img053 2

100 Ro/dziai. 8

/// etap polimcraza DNA I (poi I) (kodowana przez gen po!A) uzupełnia brakujący odcinek, rozpoczynając od końca 3 przerwanej nici, a jako matrycę wykorzystuje nieuszkodzoną nić DNA. Ligaza DNA łączy nowo powstałą nić z pozostałą cząsteczką.

Naprawa długich łat

Proces ten jest słabiej poznany, przebiega podobnie jak opisany powyżej, różni się jedynie długością wycinanych fragmentów.

U Eukariota nie występuje system krótkich łat, a system długich łat obejmuje fragmenty 24-29-nukleotydowe. Enzymy biorące udział w naprawie nic są homo-logami białek Uvr. U człowieka w procesie tym uczestniczy ponad 16 białek.

uszkodzony nukleotyd zagina helisę

UvrB wypełnia lukę

nacięcie fragmentu przez UvrB i UvrC

usunięcie pojedynczej nici przez helikazę DNA (UvrD)

polimeraza DNA I + ligaza DNA

Uli 111 i 1 III 11111111111 m lim

Ryc. 8.4. Wycinanie uszkodzonych nukleotydów u E. coli - naprawa krótkich lat

8.2.3. Naprawa niedopasownych nukleotydów (naprawa mutSHL)

System ten poprawia błędy replikacji, rozpoznaje miejsca niekomplementame, wycina odcinek DNA i wypełnia lukę.

U E. coli możemy wyróżnić trzy systemy porcplikacyjnej naprawy niedopasowanych nukleotydów:

a)    system długich łat (więcej niż lkpz),

b)    system krótkich łat (mniej niż 10 nukleotydów),

c)    system bardzo krótkich łat.

System naprawy (llii|*lcli lat

System ten wymaga wielu różnych enzymów i przebiega wieloetapowo

(ryc. 8.5):

- / etap - przyłączenie białek MutS, MutH i MutL,

- iYlutS wykrywa brak komplementamości,

MutH odróżnia nić metylowaną od niemetylowanej, wiąże się w sąsiedztwie niekomplcmentarnych sekwencji (zidentyfikowanych wcześniej przez MutS) i tnie wiązanie fosfodiestrowe w nici niemetylowanej,

MutL rola tego białka nie została dostatecznie wyjaśniona, prawdopodobnie koordynuje ono funkcje białek MutS i MutH.

// etap helikaza DNA II oddziela nici DNA, a egzonukleaza degraduje nić naciętą,

III etap — polimeraza DNA III wypełnia lukę, a ligaza DNA odtwarza wiązanie fosfodiestrowe i łączy nić.

brak komplementamości w nici potomnej

przyłączenie MutL

nacięcie przez MutH i usunięcie nici przez helikazę i egzonukleazę

hełikaza DNA II

Ryc. 8.5. Naprawa niedopasowanych nukleotydów u £. coli - system długich lat