208
Preparaty izomerazy glukozowej wytwarzane są w dwóch postaciach: oczyszczonych preparatów enzymatycznych, całych komórek wykorzystywanych jako biokatalizator (najczęściej w formie unieruchomionej).
Na rys. 17.3 przedstawiono schemat otrzymywania oczyszczonego preparatu enzymatycznego. Zawiesina komórek po hodowli poddawana jest dezintegracji w młynie kulkowym. W celu uzyskania pełnego uwolnienia izomerazy glukozowej ze ścian komórkowych stosuje się dodatek enzymów litycznych.
immobilUacja
osad
osad
przesqcz
Rys. 17.3. Otrzymywanie oczyszczonego preparatu izomerazy glukozowej
Zawiesina z młyna jest wirowana, klarowny roztwór poddawany jest dalszej obróbce. W pierwszej kolejności występuje wytrącanie balastów za pomocą acetonu. W kolejnym etapie następuje wytrącenie frakcji aktywnych białek za pomocą siarczanu amonu. Osad jest rozpuszczany w wodzie i kierowany do kolumny wypełnionej Sephadexem G25. W kolejnym etapie roztwór poddawany jest oczyszczeniu przez filtrację żelową na Sephadex G200. W całym procesie wydzielania i oczyszczania uzyskuje się 14-krotne zatężenie enzymu, zaś wydajność wynosi ok. 35%.
Spośród kilku tysięcy znanych enzymów, jedynie część jest produkowana na skalę przemysłową i szerzej używana.
Główne enzymy i ich charakterystykę zestawiono w tablicy 17.3.
Tablica 17.3
Główne enzymy produkowane na skalę przemysłową
Enzym |
Mikroorganizmy |
pH |
t °C |
Proteazy bakteryjne |
Bacillus tichcnifortnis Bacillus ainyloliąucfacicns |
8-11 |
80 |
Proteazy grzybowe |
Mucor pusillus, M. miehei Aspergillus oryzae, A. niger |
4-6 |
60 |
Amylazy bakteryjne |
Bacillus Ucheni/onnis Bacillus aniyloi iąucfactens |
5-7 |
110 |
Amylazy grzybowe |
Aspergillus niger, A. oryzae |
4-5 |
60 |
Glukoamylazy |
Aspergillus, Rhizopus. Endomyces |
4-5 |
60 |
Izomcraza glukozowa |
Streptomyces olivaceus, S. wedmorenis, S. albus, S. phaeochromogenes. Bacillus coagulans, Arthrobactcr |
6.5-8,5 |
90 |
Peklynazy |
Aspergillus niger. A. went ii |
4-5 |
50 |
Lipazy |
Aspergillus. Rhizopus, Mucor |
5-7 |
40 |
Oksydaza glukozowa |
Penicillium |
5-7 |
40 |
Kataiaza |
Aspergillus, Microccocus lysodeiklicus |
7 |
40 |
Inwertaza |
Saccharomyccs |
4,5 |
60 |
Zasadowe proteazy bakteryjne mają obecnie największy, pod względem masowym, udział w produkcji enzymów. W przeważającej ilości są zużywane