29477 IMG081 (3)

ćwiczenie 3. SPRAWDZANIE JEDNORODNOŚCI LEUKOCYTÓW BARWIENIA metodą may-grunwalda giemsy

Materiały

1.    metanol

2.    odczynnik May-Grunwalda (1:10 w buforze fosforanowym)

3.    odczynnik Giemsy (1:10 w buforze fosforanowym)

4.    zawiesina leukocytów

5.    bufor fosforanowy

Wykonanie

•    Na szkiełku podstawowym wykonać rozmaz leukocytów, wysuszyć

•    Dobrze wysuszony preparat utrwalić przez 20 minut w czystym metanolu

•    Zalać preparat na 5 minut roztworem May-Grunwalda, po tym czasie zlać barwnik, nie płukać wodą

•    Zalać preparat na 15 minut roztworem Giemsy, zlać barwnik, preparat spłukać wodą bieżącą

•    zalać preparat buforem fosforanowym na 5 minut, zlać bufor

•    preparaty wysuszyć w temperaturze pokojowej

•    oglądać preparaty pod mikroskopem

Dokonać charakterystyki oglądanych pod mikroskopem leukocytów

Jądra komórek barwią się na fioletowo - młodsze postacie rozwojowe na jasnofioletowo, a formy dojrzalsze na ciemnofioletowo. Cytoplazma komórek barwi się różnorodnie, w zależności od rodzaju i dojrzałości komórek

Cytoplazma zasadochłonna (bazofile) barwi się barwnikiem zasadowym na różne odcienie niebieskiego (limfocyty, monocyty, plazmocyty, prekursory krwinek czerwonych i granulocytów)

Cytoplazma kwasochłonna barwi się barwnikiem kwaśnym (eozyna) na różne odcienie barwy róźowoczenwonej (dojrzałe formy erytroblastów, krwinek czerwonych,

granulocytów)    -

Cytoplazma polichromatofilna barwi się jednocześnie barwnikiem zasadowym j kwaśnym na różne odcienie fioletu. Barwy te występują w pośrednich postaciach rozwojowych krwinek czerwonych i ich prekursorów oraz plazmocytach, dzielą się następująco:

✓ ziarnistości azurochłonne - barwią się ażurem na różne odcienie fioletu (od grantu do czerwieni)

/ swoiste ziarnistości kwasochłonne (w eozynocytach - kolor żółtobrunatny)

■/ swoiste ziarnistości zasadochłonne (w bazocytach - odcienie ciemnego fioletu z poświatą czerwoną)