CCF20091110000

zapaleniu wątroby, marskości żółciowej wątroby, chorobach trzustki, otyłości, ciąży, stosowanie leków (beta-blokery, kortykosteroidy, androgeny, preparaty antykoncepcyjne). Spadek stężenia cholesterolu wywołują: ostre zapalenie wątroby, nadczynność tarczycy, ostre infekcje, głodzenie, posocznica, niedokrwistość, niedobór apolipoproteiny.

Obecnie w analizach składników lipidowych surowicy krwi zmierza się, by oznaczyć je bezpośrednio bez izolacji i oczyszczania. Do praktyki laboratoryjnej wprowadza się czułe metody enzymatyczne oznaczenia cholesterolu całkowitego, cholesterolu związanego z lipoproteinami oraz triacylogliceroli.

Materiały i metody

Zasada metody

Podstawą metody ilościowego oznaczania cholesterolu jest jego enzymatyczna hydroliza i utlenienie. W pierwszym etapie przeprowadza się hydrolizę katalizowaną przez esterazę cholesterolową (CHE) [1]. Uwolniony cholesterol zostaje utleniony przez oksydazę cholesterolową (CHO) do cholest-4-en-3-onu [2], a ilość uwolnionego w tej reakcji H2O2 oznacza się z udziałem peroksydazy (POD) [3], W obecności 4-aminoantytypiryny i fenolu tworzy się czerwono zabarwiona pochodna - chinonoimina [4-(p-benzochinomonoimino)-fenazon]. Natężenie barwy tego produktu reakcji jest wprost proporcjonalne do stężenia cholesterolu.

-i-fp-benzucf.;.',. mcmonoiminc Jfenazon

2