11156 zadanka (2)

Przykłady prostych zadań z enzymologii y/\. 25

25 mikrolitrów surowicy inkubowano przez 5-minut w optymalnych warunkach z nadmiarem substratu. Po    .twierdzono obecność 5,5 inikromola produktu

cm j

oznaczanego enzymu. Oblicz vzgiędnes^etne ęnżyrau;( aktywność ) w i.U/ —³ nkat/cm³ surowicy.    ■ '

2. W wyniku j60 «damdo ' ^^^acjl °’⁵K^C^Surowicy, o sl^ćmu-białka 7,6%, w optymalnych warunkach z nadmiarem substratu, otrzymano 0,06 milimola produktu działania badanego enzymu znajdującego się w surowicy. Óblic^aktywność właściwą tego enzymu.    • -yńy    -y'. .

/ 3. Wyciąg tkankowy zawiera 180 mg% białka. 250 mikrolitrów tego .wyciągu inkubowano z subsiratem w optymalnych warunkach przez S minut. Stwierdzono powstanie 0 6 tr.ikromola produktu oznaczanego enzymu. Oblięz ak^wr.ośc Właściwa tego en?vmu w wyciągu i podaj ją"'I.U i nkat.    ";■* - .    ^:    V i:'

enzymu w nkat/ g tkanki.

. 2 2.5 rag tkanki uzyskano 500 mikrolitrów houwgenatur Do oznaczenia aktywności enzymu pobrano 25 mikrolitrów homogenatu i po 10 minutowej inkubacji z odpowiednim substratem stwierdzono powstanie 0,4 mikromola produktu. Oblicz aktywność badane ■

/5. Do 100 mikrolitrów surowicy dodano 900.mikrolitrów roztworu PBS. Daoznaczenia aktywności enzymu pobrano 200 mikrolitrów' rozcieńczonej surowicy, dodano 800 mikrolitrów substraiu i po 25 minutowej inkubacji reakcję przerwano^dodatideni 2 cm³ 6% roztworu TCA. Po odwirowaniu denamrowanego białka^doJ'ożnączenja ilości powstaiseo produktu pobrano 500 mikrolitrów supematantu i stwierdzono powstanie 300 mg produktu o m.c2. 600 Da. Oblicz aktywność enzymu w surowicy,(.względne stężenie) w I.U/cm*

' 6. Do 0.2 cm³, surowicy o zawmtośpi'białka; 6,6%;^    substratu w

buforze i inkubowano przez 10 min. Naśt^me'Jeakcj^pg,eTO^q':dQd^em~ 1,5 cm' 6%

. roztworu .TCA i zdenatyrowane białko.ocwiroWaiid, Do ozaaćzęnią;.^    2C9

. mikrolitrów supematantu i stwierdzono obecność,Gblicź względiu stężenie enzymu { aktywność ) w 'suro wicy-' wi;U/cir:r i uloywpbść wivJ_:ci wą. w nkat.

■

.7• Z .5 krotnie rozcieńczonej

maltazovvej fcnzymti aifa-gluko?yS^>fp'bbranó.:;^    roztworu

maltozy w buforze * »Tiin<>tAVi«»i inTnmorii^fwi^rftTrłm TiowsitentetiS/mzRlukozy (ra.cz.

180 Da). Oblicz

S. Jakie jest stężenie

aktywności .właściwej 2,5 fZ/mg £

• ■"'* uctohrróyotęgo preparatu, o

_aJi§■

Ir

$

i8C,mg:^;.inkubąwanaw

■wir'