ÿþA R C H . M E D . S D . K R Y M . , 2 0 0 8 , L V I I I , 3 2 - 3 6 P R A C E O R Y G I N A L N E
E w a K a p i Ds k a , Z o f i a S z c z e r k o w s k a
U s t a l e n i e t o |s a m o [c i n i e z n a n e j o s o b y w o p a r c i u o o k r e [l e n i e p r o f i l u
D N A z e k s h u m o w a n y c h s z c z t k ó w l u d z k i c h
P e r s o n a l i d e n t i f i c a t i o n o f a n u n k n o w n i n d i v i d u a l b a s e d o n d e t e r m i n a t i o n o f h i s
D N A p r o f i l e f r o m e x h u m e d r e m a i n s
K a t e d r a i Z a k Ba d M e d y c y n y S d o w e j A k a d e m i i M e d y c z n e j w G d a Ds k u
K i e r o w n i k K a t e d r y d r h a b . m e d . Z b i g n i e w J a n k o w s k i
C e l e m p r a c y b y Bo u s t a l e n i e t o |s a m o [c i n i e z n a n e g o e a c h i s o l a t e , y e t t h e D N A e x t r a c t i o n m e t h o d p r o p o s e d b y
m |c z y z n y , k t ó r e g o s z c z t k i e k s h u m o w a n o p o 4 l a t a c h T . K a l m á r e t a l . a l l o w e d f o r s i m p l e r a n d f a s t e r i s o l a t i o n o f
o d p o c h ó w k u . D o b a d a D g e n e t y c z n y c h z a b e z p i e c z o n o g e n e t i c m a t e r i a l . T h e s t a t i s t i c a l a n a l y s i s o f t h e o b t a i n e d
k o [ u d o w d e n a t a a m a t e r i a B p o r ó w n a w c z y s t a n o w i By r e s u l t s c o n f i r m e d t h e p a t e r n i t y o f t h e d e c e a s e d a n d
w y m a z y z j a m y u s t n e j p o b r a n e o d j e g o d o m n i e m a n y c h e s t a b l i s h e d h i s s o n a s h i s r i g h t f u l c h i l d ( P = 9 9 . 9 9 9 9 9 9 % ) ,
k r e w n y c h |o n y , s y n a i b r a t a . D N A z k o [c i w y i z o l o w a n o a l s o c o n f i r m i n g t h e c o n s a n g u i n i t y b e t w e e n t h e i n v e s t i g a t e d
d w i e m a m e t o d a m i : m e t o d f e n o l o w o - c h l o r o f o r m o w o r a z i n d i v i d u a l a n d h i s p u t a t i v e b r o t h e r ( P = 9 9 . 9 9 9 9 % ) .
a l t e r n a t y w n i e , z m o d y f i k o w a n t e c h n i k o p i s a n p r z e z
T . K a l m á r a i w s p . P o r ó w n a n o u z y s k a n e w y n i k i . M a t e r i a B S Bo w a k l u c z o w e : k o [ u d o w a , e k s h u m a c j a , i z o l a -
g e n e t y c z n y a m p l i f i k o w a n o p r z y u |y c i u k o m e r c y j n e g o z e s t a - c j a D N A , u s t a l e n i e t o |s a m o [c i
w u A m p F l S T R ® S E f i l e r "!. P e Bn y p r o f i l g e n e t y c z n y z m a r Be g o K e y w o r d s : f e m u r , e x h u m a t i o n , D N A e x t r a c t i o n ,
m |c z y z n y u z y s k a n o p r z y w y k o r z y s t a n i u D N A i z o l o w a n e g o p e r s o n a l i d e n t i f i c a t i o n
o b u t e c h n i k a m i , j e d n a k m e t o d a z a p r o p o n o w a n a p r z e z
K a l m a r a w p o r ó w n a n i u d o m e t o d y f e n o l o w o - c h l o r o f o r m o -
w e j u m o |l i w i Ba s z y b s z e i p r o s t s z e p o z y s k a n i e m a t e r i a Bu W S T P
g e n e t y c z n e g o . Z a s t o s o w a n a a n a l i z a s t a t y s t y c z n a p o t w i e r -
d z i Ba o j c o s t w o d e n a t a w s t o s u n k u d o b a d a n e g o d z i e c k a I d e n t y f i k a c j a g e n e t y c z n a o s ó b o n i e z n a n e j t o |-
