie biofilmu:
Biofilm mo偶e ukszta艂towa膰 si臋 na dowolnej powierzchni:
a) sta艂ej biotycznej: wewn膮trz 偶ywych organizm贸w: na b艂onie 艣luzowej narz膮d贸w, na z臋bach, na implantach, na tkankach ro艣lin.
b)abiotycznej jakimi s膮 naturalne systemy wodne, ska艂y w strumieniach b臋d膮ce w kontakcie z wod膮 czy rury kanalizacyjne
c)na granicy faz woda/powietrze
d)przez wzajemn膮 adhezj臋 kom贸rek
e)Inne przyk艂ady:na korzeniach ro艣lin motylkowych, w przewodzie trawiennym zwierz膮t, na szk艂ach kontaktowych, na protezach, implantach medycznych, drenach, cewnikach, w wewn臋trznych cz臋艣ciach przewod贸w i instalacji przemys艂owych, na kamieniach rzecznych, na kad艂ubach statk贸w, w wodach gruntowych.
Powstawanie struktury biofilmu:
1.Makromoleku艂y znajduj膮ce si臋 w 艣rodowisku osadzaj膮 si臋 na powierzchni adhezji tworz膮c warstw臋 kondycjonuj膮c膮
2. Mikroorganizmy zbli偶aj膮 si臋 do powierzchni, do kt贸rej nast臋puje adhezja
3. Adhezja odwracalna, niekt贸re kom贸rki mog膮 swobodnie powr贸ci膰 do 艣rodowiska
4, Adhezja nieodwracalna
5. Dojrzewanie biofilmu i wydzielanie EPS
6. Oddzielanie si臋 niekt贸rych mikroorg. Ze struktury biofilmu
Etap I(odwracalny)
*faza odwracalnej adhezji: swobodnie p艂ywaj膮ce bakterie osiadaj膮 na pod艂o偶u i przyczepiaj膮 si臋 do niego, tworz膮c skupiska.
*si艂y powoduj膮ce oddzia艂ywania pomi臋dzy mikroorg. i powierzchni膮 to:
-艂adunki elektryczne na powierzchni kom贸rek bakteryjnych
-oddzia艂ywania van der Waalsa
-przyci膮ganie elektrostatyczne
*na powierzchniach kom贸rek organizmu gospodarza mog膮 znajdowa膰 si臋 tak偶e receptory wi膮偶膮ce si臋 specyficznie i silnie z poszczeg贸lnymi cz膮st. na powierzchni patogenu
tap I (odwracalny):
-faza odwracalnej adhezji: swobodnie p艂ywaj膮ce bakterie osiadaj膮 na pod艂o偶u i przyczepiaj膮 si臋 do niego, tworz膮c skupiska.
-si艂y powoduj膮ce oddzia艂ywania pomi臋dzy mikroorganizmami i powierzchni膮 to:
*艂adunki elektryczne na powierzchni kom贸rek bakteryjnych
*oddzia艂ywania van der Waalsa oraz przyci膮ganie elektrostatyczne.
Na powierzchniach kom贸rek organizmu gospoda mog膮 znajdowa膰 si臋 tak偶e receptory wi膮偶膮ce si臋 specyficznie i silnie z poszczeg贸lnymi cz膮steczkami na powierzchni patogena.
Etap II(nieodwracalny):
Faza nieodwracalnej adhezji: Bakterie tworz膮ce skupisko zaczynaj膮 wydziela膰 substancje pozakom贸rkow膮. Przekazuj膮 sobie sygna艂y stymuluj膮ce je do rozmna偶ania si臋 i tworzenia kolonii.
-w fazie po艣redniej dominuje wydzielanie i rozw贸j struktury pozakom贸rkowej macierzy, kt贸rej g艂贸wnym sk艂adnikiem s膮 polisacharydy 艣ciany kom贸rkowej EPS: extracellular polimer substances, zawieraj膮ce mannoz臋 i reszty glikozydowe.
-zmiany otoczenia powoduj膮 silne zwi膮zanie si臋 bakterii z powierzchni膮.
Adhezja zachodzi w dw贸ch fazach:
Faza pocz膮tkowa- odleg艂o艣膰 pod艂o偶a od organizmu wynosi ponad 50nm. Najwi臋ksz膮 rol臋 odgrywaj膮 tu oddzia艂ywania fizyczne: si艂y hydrodynamiczne, dyfuzja, grawitacja, ruchy Browna, si艂y van der Waalsa, 艂adunki kom贸rek i ich ruchliwo艣膰.
Faza zasadnicza- odleg艂o艣膰 kom贸rki od pod艂o偶a wynosi ok. 3 nm. Zasadnicza rol臋 w tworzeniu wi膮za艅 odgrywaj膮 si艂y chemiczne: wi膮zania wodorowe, kompleksy jonowe, wi膮zania C-C.
Stabilizuj膮 one rol臋 ka偶dego biofilmu.
