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Detección de Ch/amydia psittaci en aves mascotas y de _M producción durante marżo de 2013 a marżo de 2014.

Detection of Chlamydia psittaci in pet and production birds during March 2013 to March 2014.

Jaymr A. Oiglia'-’. Mortwrlo Lose/¹ \ Maria Estola Cadand Nancy Arian . Cncilia Netn', M. Fkircrcia Unzaga', MkjupI Hnrrcro Loyola' Migucl V Piscopo'. MtguolA. Peinicccłli' 'Cm&a de Pa;olcgia de Aves >• Pititeros. Facultad de Cendas voierinartaa-UMLP Buenos Aires. Argenima 60 y 118 a/n    'SeraOo de BacMroogia CFnica-

Bacicnclogia INEI-ANLlS Dr. Carkjs G Mabran CABA. Argcnlma Av. Vólc7 Sarsliekj S63 ^aPraclica Pnvada

INTRODUCCIÓN: Las bactcrias doi gćncro Chlamyda, familia Chiamydiaccao, ordon CNamycMles, son dc miorcs módico vetehnano, zoonófico y omiiológico. Estas bactenas ostań presentes de manera latente en muchas especies de venebrados y pueden causar entermedad sistemlca climcamente ev.dente en mamiferos. aves. reptiles y antibios. Las clamtdias son de importancia para la saiud publica debido al na&to de mantener aves (principalmente psitócidos) como mascotas y representan un riesgo ocupaciona). espeoaimente para veterinarios. trabajadores de mataderos y plantas de procesamiento de mamiferos y aves de corral. personal de plantas de inaibación y cuidadores de awnalos La damidiosis producida por Chlamydia psittaci. es una de las enfennedades zoonóticas mas graves que pueden causar micmbros dc csta familia, debido a la inhaladón dc cuerpos clcmcniaics presentes en hcces y socrcooncs resptratorias dc avcs entermas, scan estas smtomaticas o no. En generał k>s casos en humanos se deben a la expos*ión frente a aves mascotas Intectadas. pnncipalmenie psitaddos. Los signos cllnicos lipteos en aves enfermas son conjuntivltis y descarga nasal mucopunKenta. <*arrea, pollurla. decaimiento y mała condioón corporal. En humanos los sfntomas en generał son similares a un cuadro de influenza, pero tambien pueden darse casos de neumonla severa. endocarditis y encefaMis. El objehvo de este trabajo es determmar la presencia de familia Chlamydiaceae y Chlamydia psittaa (Cp) en muestras de aves mascotas y de producción ublizando dos tecnicas de PCR en tempo reaJ.

MATERIAŁ ES Y METODOS: Se procesaron muestras ta>es como órganos obtenidos a partir de la necropsia (saco aóroo. pulmón. higado bazo), hisopados łdc oonjwmiya ocular coana ctoaca) y materia tccal, provenientcs dc cMcrcntcs espeoes de aves mascotas y de producción, eon o sin signologia clir*ca recibidas para diagnóstoo de clamidla en nuestro laboratono (FOTO 1 Y 2). Todas fueron reobrdas duranie el periodo comprenddo entre marżo det 2013 y marżo del 2014 (muestreo no probabilistico de casuisłica) desde distintos partidos dc ta provwvcia dc Buenos Aires y sólo una tuc cmnada desde la provinaa de Mendoza. La extracción de AON tue realizada eon Kit de exiraoclón en cotumnas de sllica marca OUagen. La caiidad del AON y ausencia de mhibrdores tue anali2ada por PCR mediante la ampliticación de un fragmento de 8eta actrna. Luego lodas fueron analizadas mediante una reaccwn en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiompo real (qPCR tamilia) espociftca para la familia Chlamióiaccac ibtanco motccular gen 23S rARN) y sondas Taqman A las muestras positivas. se les reakzo otrą tócmca opłimizada de PCR en t.empo real especifica para Cp (qPCR Cp> cuyo blanco a amp&ticar es el gen ompA y como revelador un intercalador de ADN como SYBR green i TABLA 1) Arnbas reacciones de qPCR se realizaron en un equipo IQ^,U5 MuHicotor Reat-Time PCR Detection System iBIO RAD Laboratories)

: ACCToxccm\*c rt mcioc

FAM CTCATCA7GCAAAAG0CA00CCG.rAA44A

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fOtutl    C«pCtMIVK 5 CTMIAtJUYTlA-MAK*;!    luW

