Ogólna technologia żywności
Laboratorium
Laktoza
Technologia Chłodnictwa Żywności
Dzień zajęć: poniedziałek
Godz.: 8:00 - 12:00
Piotr Tylak
1.Cel ćwiczenia.
Zapoznanie się z laboratoryjnym sposobem otrzymywania albumin oraz laktozy z serwatki.
2.Wstęp teoretyczny.
Serwatka jest produktem odpadowym technologii produkcji serów. Jest niemal klarowną cieczą, będąca pozostałością po całkowitym ścięciu mleka krowiego. Zawiera blisko 5% laktozy, do 1% białka i ok. 0,5% tłuszczu oraz sole mineralne i witaminy. Stanowi połowę suchej masy mleka
Laktoza (cukier mlekowy) jest dwucukrem redukującym, charakteryzującym się małą rozpuszczalnością w wodzie i niskim stopniu słodyczy (13% słodyczy sacharozy). Krystalizacja laktozy może przebiegać w zagęszczonej serwatce naturalnej lub roztworach zagęszczonej serwatki, z której uprzednio usunięto białka powodujące zwolnienie procesu krystalizacji i obniżenie wydajności procesu. W skład białek serwatkowych wchodzą: laktoalbumina, laktoalbumina oraz immunoglobulina.
Przerób serwatki jest uzależniony od jej rodzaju. Serwatka podpuszczkowa może być poddawana bezpośrednio zagęszczaniu w temperaturze poniżej 65oC do stężenia około 65%, a następnie przeprowadza się krystalizację laktozy. Roztwór macierzysty po odwirowaniu przeznacza się do suszenia, uzyskując niskobiałkowy koncentrat. W inny sposób serwatkę podpuszczkową poddaje się odbiałczaniu przez ogrzanie serwatki i zakwaszenie kwasem mlekowym do pH ok. 4,8. Po odwirowaniu zawiesiny albuminy serwatkę zagęszcza się i poddaje krystalizacji w celu otrzymania laktozy. Serwatkę kwasową lub serwatkę po kazeinie przerabia się wyłącznie poprzez proces odbiałczenia z użyciem wodorotlenku sodowego lub wapiennego. W serwatce tego typu jest mniej laktozy w suchej masie i wydajność krystalizacji z roztworu niepoddanego odbiałczaniu jest niska. Wytrącony osad albuminowy odwirowuje się lub oddziela na prasie filtracyjnej i poddaje suszeniu. Serwatkę odbiałczaną po przefiltrowaniu zagęszcza się do stężenia 65-70% s.s. i laktozę krystalizuje się przez powolne ochładzanie roztworu do temperatury 60 - 30oC w czasie ok. 60 godzin. Wykrystalizowaną laktozę oddziela się od roztworu macierzystego stosując wirowanie. Roztwór macierzysty poddaje się zdrożdzowaniu lub przeznacza na pasze. Odwirowane kryształy laktozy przeważnie są rozpuszczone w wodzie i stężony roztwór filtruje się na gorąco z dodatkiem węgla aktywnego. Filtrat poddaje się krystalizacji i wirowaniu, uzyskując po wysuszeniu laktozę jednowodną o czystości farmaceutycznej. Laktoza jest również stosowana w przemyśle spożywczym do produkcji wyrobów cukierniczych i odżywek dla dzieci.
3.Część doświadczalna.
Oznaczono kwasowość serwatki poprzez miareczkowanie 0,1 N roztworem NaOH próbki o objętości 20 cm3.
Objętość 0,1 N NaOH potrzebna do zmiareczkowania próby = 9,4 cm3
9,4 cm3 NaOH - 20 cm3 serwatki
x - 100 cm3
x = 47 cm3
C1 ∙ V1 = C2 ∙ V2
V2 =
cm3
Z definicji oSH wynika, że otrzymaliśmy 18,8 oSH
Obliczenie potrzebnej objętości roztworu 2 N NaOH do obniżenia kwasowości serwatki do
7 oSH :
18,8 oSH - 7 oSH = 11,8 oSH
100 ml 0,25 N - 11,8 oSH
100 ml 2 N - (11,8 oSH : 8) = 1,475
600 ml 2 N - (1,475 ∙ 6 ) = 8,85 cm3
Połowę obliczonej ilości roztworu wodorotlenku sodowego dodano do serwatki umieszczonej w zlewce o pojemności 1,5 dm3 o ogrzewano do temperatury ok. 85ºC. Wprowadzono stopniowo pozostałą porcję roztworu wodorotlenku i kontynuowano ogrzewanie w temperaturze ok. 93ºC przez 10 minut
Zawiesinę białek serwatkowych oddzielono pod zmniejszonym ciśnieniem na lejku Büchnera na przegrodzie z bibuły i tkaniny filtracyjnej. Oddzieloną na lejku albuminę wysuszono w suszarce
Zawartość suchej substancji w serwatce klarownej wyniosła 5,15oBx.