( P = 9 9 , 9 9 9 9 9 9 % ) a t a k |e p o k r e w i e Ds t w o z d o m n i e m a n y m s a m o [c i t o j e d n o z p o d s t a w o w y c h b a d a D w y k o n y -
b r a t e m ( P = 9 9 , 9 9 9 9 % ) . w a n y c h w l a b o r a t o r i a c h g e n e t y c z n y c h Z a k Ba d ó w
M e d y c y n y S d o w e j . C z s t o , u j a w n i o n e w r ó |n y c h
T h e a i m o f t h e p r e s e n t i n v e s t i g a t i o n w a s p e r s o n a l o k o l i c z n o [c i a c h i m i e j s c a c h z w Bo k i l u d z k i e , p o d l e g a j
i d e n t i f i c a t i o n o f a n u n k n o w n m a n w h o s e r e m a i n s w e r e t a k g Bb o k i m z m i a n o m ( r o z k Ba d o w i , r o z f r a g m e n t o -
e x h u m e d f o u r y e a r s a f t e r b u r i a l . T h e f e m u r o f t h e d e c e a s e d w a n i u , z w g l e n i u l u b z e s z k i e l e t o w i e n i u ) , |e w i z u a l n a
w a s s e c u r e d f o r t h e g e n e t i c a n a l y s i s . T h e c o m p a r a t i v e i d e n t y f i k a c j a c i a Ba p r z e z n a j b l i |s z r o d z i n z m a r Be g o
m a t e r i a l i n c l u d e d b u c c a l s w a b s c o l l e c t e d f r o m t h e p u t a t i v e n i e j e s t m o |l i w a . W t e j s y t u a c j i , j e d y n y m s p o s o b e m
r e l a t i v e s o f t h e d e c e a s e d , i . e . t h e w i f e , s o n a n d b r o t h e r . n a u s t a l e n i e d a n y c h o s o b o w y c h d e n a t a s t a j e s i
G e n o m i c D N A w a s e x t r a c t e d f r o m t h e b o n e u s i n g t w o a n a l i z a g e n e t y c z n a o b e j m u j c a o k r e [l e n i e p r o f i l u
m e t h o d s : t r a d i t i o n a l i s o l a t i o n w i t h p h e n o l / c h l o r o f o r m a n d D N A n i e z n a n e j o s o b y i p o r ó w n a n i e g o z p r o f i l a m i
a s a a l t e r n a t i v e t e c h n i q u e , a s i m p l e a n d r a p i d m e t h o d g e n e t y c z n y m i j e g o d o m n i e m a n y c h k r e w n y c h .
d e s c r i b e d b y T . K a l m á r e t a l . T h e r e s u l t s w e r e t h e n W p r z e d s t a w i a n e j p r z e z n a s s p r a w i e z w Bo k i N N
c o m p a r e d . T h e s p e c i m e n s u n d e r w e n t D N A a m p l i f i c a t i o n m |c z y z n y u j a w n i o n e z o s t a By w c z e r w c u 2 0 0 1 r o k u .
u s i n g t h e A m p F l S T R ® S E f i l e r "! P C R A m p l i f i c a t i o n K i t . T h e Z n a j d o w a By s i o n e w s t a n i e z a a w a n s o w a n e g o r o z k Ba -
a u t h o r s o b t a i n e d a f u l l S T R p r o f i l e o f t h e u n k n o w n m a n f r o m d u , z c z [c i o w o z w g l o n y m i p o w Bo k a m i c i a Ba w s k u t e k
N r 1 T O {S A M O Z N N Z W AO K 3 3
d z i a Ba n i a o g n i a . P o p r z e p r o w a d z e n i u s e k c j i z w Bo k p r z y 1 4 t y s . o b r . / m i n . p r z e z 1 5 m i n . w 4 0 C , o s a d
i w o b e c b r a k u j a k i c h k o l w i e k d a n y c h , c o d o t o |s a - z a w i e s z o n o w 5 0 µ l b u f o r u T E p H 8 i i n k u b o w a n o
m o [c i d e n a t a , c i a Bo z m a r Be g o p o c h o w a n o n a c m e n - w t e m p e r a t u r z e 6 5 0 C p r z e z n o c .
