img011 (47)

Oznaczanie Zn w materiale biologicznym metodą płomieniowej, atomowej spektrofotometrii absorbcyjnej (ASA)

A.    Oznaczanie Zn w wątrobie szczura

Mineralizacja tkanki

Odważyć po około 0,5 g wątroby szczura i umieścić w probówkach do spalań. Następnie dodać 2,5 cm^J HNO3 stężonego i pozostawić na noc. Następnego dnia ogrzewać powoli w piecu do spalania do temp. 150°C i pozostawić ją w tej temperaturze na 2-3 godz. Następnie dodać do probówek 0,1 cm³ H2SO4 stężonego, zamieszać, dodać 0,5 cm^J HCIO4 zamieszać i ogrzewać do temp. 180°C (2 godz.), następnie w 250°C (2 godz.) i w 300°C (3 godz.) aż do otrzymania około 0,2 cm bezbarwnego, przeźroczystego roztworu. Czas mineralizacji około 10 - 15 godz. Otrzymany roztwór rozcieńczyć do 50 cm³ wodą destylowaną w kolbach kańbrowanycń. Tak przygotowane próby są gotowe do pomiaru metodą ASA.

Równolegle z próbami badanymi należy przygotować 3 próby „ślepe” z samych kwasów, które przechodzą całą procedurę mineralizacji. Zmirieraiizowane próby „ślepe” należy rozcieńczyć analogicznie jak próby badane (rozcieńczone wodą do 50 cm^J).

B.    Oznaczenie Zn w moczu (metodą addycyjną)

W przypadku bezpośredniego oznaczenia metalu w moczu różnica w składzie i stężeniu normalnych składników moczu uniemożliwia przygotowanie standardu identycznie jak w próbie badanej. W związku z tym stosuje się w takich przypadkach metodę addycyjną. Próbę badaną dzieli się na 3 lub 4 części i dodaje do wszystkich oprócz jednej różne znane ilości oznaczanego pierwiastka, stężenie odczytuje się z wykresu.

Postępowanie

Do 4 probówek odmierzyć po 10 ml moczu. Doprowadzić do pH 2 przy pomocy 3 N HC1 (2 krople). Następnie dodać wzorca Zn o stężeniu 1 pg/ml w ilościach: 0,0; 3; 6; 12 ml i uzupełnić H2O do końcowej objętości 25 ml. W ten sposób uzyskuje się następujące stężenie

dodanego Zn w kolejnych próbach:.......................mg/1. Dokonać rejestracji absorbancji.

W przypadku, gdy stężenie Zn w moczu przekracza wartość 1,3 mg/1 mocz należy odpowiednio rozcieńczyć.