Tabla 1

Foto 1

Foto 2

Orlico V oPC/Mami-a    Oślico J: qPCH Cp    O/tflco 3. Curv« <ł« MMltlfy)

ijPCflCP

lapccic	N	PosillYO ,1 (hLni)diiiw	Positiio a C. pslllaei	Nc^.in\«a ptifMd
.Inni^ocw ceuita (Loro habUdiirl	12	5	4	1
Gallus ęollus Kiallodomcstico)	>5	4	1	y
hfyiopsitto monaebus (Colona argcniina)	II	3	y	0
Cyfi/mftn fryiii {Palotna)	6	0	0	0
Ara cWuropCrra Kiujcairuyii rujol	i	1	0	1
CWinoAs cordinali* <Onl*rul ilr V~agitua i	i	0	0	0
Toul	56	13<ZJJ*>	S(i4a1%)	5

Tabla 2

RESULTADOS: Se procesaron 62 muestras de 7 especies cMerentes de aves: Se descartaron 6 muestras por el resultado negativo de Beta actina, ©Kas prowsnian dc 1 Ama/ons aestiva, 4 Coiumba Av« y 1 Agapom# sp . El detalle de las muestras y los resultados de las gPCR se observan en la TABLA 2. GRAFICO 1, 2 Y 3. Todas las positwas para Cp tueron tambien posibvas por qPCR farr- a. Ademas el 46.4 % (26'56) de las muestras corresponderon a aves eon signologia o tesionos macroscópicas compattoles eon clamidosis, dc las cualcs 5 lucron posit>vas a Cp y solo una por qPCR tamta. De fas aves s>n sagnos clincos 3 lueron positoas a Cp y 4 solo por qPCR familia.

DłSCUSIÓN: La qPCR ha sdo documeniada como un metodo eon alta sensib*dad. especificidad y rapidez para la devoluc‘ión del resultado En nuestro trabajo. los resultados conlirman la presenoa dc microorgan-smos dc la familia Chiamyd&ceae y de la especie C pstit.-Ki en aves que tienen estrecho coniacto eon humanos como son las que se maniienen como mascotas o aquellas utilizadas para producción {carne. huevos). En las cinco muestras en las que solamente obtuvimos resultado positrvo para tamilia, podemos suponer la presonc-a de otras cspccics Si bon sc conoce la reie\'anc>a de Cp como agente causal de ia damidiosis animal y humana en tos ultimos aftos diversos esłudlos han revelado tambión la presencia de otras espeoes de damidias (abortus, pecorum, muftdarum) y de las llamadas clamdras atipicas en diversas especies de aves {gallinas, palomas. loros. ibis) y aunque su patogenicidad no estó del todo clara el potenciai zoonótico no deberia ser dcscariado para aqudias personas quc viven cn contacto eon avos ■ftectadas. Seria muy Importante completar la busqueda de estas otras especaes eon la implementación de tecnicas moteculares que amplihquen regśones especificas dcl genoma de las nuevas especies

8iauOCA&FiA:

ljHarttrpzhaiJT Ciwnil. v»-rcr"pir/l).    irrecłtrc «iemKAiwiewwiti

emp^soo zoon&K ceflsłguwcei Uetocngiy l»crcbi&yjy. 209): l»:69-?r ZiParccr>cvA..Sma R 8a.ortcnp R . r,uU J SjnyseK.. >*fw real tmc PCR ^ ipccec jpccnc dpMooncł cnum>dPpA\M psr.Mc, crd    j£c<t\,s ppm ojłuo sjmproi. Tr»

V««rtiw> Jcuma. 2>:O0; 181: 14S-150

3) Sachsa K liWou E.. U.ic^sura U M.. Paspochl A. Loh£on&~0.. Raccrt da.tfoprams in ł-a Ubcrffócy dagrosćAOfchUirtpdiii .ilKlbnt '/ularaiy MKiol)Ctxj>. 2C09,135 2-21

7< SlKh-c K twd.c.M. K n>*gp K kVi<lr«f $    M . Oway H Wc^»-ijnn M . vv^» C

Vcr mcrc F Vcsr N . WpflnnoS . Ittbiw-Tuntro 6 Rupłljpi A 8avolP F Ropiold-lAśra R Maria M..    Uf Ihe ocsience o* t»o ntm mwnbd-c ol łm? lar-iy &lnriyax*x an3 płeposa*

<y Cf*wr,yr*j tp nov. and Crtan>tAa gaAwgg ap rov. SiWnalc and /ćc^ed V»:rc*c*w. 2014:37:79 88