t a r z u k o m u n a l n y m . P o k i l k u l a t a c h , d o P r o k u r a t u r y S t |e n i e D N A u z y s k a n e g o z k o [c i o k r e [l o n o
z g Bo s i By s i o s o b y t w i e r d z c e , |e N N m |c z y z n a f l u o r o m e t r y c z n i e z w y k o r z y s t a n i e m z e s t a w u P i c o
m o |e b y i c h k r e w n y m . W c e l u p o t w i e r d z e n i a t o |- G r e e n ® d s D N A Q u a n t i t a t i o n K i t [ 4 ] .
s a m o [c i z m a r Be g o , p o 4 l a t a c h o d u j a w n i e n i a z w Bo k , D N A z m a t e r i a Bu p o r ó w n a w c z e g o w y i z o l o w a n o
p r z e p r o w a d z o n o e k s h u m a c j j e g o s z c z t k ó w . D o p r z y u |y c i u z e s t a w u d o i z o l a c j i D N A z e [l a d ó w b i o l o -
b a d a D z a b e z p i e c z o n o k o [ u d o w d e n a t a a m a t e - g i c z n y c h S h e r l o c k A X f i r m y A & A B i o t e c h n o l o g y , a j e g o
r i a B p o r ó w n a w c z y s t a n o w i By w y m a z y z j a m y u s t n e j s t |e n i e o k r e [l o n o m e t o d s p e k t r o f o t o m e t r y c z n .
p o b r a n e o d j e g o d o m n i e m a n y c h k r e w n y c h b r a t a , U z y s k a n y m a t e r i a B g e n e t y c z n y p o d d a n o k o m p l e k -
|o n y i s y n a . s o w e j a m p l i f i k a c j i z z a s t o s o w a n i e m k o m e r c y j n e g o
z e s t a w u A m p F l S T R ® S E f i l e r "! ( A p p l i e d B i o s y s t e m s )
M A T E R I A A I M E T O D Y [ 5 ] . D o r e a k c j i P C R u |y t o 1 - 5 µ g D N A w y i z o l o w a n e g o
z k o [c i , k t ó r y a m p l i f i k o w a n o w o b j t o [c i 1 0 µ l m i e s z a -
F r a g m e n t k o [c i u d o w e j d e n a t a d o k Ba d n i e n i n y r e a k c y j n e j , p r z y 3 2 c y k l a c h . W a r u n k i t e m p e r a t u r y
o c z y s z c z o n o i z m i e l o n o . C z [ u z y s k a n e g o w w . r e a k c j i b y By z g o d n e z z a l e c e n i a m i p r o d u c e n t a .
p r o s z k u k o s t n e g o p o d d a n o n a w s t p i e p r o c e s o w i R e a k c j a m p l i f i k a c j i p r z e p r o w a d z o n o w t e r m o c y -
o d w a p n i a n i a ( 0 , 5 M E D T A ) [ 1 ] a d r u g , r ó w n o w a |- k l e r z e M a s t e r c y c l e r - G r a d i e n t ( E p p e n d o r f ) . P r o d u k t y
n i l o [, t r a w i o n o b e z p o [r e d n i o . D N A z k o [c i N N P C R r o z d z i e l o n o m e t o d e l e k t r o f o r e z y k a p i l a r n e j n a
m |c z y z n y i z o l o w a n o d w i e m a m e t o d a m i : m e t o d s e k w e n a t o r z e 3 1 3 0 f i r m y A p p l i e d B i o s y s t e m s . U z y -
k l a s y c z n f e n o l o w o - c h l o r o f o r m o w [ 2 ] o r a z p r o s t s k a n e w y n i k i p o d d a n o a n a l i z i e p r z y u |y c i u p r o g r a m u
m e t o d e k s t r a k c j i o p i s a n p r z e z T . K a l m á r a i w s p . G e n e M a p p e r ® I D S o f t w a r e [ 5 ] .
[ 3 ] , w p r o w a d z a j c d o n i e j d r o b n e m o d y f i k a c j e .
