mikroskop fluorescencyjny010

O Włączyć w bieg promieni filtiy wzbudzające wg rozdziału 2 pkt. 2 opisu.

g) Wyłączyć filtr szary NG10.

2. OBSERWACJA W CIEMNYM POLU „NF" I „UF" (rys. 6)

W dysku rewolwerowym znajdują się cztery przysłony ciemnego pola.

a)    Ustawić dysk rewolwerowy kondensora na cyfrę „0”.

b)    Kuchem „makro" a następnie „mikro” uzyskać ostro widzialny obraz preparatu.

c)    Obrotem dźwigni b przymknąć przysłonę pola. a następnie obracając pokrętkąitf przesunąć kondensor do położenia, przy którym widoczny jest ostro w polu widzenia obraz brzegów przysłony pola. W przypadku kiedy obraz położony jest ntccentralnie w polu widzenia należy wprowadzić go na środek pokręcając pokrętkami 1J.

d)    Otworzyć przysłonę pol3 tak, aby brzegi jej odsłaniały pole widzenia. Dalsze jej otwieranie jest nic wskazane.

ei Ustawić dysk rewolwerowy kondensora w położeniu odpowiadającym włączonemu obiektywowi. Np. stosując obiektyw o powiększeniu 20x dysk rewolwerowy kondensora należy tak ustawić, aby naprzeciw wskaźnika znajdującego się na obwodzie korpusu kondensora znajdowała się liczba 20.

f)    Dźwignią 5 ustawić kolektor tak, aby uzyskać optymalne oświetlenie preparatu.

g)    Za pomocą pokrętek centrujących 4 (rys. 3) ustawić ccntrycznie przysłonę ciemnego pola W. Przy centralnym ustawieniu przysłony tło pola widzenia powinno być oświetlone równomiernie, bez bocznych rozjaśnień.

h)    Po założeniu badanego preparatu fluoryzującego i włączeniu odpowiednich filtrów wzbudzających (rozdz. 2. pkt. 2). należy wyłączyć filtr szary NGIO i ewentualnie skorygować ustawienie układu oświetlającego przez:

-    przesuw kolektora i lustra w celu uzyskania maksymalnej fluorescencji preparatu;

obrót dźwigni przysłony pola w celu dopasowania obrazu przysłony do wielkości pola widzenia;

-    przesuw kondensora pokrętkami // w celu zlikwidowania ewentualnej mccentryczności strumienia świetlnego w stosunku do przysłon ciemnego pola.

Uwaga:

Przy metodzie immunofluorescencyjnego wykrywania krętków kiły zaleca się stosowanie obiektywu 40x z okularem OKI OH i z przysłoną ciemnego pola oznaczoną liczbą 100.

3. OBSERWACJA W KONTRAŚCIE FAZOWYM

W dysku rewolwerowym kondensora umieszcza się interferencyjne przysłony pierścieniowe 17 (rys. 4), a do rewolweru obiektywowego wkręca się obiektywy fazowe.

Wariant I - kontrast fazowy z lampy fluorescencyjnej (rys. 6)

a)    ustawić układ oświetleniowy lampy fluorescencyjnej z mikroskopem do obserwacji w jasnym polu według punktu 1;

b)    ustawić dysk rewolwerowy kondensora w położeniu odpowiadającym włączonemu obiektywowi;

c)    wyjąć okular z tubusa nasadki i na jego miejsce wsunąć mikroskop pomocniczy SI (rys. 7);

d)    przesunąć okular mikroskopu pomocniczego tak, aby zobaczy ć ostro ciemny pierścień fazowy obiektywu i trochę mniejszy jasny obraz pierścieniowej przysłony kondensora;

c) za pomocą pokrętek centrujących 4 (rys. 3) ustawić oba pierścienic koncentrycznie względem siebie;

0 przeprowadzić ewentualne zmiany korekcyjne;

-    przesuwem dźwigni kolektora 5 odwzorować obraz piamki świecącej palnika na obrazie przysłony pierścieniowej kondensora;

-    obrotem dźwigni 6 dopasować obraz przy słony pola do wielkości pola widzenia mikroskopu:

g) wyjąć mikroskop pomocniczy z tubusa nasadki okularowej i ponownie włożyć okular.

Wariant II - kontrast fazowy uzyskany z lampy niskowoltowej oświetlacza mikroskopu N1B30 plus fluorescencja „NF” z lampy rtęciowej (rys. 7).

Do lampy fluorescencyjnej podłącza się głowicę z lustrem częściowo przezroczystym (rys. 4j. W celu doprowadzenia układu do poprawnego ustawienia należy;

aj przesunąć lustro dźwignią IS do pozycji, w której będzie wyłączone z biegu promieni oświetlacza mikroskopu MB30, b) obracając pokrętką ruchu „makro" a następnie „mikro” uzyskać ostry obraz preparatu.

21