biochermia zadnia

łY/ykkldy zitdań /. enzymologii

^A Ł5£    t ^u^'"“ z *■"■?^c*    —»

, J°T f ^f 7    ^{15 n,}"^,u'- Po przerwaniu reakcji cuzymatyc/ncj stwierdzono powstanie ">0

It rri ' ^f7^0<,Uk'^U. °^{NiC/ ak5> WT}"^{>Si Cn7>mU} < ^kkdnc Mierne cn/vmu)'« crnNuf »" ^k ^ ^{W Kdn}°^SlUch n«*k)™rodowych < U? > i nanokatatoch < nkat),« ł

3, Ml < mikrolitów )preparatu enzymu ozawartości białka 180mg% inkubowano w optymalnych warunkach z substratem przez 10 minut. Po przerwaniu reakcji stwierdzono powstanie 120 pmoli produktu Oblicz aktywność właściwą enzymu w preparacie Wynik podaj w IU i nkut.    '

i -<> pi materiału biologicznego inkubowano z 180 pl roztworu substratu w odpowiednim tutorze. w opty malnych warunkach. Po 10 minutach przerwano reakcje przez dodanie 600 pl o-o roztworu TCA i wytrącone białko odwirowano. Do analizy pobrano 300 pl superuatantu (nndsąezu)w którym stwierdzono obecność 8 pmoli produktu < )blicz aktywność enzymu w materiale biologicznym, wy nik podaj w IU i nkat w I cm¹ materiału

lą i¹' jil materiału biologicznego inkubowano w naczynku pomiarowym z 1000 pl substrutu w odpowiednim buforze ogrzanym do temp 30° C. Wykonano pomiary absorbuncji w czasie 0 min A - 0.010. po 30 sck. A 0.160. po 60 sck. A - 0.310. po 90 sck. A 0.460 i po 120 **;. ■' ^.608. Wiedząc, że przyrost absorbancji na I minutę 0,0025 odpowiada 1 milijednostec międzynarodowej ( I mlU ), oblicz aktywność enzymu w I cm' materiału biologicznego.

S~ I >0 pl roztworu enzymu o stężeniu białka 450 mg% inkubowano 360 sekund z substratem w optymalnych warunkach. Stwierdzono powstanie 30 pmoli produktu. Oblicz aktywność -- molekularną enzymu wiedząc, że je co masa cząsteczkowa w \ nosi 67.5 ŁP i_. .

6 15 cnr’ preparatu glukozydazy o stężeniu białka 600 mg% i aktywności właściwej 12 jednostek międzynarodowych, działa na skrobię uwalniając glukozę < m.cz 180 ).

Ile mg glukozy uwolni ta ilość enzymu w ciągu 20 minut działając w optymalnych warunkach.

Ile minut należy inkubować roztwór zawierający 3 g substratu o m.cz. 500 w odpowiednim buforze z 4 cnr roztworu enzymu o stężeniu 200 mg% białka i aktywności właściwej 10 IU. aby zostało rozłożone 10 % substratu?

$ W wyniku inkubacji 100 pl materiału biologicznego zawierającego enzym fosfatazę, przez 10 minut w warunkach optymalnych, z substratem będącym odpowiednim estrem fosforanowym, zostało uwolnione 4.8 mg HP0₄²‘. Oblicz, aktywność fosfatazy w ł cnr tego materiału biologicznego. Wynik podaj w IU i nkat. P=31,0 16.

^ Metodą biopsji pobrano 50 pg tkanki, którą homogenizowano z buforem otrzymując 250 pl wyciągu. 50 pl tego wyciągu inkubowano w optymalnych warunkach a substratem przez 900 sek. W tym czasie zawarty w wyciągu enzym uwolnił 0.75 pmola produktu. Oblicz aktywność enzymu w IU na 1 g tkanki.

|0 100 pl pięciokrotnie rozcieńczonej surowicy krwi o stężeniu białka 6.8 %. inkubowano 12 minut z substratem w optymalnych warunkach. Stwierdzono powstanie 4.5 pmola produktu Oblicz aktywność właściwą badanego enzymu w surowicy w IU i nkat.