W m e t o d z i e t e j , 1 , 2 - 1 , 5 g s p r o s z k o w a n e j k o [c i W Y N I K I
u m i e s z c z o n o w 2 m l b u f o r u l i z u j c e g o ( 0 , 1 M E D T A ,
0 , 5 % N - l a u r y s a r c o s i n a - N a ) z a w i e r a j c e g o 4 m g Z D N A w y i z o l o w a n e g o z e k s h u m o w a n y c h s z c z t -
P r o t e i n a z y K i 3 d n i t r a w i o n o w t e m p . 5 2 0 C . K a |d e g o k ó w k o s t n y c h o k r e [l o n o p e Bn y p r o f i l g e n e t y c z n y
d n i a i n k u b a c j i b u f o r l i z u j c y u z u p e Bn i a n o k o l e j n z m a r Be g o m |c z y z n y .
p o r c j P r o t e i n a z y K . P o t r a w i e n i u , p r ó b o d w i r o w a - W p r z y p a d k u s t o s o w a n i a e k s t r a k c j i f e n o l o w o -
n o w t e m p . p o k o j o w e j p r z y 1 2 t y s . o b r . / m i n . p r z e z 1 0 c h l o r o f o r m o w e j p e Bn y p r o f i l D N A ( 1 2 m a r k e r ó w S T R )
m i n . i z e b r a n o s u p e r n a t a n t . D o d a n o d o n i e g o 1 µ g / µ l o k r e [l o n o z k o [c i n i e p o d d a n e j p r z e d t r a w i e n i e m
D e x t r a n u B l u e ( s t |. k o Dc . 4 µ g / µ l ) , r ó w n o w a |n p r o c e s o w i o d w a p n i a n i a , r y c . 1 A . W w y n i k u a m p l i f i k a c j i
s u p e r n a t a n t o w i o b j . 4 M o c t a n u a m o n o w e g o o r a z D N A z k o [c i o d w a p n i a n e j , n i e u z y s k a n o p o z y t y w n e g o
2 - k r o t n i e w i k s z o b j t o [ 9 6 % e t a n o l u . C a Bo [ s y g n a Bu P C R d l a f r a g m e n t ó w p o w y |e j 2 5 0 p z . i n i e
d o k Ba d n i e z w o r t e k s o w a n o i u m i e s z c z o n o w t e m p . o k r e [l o n o g e n o t y p ó w 3 S T R l o c i : D 2 S 1 3 3 8 , S E 3 3
- 7 5 0 C n a 7 - 1 0 m i n . P o p r e c y p i t a c j i D N A o d w i r o w a n o i D 1 8 S 5 1 r y c . 1 B .
R y c . 1 A . P r o f i l D N A i z o l o w a n e g o m e t o d f e n o l - c h l o r o f o r m z k o [c i n i e o d w a p n i a n e j .
F i g . 1 A . P r o f i l e o f D N A e x t r a c t e d f r o m a n o n - d e c a l c i f i e d b o n e u s i n g t h e p h e n o l - c h l o r o f o r m m e t h o d .
3 4 E w a K a p i Ds k a i i n n i N r 1
R y c . 1 B . P r o f i l D N A i z o l o w a n e g o m e t o d f e n o l - c h l o r o f o r m z k o [c i o d w a p n i a n e j .
F i g . 1 B . P r o f i l e o f D N A e x t r a c t e d f r o m a d e c a l c i f i e d b o n e u s i n g t h e p h e n o l - c h l o r o f o r m m e t h o d .
W p r z y p a d k u z a s t o s o w a n i a d o b a d a n i a m e t o d y i z o l a c j i D N A o p i s a n e j p r z e z T . K a l m á r a , p e Bn a n a l i z
w s z y s t k i c h l o c i w y s t p u j c y c h w z e s t a w i e A m p F l S T R ® S E f i l e r "! u z y s k a n o p o a m p l i f i k a c j i D N A e k s t r a h o w a n e g o
z a r ó w n o z k o [c i o d w a p n i a n e j j a k i n i e o d w a p n i a n e j , r y c . 2 A i B .