Objętość serwatki po przesączeniu wynosiła 527 ml.
W serwatce do analizy pobranej na początku ćwiczenia oznaczono zawartość suchej substancji oraz zawartość laktozy metodą polarymetryczną.
s.s. = 6,5 oBx
odczyt z sacharymetru = 3,5oS
Odbiałczoną i klarowną serwatkę poddano zagęszczeniu w zestawie do destylacji pod zmniejszonym ciśnieniem do uzyskania stężenia 58,9ºBx
Zagęszczoną serwatkę o masie 57,528 g przeniesiono do zlewki wprowadzono kryształy zaszczepowe i pozostawiono w lodówce na tydzień. Po tygodniu kryształy odsączono na lejku Büchnera, osuszono je w suszarni owiewowej w temperaturze 85ºC. Otrzymano po wysuszeniu 20,369 g laktozy. Odważkę 5,006 g laktozy krystalicznej rozpuszczono w 50 cm3 wody (temp. 50ºC), dodano 2 cm3 octanu ołowiawego, 4 cm3 fosforanu sodowego i kilku kropli 5N roztworu amoniaku. Po ustaleniu równowagi mutamerów roztwór przesączono i wyznaczono skręcalność.
Odczyt z sacharymetru = 13,8oS
Procentowa zawartość laktozy w laktozie surowej:
Metodą Kjeldahla oznaczono zawartość białka w osuszonej albuminie wydzielonej z serwatki:
Gdzie:
a - objętość w cm3 0,1M NaOH do zmiareczkowania 50 cm3 około 0,1M HCl (próba odniesienia)
b - objętość w cm3 0,1M NaOH do miareczkowania nadmiaru kwasu w badanej próbie
f - faktor NaOH
n - stosunek objętości kolby miarowej do objętości roztworu poddanego destylacji
p - sucha substancja badanego materiału w %
Obliczono wydajność wyodrębnienia albuminy z 1 dm3 serwatki:
2,10 g ∙ 26,625 % = 0,6550 g
Gdzie: 2,10 g - masa surowca użytego do Kjeldahla
26,625 % - zawartość białka w wysuszonej albuminie
0,6550 g - 600 ml
x - 1000 ml
x = 1,092 g
Obliczono wydajność wyodrębnienia albuminy z 100 g suchej masy serwatki:
1,092 g - 58,9 g
x - 100 g
x = 1,8397 g
Gdzie: 58,9 g - stężenie zagęszczonej serwatki
Obliczono wydajność wyodrębnienia laktozy z 1 dm3 serwatki:
20,369 g ∙ 86,8 % = 17,680 g
Gdzie: 20,369 g - masa skrystalizowanej laktozy
86,8 % - czystość laktozy
17,680 g - 600 ml
x - 1000 ml
x = 29,46 g
Obliczono wydajność wyodrębnienia laktozy z 100 g suchej masy serwatki:
29,46 g -
x - 100 g
x = 95,032 g
Gdzie: 31g - zawartość suchej masy w laktozie skrystalizowanej
4. Wnioski.
Czystość uzyskanej laktozy wyniosła 86,8 %
Wydajność wyodrębnienia albuminy serwatki wyniosła 1,092g na 1 dm3 oraz 1,8397 g na
100 g suchej substancji.
Wydajność wyodrębnienia laktozy z serwatki wyniosła 29,46 g na 1 dm3 oraz 95,032 g na
100 g suchej substancji.
Obliczone na podstawie doświadczeń wydajności obrazują, że uzysk laktozy z serwatki jest znacznie większy niż albumin.