Etap III
Faza dojrzewania:
-podczas etapu dojrzewania struktury biofilmu nast臋puje dalszy przyrost substancji pozakom贸rkowej a偶 do ca艂kowitego otoczenia przez ni膮 powsta艂ych kolonii.
-na tym etapie w sk艂ad biofilmu wchodz膮, opr贸cz mikroorganizm贸w: martwe kom贸rki, substancje organiczne, wytr膮cane minera艂y itp.
-do takich struktur przy艂膮czaj膮 si臋 kolejne gatunki bakterii.
Etap IV i V
Faza dalszego dojrzewania i oddzielania niekt贸rych mikroorganizm贸w:
-powstaj膮 gradienty chemiczne umo偶liwiaj膮ce wsp贸艂istnienie bakterii r贸偶nych gatunk贸w i znajduj膮cych si臋 w rozmaitych stanach metabolicznych.
-niekt贸re kom贸rki opuszczaj膮 biofilm, by tworzy膰 nowe skupiska.
Charakterystyka biofilmu:
*Bytuj膮ce w biofilmie mikroorganizmy wykazuj膮 wysok膮 odporno艣膰 na:
-czynniki antymikrobiologiczne: antybiotyki, detergenty, toksyny, metale, surfaktanty
-na fagocytoz臋
-na zmiany pH
-ograniczon膮 dost臋pno艣膰 sk艂adnik贸w od偶ywczych
-nie odpowiednie warunki tlenowe, co predysponuje bakterie do bytowania w niekorzystnych warunkach 艣rodowiskowych.
*wydzielane przez mikroorganizmy wt贸rne metabolity np. biosurfaktanty, egzopolisacharydy stanowi膮 dodatkowe 藕r贸d艂o w臋gla, azotu i innych niezb臋dnych pierwiastk贸w oraz zwi膮zk贸w.
*w obr臋bie biofilmu nast臋puje r贸偶nicowanie poszczeg贸lnych kom贸rek i dostosowanie ich do specyficznych funkcji, poprzez wydzielanie do 艣rodowiska biowarstwy specyficznych cz膮steczek autoinduktor贸w.
艢rodowisko biofilmu:
-w obr臋bie biofilmu bakterie znajduj膮 si臋 w mieszanych stanach metabolicznych.
-na obrze偶ach wykazuj膮 przejawy 偶ycia takie jak np. wzrost
-natomiast kom贸rki po艂o偶one w g艂臋bszych warstwach s膮 偶ywe, ale 鈥榰艣pione鈥(znajduj膮 si臋 w stanie anabiozy).
Negatywne konsekwencje tworzenia biofilmu przez bakterie:
-dojrza艂a struktura biofilmu jest trudna do usuni臋cia z powierzchni na kt贸rej powsta艂a.
-bakterie tworz膮ce biofilm powoduj膮 przewlek艂e schorzenia u ludzi, zw艂aszcza o obni偶onej odporno艣ci immunologicznej.
-s膮 przyczyn膮 ska偶e艅 偶ywno艣ci.
-zaburze艅 w wymianie ciep艂a oraz korozji stali, wynikaj膮cych z utworzenia si臋 tr贸jwymiarowej struktury mikrokolonii wewn膮trz instalacji produkcyjnych.
Stosowanie biominera艂贸w, takich jak: cewniki, protezy narz膮dowe, rozruszniki spowodowa艂o znaczny post臋p w medycynie i przed艂u偶y艂o 偶ycie wielu chorym. Sta艂y si臋 one jednak powa偶nym czynnikiem ryzyka zaka偶enia.
S. epidermidis, S. aureus i P. aeruginosa maj膮 zdolno艣膰 do przylegania I kolonizowania biominera艂贸w. Zaka偶one biominera艂y s膮 cz臋st膮 przyczyn膮 wysiewu drobnoustroj贸w do krwi i wielu gro藕nych powik艂a艅 np. sepsy.
P艂ytka naz臋bna:
-jama ustna jest z艂o偶on膮 i bardzo heterogenn膮 nisz膮 ekologiczn膮.
-艣lina zawiera niewiele substancji pokarmowych i jest bogata w zwi膮zki antybakteryjne np. histatyny, lizozym, laktoperoksydaza.
-w jamie ustnej cz艂owieka zadomowi艂o si臋 jednak wiele r贸偶nych mikroorganizm贸w, zar贸wno gram + aerotolerancyjne beztlenowce( Streptococcus oralis, S. salivarus), jak i bezwzgl臋dne beztlenowce( actinomyces actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis).
-bakterie mlekowe takie jak Streptococcus sobrinus i S. mutans produkuj膮ce kwasy szkodliwe dla szkliwa.
Pozytywne strony powstawania biofilm贸w:
-odpowiedni dob贸r gatunk贸w bakterii oraz warunk贸w tworzenia biofilmu mo偶e by膰 wykorzystany do:
*biokontroli patogen贸w ro艣linnych
*w bioremediacji gleb
*w degradacji biopolimer贸w
*do czyszczenia wody oraz inhibicji korozji stali
*do filtracji mikrobiologicznej