go odbywa się przez wyłączenie filtrów wzbudzających 6 i włączenie w bieg promieni świetlnych lampy rtęciowĄjjlUu-mtorfctencyjnego^zielonego 12. Wymieniając zwierciadło całkowicie odbijające 7 na zwierciadło częściowo przezroczyste U można równocześnie przeprowadzać obserwację obrazu fluorescencyjnego i fazowo kontrastowego, przy czym ten ostami tworzony jest przez światło zwykłego oświetlacza żarowego Os, znajdującego się w podstawie mikroskopu MB30.
Rozdział 2
RODZAJE ORAZ METODY MIKROSKOPII FLUORESCENCYJNEJ 1. RODZAJE MIKROSKOPII FLUORESCENCYJNEJ
Fluoresccncj3 może być wzbudzona w świetle niebiesko -fioletowym (oznaczona .,NF") lub promieniami ultrafioletowymi (oznaczona „UF”).
W przypadku fluoicscencji „NF" stosuje się światło wzbudzające o długości tali około 405--435 nm a w przypadku fluorcscencji „UF” promieniowanie o długości fali ~365 nm. Te długości fal świetlnych są silnie emitowane przez wysokociśnieniowy palnik rtęciowy HBO 50.
Praktycznie, powyższe rodzaje mikroskopii fluorescencyjnej uzyskujemy przez włączenie w bieg promieni światła z lampy rtęciowej odpowiednich filtrów wzbudzających 6 a w bieg promieni światła fluorescencyjnego odpowiednich filtrów zaporowych 15.
Filtry' wzbudzające mają za zadanie przepuścić promienie świetlne o określonej długości fali na preparat.
Dla mikroskopii fluorescencyjnej ..NF” są stosowane jako podstawowe następujące filtry: GC 13/2 mm, BG 12/2 mo. BG 12/2*5 mm a dla mikroskopii fluorescencyjnej „UF” UG 1/1.5 mm. UG 1/3.5 mm BG12/2 mm Powyższe filtry są umieszczone w oprawkach w korpusie lampy LF50 w sposób umożliwiający szybkie ich przełączenie i przechodzenie od fluorescer.oi „NF” do „UF" i na odwrót.
Numery gniazd oprawek z odpowiadającymi im filtrami podano w tablicy 1.
Tablica 1 rozmieszczenie filtrów
Numer gniazda |
FUtr | |
rodzaj |
grubość | |
1 |
BG12 |
2 |
2 |
546 mm |
interferencyjny |
3 |
BG12 |
2.5 |
4 |
UG1 |
3.5 |
5 |
GG13 |
2 |
6 |
UG1 |
1.5 |
7 |
BG19 |
2 (cieplny) |
S |
NG10 |
t.o |
Filtry zaporowe maja za zadanie odfiltrowanie światła wzbudzającego z obrazu mikroskopowego.
Dla mikroskopii fluorescencyjnej „NF" stosuje się filtry GG9/1 mm * OGI/1 mm a dla mikroskopii fluorescencyjnej „UF” - filtr GG9/1 mm.
2. MI.TODY MIKROSKOPII FLUORESCENCYJNEJ
Za pomocą urządzenia UFL1 można przeprowadzać badania następującymi metodami:
1. flnorescencja NF i UF. oświetlenie typu .jasne pole"
2. fluorescencja NF i UF. oświetlenie typu „ciemne pole"
3. fluorescencja NF. oświetlenie typu .jasne pole”, w sprzężeniu z kontrastem fazowym.
Jasne pole ..NF" w świetle niebiesko-fioletowym uzyskuje się przez ustawienie układu oświetleniowego według zasady Kohlera, włączenie, w bieg promieni świetlnych filtrów wzbudzających GG13/2 mm (lub) UG 12/2.5 mm * BG 12/2 mm. ustawienie dysku rewolwerowego kondensora na „O" i nałożenie w nasadce okularowej filtru zaporowego GG9/1 mm + OG1/1 mm.