R y c . 2 A . P r o f i l D N A i z o l o w a n e g o m e t o d T . K a l m á r a z k o [c i n i e o d w a p n i a n e j .
F i g . 2 A . P r o f i l e o f D N A e x t r a c t e d f r o m a n o n - d e c a l c i f i e d b o n e u s i n g t h e T . K a l m á r s m e t h o d .
R y c . 2 B . P r o f i l D N A i z o l o w a n e g o m e t o d T . K a l m á r a z k o [c i o d w a p n i a n e j .
F i g . 2 B . P r o f i l e o f D N A e x t r a c t e d f r o m a d e c a l c i f i e d b o n e u s i n g t h e T . K a l m á r s m e t h o d .
N r 1 T O {S A M O Z N N Z W AO K 3 5
G e n o t y p y w s z y s t k i c h o s ó b b a d a n y c h w s p r a w i e k a c h k o n i e c z n o [c i o k r e [l e n i a p r o f i l i D N A w o p a r c i u
p r z e d s t a w i o n o w t a b e l i I . o m a t e r i a B b i o l o g i c z n y p o b r a n y z e k s h u m o w a n y c h
z w Bo k . W t y c h s p r a w a c h k o [c i s c z s t o j e d y n y m
T a b e l a I . P r o f i l e g e n e t y c z n e b a d a n y c h o s ó b . d o s t p n y m d o b a d a D n o [n i k i e m i n f o r m a c j i g e n e -
T a b l e I . G e n e t i c p r o f i l e s o f t h e e x a m i n e d i n d i v i d u a l s . t y c z n e j [ 6 ] .
K o [c i , t o s z c z e g ó l n y r o d z a j m a t e r i a Bu b i o l o g i c z -
N N m |c z y z n a s y n |o n a b r a t
L o c u s
n e g o . S t r u k t u r a t e j t k a n k i t w a r d e j c h r o n i m a t e r i a B
k o [ u d o w a N N - a N N a N N - a
g e n e t y c z n y p r z e d d z i a Ba n i e m c z y n n i k ó w z e w n t r z -
D 3 S 1 3 5 8 1 4 / 1 7 1 5 / 1 7 1 5 / 1 6 1 4 / 1 7
n y c h i p r o c e s j e g o d e g r a d a c j i p r z e b i e g a w o l n i e j [ 7 ] .
Z m n i e j s z a j c a s i w t y m m a t e r i a l e b i o l o g i c z n y m
V W A 1 6 / 1 7 1 6 / 1 7 1 6 / 1 7 1 6 / 1 7
l i c z b a k o p i i w y s o k o c z s t e c z k o w e g o D N A , w p By w a n a
i l o [ i j a k o [ i z o l o w a n e g o m a t e r i a Bu g e n e t y c z n e g o .
W s t p n a o b r ó b k a k o [c i , o d w a p n i a n i e i p r o c e s i z o l a -
D 1 6 S 5 3 9 1 1 / 1 2 1 1 / 1 2 1 1 / 1 1 1 1 / 1 2
c j i , o b e j m u j c a w i e l e p o [r e d n i c h e t a p ó w p o w o d u j
d o d a t k o w e r o z r y w a n i e Ba Dc u c h a D N A i u t r a t j e g o
D 2 S 1 3 3 8 1 8 / 2 2 1 3 / 1 8 1 3 / 2 3 1 8 / 2 2
f r a g m e n t ó w [ 8 ] . Z m i a n y t e , j a k i o b e c n o [ w e k s -
t r a k c i e z a n i e c z y s z c z e D o r g a n i c z n y c h m a j w p By w n a
A M G X Y X Y X Y X X X Y
p r z e b i e g r e a k c j i Ba Dc u c h o w e j p o l i m e r a z y . W w y n i k u
a m p l i f i k a c j i o t r z y m u j e m y t y l k o c z [c i o w y p r o f i l b a d a -
D 8 S 1 1 7 9 8 / 1 4 8 / 1 3 1 3 / 1 4 8 / 1 4
n e g o D N A l u b o b s e r w u j e m y c a Bk o w i t y b r a k s y g n a Bu
r e a k c j i P C R w y n i k n e g a t y w n y [ 9 , 1 0 ] .
