CCF20150312005 (2)

3. interferujący RNA (siRNA, smali interfering RNA) - małe cząsteczki dwuniciowego RNA (20-25 nt), które powodują wyciszanie ekspresji genów o homologicznej sekwencji (interferencja RNA, RNAi - RNA interference). Działanie przez:

•    indukcję degradacji mRNA

•    blokowanie translacji

X

3. Korekta wadliwego genu

Naprawa mutacji o charakterze trwałym Wykorzystuje:

•    enzymy naprawiające błędne sparowania (mismatch repair)

•    enzymy wycinające nukleotydy (excision repair)

•    enzymy biorące udział w rekombinacji homologicznej

Przykład:

fragmenty DNA (400-800 pz) zawierające sekwencję homologiczną do naprawianego genu oraz prawidłową sekwencję do podstawienia (homologiczne podstawianie małych fragmentów, smali fragment homologous replacement- SFHR);

metoda SFHR w konwersji (3-globiny sierpowatej do prawidłowej w krwiotwórczych komórkach macierzystych]

4. Celowano eliminacja komórek

Precyzyjne zabijanie komórek zainfekowanych wirusem lub komórek nowotworowych

Dla nowotworów:

1.    eliminacja bezpośrednia

a.    wprowadzenie do komórek genu kodującego toksyczne białko (pod kontrolą promotora specyficznego dla nowotworów)

b.    stosowanie genów samobójczych - przekształcających podawany systemowo prolek do toksycznego leku (np. deaminaza cytozynowa z E. coli przekształca 5-fluorocytozynę do 5-fluorouracylu; kinaza tymidynowa HSV -fosforyluje gancyklowir

c.    radiouczulanie - deaminaza cytozynowa

d.    geny proapoptotyczne - indukujące apoptozę (kaspazy, Bax)

2,    eliminacja pośrednia

a.    przez aktywację odpowiedzi immunologicznej

b.    hamowanie angiogenezy