Obraz0

Cel i zakres ćwiczę?.?a

Celem ćwiczenia jest porównanie dwóch metod oznaczania biomasy drożdży Saccharomyces cerevisiae hodowanych w pożywce płynnej i wyznaczenie zakresu pomiarowego dla metody turbidymetrycznej.

Dodatkowo należy oznaczyć żywotność drożdży (procentowa zawartość żywych i martwych komórek drożdży po barwieniu błękitem metylenowym)

Odczynniki i sprzęt:

1.    Zawiesina hodowlana drożdży do analizy

2.    1 % Zawiesina drożdży w 40% glicerolu (1,0 g/ 100 ml)

3.    40 % roztwór glicerolu

4.    0,1% roztwór błękitu metylenowego

5.    wirówka ( 5000 obr/min lub wyżej)

6.    probówid wirówkowe (np. Falcon 15 ml)

7.    w^aga szalkowa półanalityczna (dokładność 1,0 mg)

8.    probówki szklane, 10-15 ml

9.    pipety automatyczne 1,0 ml i 5,0 ml

10.    zlewid 100 ml

11.    kolba lub cylinder miarowy na 100 ml

Metoda wagowa:

Do 2 sur hycli, wyparowanych probówek wirówkowych napipetować po 10 ml zawiesiny drożdży (1 ).

Odwirować zawiesiny (30 min. x 5000 obr / min ).

Ostrożnie zlać supematant, drożdże ponownie zawiesić w^r 10 ml wody destylowanej odwirować jak poprzednio.

Zlać supematant, ostrożnie osuszyć ścianki probóek bibułą i zważyć próbki Z różnicy obliczyć zaw⁷artość mokrej masy i przeliczyć na 1 ml hodowli.

(podać wynik średni z 2 pomiarów)