S E 3 3 1 9 / 2 4 , 2 2 4 , 2 / 2 8 , 2 2 4 , 2 / 2 8 , 2 1 9 / 2 8 , 2
W p r a c y d o u s t a l e n i a t o |s a m o [c i m |c z y z n y ,
k t ó r e g o s z c z t k i e k s h u m o w a n o p o c z t e r e c h l a t a c h
D 1 9 S 4 3 3 1 2 / 1 6 , 2 1 5 , 2 / 1 6 , 2 1 5 / 1 5 , 2 1 2 / 1 6 , 2
o d p o c h ó w k u , w y k o r z y s t a n o k o [ u d o w z m a r Be g o ,
z k t ó r e j D N A i z o l o w a n o d w i e m a m e t o d a m i : k l a s y c z n
T H 0 1 6 / 9 , 3 6 / 8 8 / 9 9 , 3 / 9 , 3
f e n o l o w o - c h l o r o f o r m o w i z m o d y f i k o w a n t e c h n i k
o p i s a n p r z e z T . K a l m á r a i w s p .
F G A 2 1 / 2 1 2 1 / 2 2 2 2 / 2 3 2 5 / 2 5
E k s t r a k c j a m e t o d k l a s y c z n o b e j m u j e w i e l e
d y n a m i c z n y c h i r e s t r y k c y j n y c h e t a p ó w , k t ó r e m o g
m i e w p By w n a j a k o [ w y i z o l o w a n e g o D N A a p ó zn i e j
D 2 1 S 1 1 3 1 / 3 1 2 8 / 3 1 2 8 / 2 9 2 9 / 3 3 , 2
p r o c e s j e g o a m p l i f i k a c j i .
W d r u g i e j z m e t o d w y k o r z y s t a n e j w n i n i e j s z e j
D 1 8 S 5 1 1 5 / 1 6 1 6 / 1 8 1 6 / 1 8 1 4 / 1 6
p r a c y a p r z e d s t a w i o n e j p r z e z T . K a l m á r a w y s t p u j e
n i e w i e l e f a z o c z y s z c z a n i a k w a s ó w n u k l e i n o w y c h .
W y d a j n o [ z a s t o s o w a n y c h m e t o d b y Ba r ó |n a .
W p r o w a d z o n e p r z e z n a s m o d y f i k a c j e d o t y c z c e
W p r z y p a d k u k o [c i n i e o d w a p n i a n y c h w i c e j D N A
g Bó w n i e e t a p u t r a w i e n i a k o [c i ( z w i k s z e n i e i l o [c i
u z y s k a n o p r z y z a s t o s o w a n i u m e t o d y k l a s y c z n e j .
i n k u b o w a n e g o p r o s z k u k o s t n e g o i p r o t e i n a z y
R ó |n i c t a k i c h n i e z a o b s e r w o w a n o w i l o [c i D N A
K , p o d w y |s z e n i e t e m p e r a t u r y o r a z w y d Bu |e n i e c z a s u
i z o l o w a n e g o z k o [c i p o d d a n y c h p r o c e s o w i o d w a p -
t r a w i e n i a p r ó b y ) p r z y c z y n i By s i d o u z y s k a n i a p o z y -
n i a n i a . W y d a j n o [ i z o l a c j i w o b u m e t o d a c h b y Ba
t y w n y c h r e z u l t a t ó w . S t o s o w a n y w t e j t e c h n i c e D e x t r a n
p o r ó w n y w a l n a .
B l u e u Ba t w i a p r e c y p i t a c j n a w e t n i e w i e l k i e j i l o [c i D N A
A n a l i z a p o l i m o r f i z m u D N A b a d a n y c h o s ó b
i o g r a n i c z a i l o [ i n h i b i t o r ó w r e a k c j i P C R o b e c n y c h
p o z w o l i Ba n a u s t a l e n i e t o |s a m o [c i z m a r Be g o
w e k s t r a k c i e .
