mikrobiologia2

ĆWICZENIE 2

Określenie morfologii bakterii analizowanych typów gleby.

Wykonanie ćwiczenia:

1.    odważyć 10 g badanej gleby, a następnie przesiać je przez sito o odpowiedniej wielkości por;

2.    odważoną glebę zawiesić w 50 ml soli fizjologicznej i mieszać intensywnie przez ok.

5 min.;

3.    pobrać pipeta^ 1 ml roztworu wyjściowego do probówki z 9 ml soli fizjologicznej;

4.    z rozcieńczenia 10'¹ pobrać 1 ml (nową. sterylna pipetą) roztworu do kolejnej probówki z 9 ml soli fizjologicznej otrzymując rozcieńczenie 10'";

Barwienie Grama

5.    przy pomocy ezy pobrać niewielką ilość roztworu z rozcieńczenia 10'² i umieścić na odtłuszczonym i opalonym szkiełku podstawowym;

6.    preparat wysuszyć i barwić metodą Grama wg schematu:

-    fiolet krystaliczny -    2 min.;

-płyn Lugola-    1 min.;

-alkohol-    30 sek.;

-    fuksyna -    20-30 sek.;

7.    po każdym z etapów barwienia preparat zlać intensywnie wodą;

8.    wysuszony preparat oglądać pod mikroskopem używając obiektywu o powiększeniu

100 z olejkiem immersyjnym;

9.    określić morfologię bakterii.

Analizując 10 pól mikroskopowych wyznaczyć stosunek pałeczek do ziarniaków', a następnie porównać we wszystkich analizowanych typach gleby wyznaczony w ten sposób współczynnik jej skażenia.