skanuj0006

OH

GENTAMICINI SULFAS GENTAMYCYNY SIARCZAN

Gentamicin sulphate, Gentamicine (sulfate de)

Substancja jest mieszaniną siarczanów gentamycyn Ct, C₂, C„ i C*.

Nazwa chemiczna: C_t: Siarczan 0-2-aixiino-6-C-metylo-6--(metyloamino)-2,3,4,6-tetradeoksy-a-D--ejyfro-heksopiranozylo-C 1 —»4)-0-[3-deo-ksy-4-C-metylo-3-(metyloamino)-Jff-L.--arabinopiranozy lo-( 1 —»6)-2-deoksy-D--streptaminy

C^: Siarczan 0-2,6-diamino-6-C-metylo--2,3,4,6-tetradeoksy- a-D-erytro-hekso-piranozylo-( 1 —*4)-0-[3-deoksy-4-C-me-tylo-3-(metyloamino)-^-L-arabinopirano-zylo-(l—»6)]-2-deoksy-D-streptaminy Ci_a: Siarczan 0-2,6-diamino-2,3,4,6--tetradeoksy-a-D-eryrro-heksopiranozylo--(1 —»4)-0-[3-deoksy-4-C-metylo-3-(me-. tyioaminoj-jS-L-arabinopiranozylo--(1 —»6)]-2-deoksy-D-streptaminy

, x H2S0₄

Gentamycyna	R
	ch3
Ci	H3C-HN-C-H
	ch3
C2	H2N—C—H I i
ClA	ch2nh2

Zawartość gentamycyn, w przeliczeniu na bezwodną substancję, nie powinna być mniejsza niż S90 jig/mg.

Postać I właściwości. Biały lub prawie biały, higroskopijny proszek.

Rozpuszczalność. Substancja łatwo rozpuszcza się w wodzie, praktycznie nie rozpuszcza się w eterze etylowym OD i etanolu (760 g/i) OD.

pH roztworu substancji o stężeniu 40 mg/ml od 3,5 do 5,5 (str. 58').

Skręcalność właściwa |§§J| od +107° do +121° (roztwór 10 mg/ml w wodzie) (str. 59^{1 2 3}).

Tożsamość

1.    Badanie metodą chromatografii cienkowarstwowej (sir. 72^u)

Faza nieruchoma: żel krzemionkowy G OD

Faza ruchoma: metanol OD - chloroform OD - wodorotlenek amonowy (227 g/1) OD (1:1:1); składniki wymieszać, po rozdzieleniu się warstw użyć warstwy dolnej.

Nanieść po 10 pl roztworów w wodzie o stężeniach 10 mg/ml: substancji (roztwór A) i substancji porównawczej siarczanu gentamycyny OD (roztwór B).

Chromatogram wysuszyć w temp. pokojowej, spryskać etanolowym roztworem ninhydryny (10 g/1) OD i ogrzewać 5 min w temp. 110°C. Położenie trzech plam głównych na chromato-gramie roztworów A i B powinno być zgodne.

2.    Badanie wykonać metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej wg „Zawartość” p. 2; czasy retencji pików głównych na chromatogramach roztworów A i B powinny być zgodne.

3. Substancja wykazuje reakcję (1) na siarczany (str. 37ⁿ). Czystość

1.    Wody nie więcej niż 15,0%; do wykonania oznaczenia odczynnikiem K. Fischera OD użyć ok. 0,15 g substancji (str. 47").

2.    Popiołu siarczanowego nie więcej niż 1,0% (str. 39“).

3.    Metanolu nie więcej niż 1,0%; wykonać badanie metodą chromatografii gazowej (str. 66').

Aparatura

Chromatograf gazowy z detektorem płomieniowo-jonizacyj-nym

Kolumna dł. 2,1 m, średnicy wewnętrznej 4 mm Wypełnienie kolumny: WK 5 (str. 106Izabela 68) Temperatura: termostatu kolumny 156°C, detektora 200°C, komory nastrzykowej 200°C

Szybkość przepływu azotu 30 ml-50 ml/min Roztwory

Strona 5 z 8

1

a)    rozpuścić 10 g substancji w wodzie i uzupełnić do

10.0    ml (roztwór A); rozpuścić 10 g substancji w roztworze C i uzupełnić nim do 10,0 ml (roztwór Aj)

b)    uzupełnić 0,1 ml metanolu OD roztworem C do 10,0 ml (roztwór B)

c)    uzupełnić 1,0 ml propan-l-olu OD wodą do 25,0 ml (roztwór C — wzorzec wewnętrzny).

Wykonanie oznaczenia

Wprowadzić kolejno na kolumnę po 1 pi roztworów A, A, i B, i zarejestrować chromatogramy. Z wielkości pików obliczyć procentową zawartość metanolu (CH₄0), przyjmując jego gęstość d₂o = 0,700 g/ml.

Zawartość

2

   Zawartość gentamycyn nie powinna być mniejsza niż 501 pg/mg; oznaczenie metodą cylinderkowo-płytkową wykonać wg monografii „Oznaczanie aktywności antybiotyków metodami mikrobiologicznymi” (str. 131ⁿ).

3

   Wykonać badanie metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (str. 69^u), posługując się chromatografem z detekcją przy 330 nm i kolumną o wymiarach zbliżonych do 100 mm x 5 mm.

Wypełnienie kolumnjr-WK 1 (str. 1061, tabela 68)

Faza ruchoma: rozpuścić 0,5 g heptanosulfonianu sodu OD w 100 ml mieszaniny (14:5:1) metanol OD - woda - kwas octowy (1,05 kg/1) OD Szybkość przepływu 1,5 ml/min Roztwory

a)    roztwór substancji w wodzie o Stężeniu 0,65 mg/ml; do

10.0    ml tego roztworu dodać 5 ml propan-2-olu OD i 4 ml roztworu aldehydu o-ftalowego OD, wymieszać i uzupełnić propan-2-olem OD do 25,0 ml. Następnie ogrzewać 15 min w łaźni wodnej w temp. 60°C (roztwór A)

b)    roztwór substancji porównawczej siarczanu gentamycyny OD w wodzie o stężeniu 0,65 mg/ml; do 10,0 ml roztworu dodać 5 ml propan-2-olu OD, 4 ml roztworu aldehydu o-ftalowego OD, wymieszać i uzupełnić propan-2-olem OD do

25.0    ml. Następnie ogrzewać 15 min w łaźni wodnej w temp. 60°C (roztwór B).

Sprawdzenie układu chromatograficznego Wprowadzić na kolumnę 10 pi roztworu B. Współczynnik rozdzielczości pomiędzy dwoma pikami gentamycyny i C₂ powinien być nie mniejszy niż 1,25.