m |c z y z n y . B a d a n i a s t a t y s t y c z n e ( D N A V I E W
W b i e |c e j p r a k t y c e l a b o r a t o r y j n e j , w b a d a n i a c h
2 7 , 1 7 ) p o t w i e r d z i By , |e d e n a t j e s t o j c e m b a d a n e g o
d o t y c z c y c h a n a l i z y g e n e t y c z n e j s z c z t k ó w k o s t n y c h ,
d z i e c k a ( P = 9 9 , 9 9 9 9 9 9 % ) i w y k a z a By r ó w n i e | j e g o
r u t y n o w o s t o s o w a n e s d w i e r ó |n e , n i e z a l e |n e i z o -
w y s o k i e p o k r e w i e Ds t w o z d o m n i e m a n y m b r a t e m
l a c j e D N A . U z y s k a n i e p o w t a r z a l n y c h i i d e n t y c z n y c h
( P = 9 9 , 9 9 9 9 % ) .
w y n i k ó w a m p l i f i k a c j i D N A z o b u m e t o d , p o z w a l a n a
p r a w i d Bo w e o k r e [l e n i e p r o f i l i g e n e t y c z n y c h n i e z n a -
D Y S K U S J A
n y c h o s ó b [ 1 0 ] . N a s z y m z d a n i e m , z a p r o p o n o w a n a
p r z e z T . K a l m á r a i w s p . p r o s t a i s z y b k a m e t o d a i z o l a c j i
W y b ó r o d p o w i e d n i e j m e t o d y i z o l a c j i j d r o w e g o
D N A , e l i m i n u j c a r ó w n i e | s t o s o w a n i e t o k s y c z n y c h
D N A j e s t b a r d z o w a |n y m e l e m e n t e m k a |d e j a n a l i z y
o d c z y n n i k ó w o r g a n i c z n y c h , m o |e b y w y k o r z y s t y w a -
g e n e t y c z n e j , w a r u n k u j c y m p o w o d z e n i e w d a l s z y m
n a j a k o a l t e r n a t y w n a / d o d a t k o w a l u b k o n t r o l n a m e t o d a
e t a p i e b a d a D. M a t o s z c z e g ó l n e z n a c z e n i e w p r z y p a d -
e k s t r a k c j i D N A z k o [c i .
3 6 E w a K a p i Ds k a i i n n i N r 1
P I ZM I E N N I C T W O D N A f r o m a n c i e n t a n d a r t i f i c i a l l y a g e d b o n e s . L e g a l
M e d i c i n e , 2 0 0 3 , v o l . 5 , S 1 6 9 - S 1 7 2 .
1 . L a t h a m K . & R i t k e M . : B o n e D N A P u r i f i c a t i o n 8 . S c h m e r e r W . M . , H u m m e l S . , H e r m a n n B . :
P r o t o c o l s f o r G e n e t i c A n a l y s i s . U n i v e r s i t y o f I n d i a n a p o - O p t i m i z e d D N A e x t r a c t i o n t o i m p r o v e r e p r o d u c i b i l i t y
l i s A r c h e o l o g y & F o r e n s i c s L a b o r a t o r y , 2 0 0 2 . o f s h o r t t a n d e m r e p e a t g e n o t y p i n g w i t h h i g h l y d e g r a -
2 . S a m b r o o k J . , F r i t s c h E . F . , M a n i a t i s T . , M o l e c u - d e d D N A a s t a r g e t , E l e c t r o p h o r e s i s , 1 9 9 9 , v o l . 2 0 ,
l a r C l o n i n g : A L a b o r a t o r y M a n u a l , s e c o n d e d . , C o l d p p . 1 7 1 2 - 1 7 1 6 .
S p r i n g H a r b o r L a b o r a t o r y P r e s s , C o l d S p r i n g H a r b o r , 9 . P r i m o r a c D . : T h e r o l e o f D N A t e c h n o l o g y i n
N Y , 1 9 8 9 . i d e n t i f i c a t i o n o f s k e l e t a l r e m a i n s d i s c o v e r e d i n m a s s
3 . K a l m á r T . , B a c h r a t i Z . C . , M a r c s i k A . , R a s k ó I . : g r a v e s . F o r e n s i c S c i e n c e I n t e r n a t i o n a l , 2 0 0 4 , 1 4 6 S ,
A s i m p l e a n d e f f i c i e n t m e t h o d f o r P C R a m p l i f i a b l e S 1 6 3 - S 1 6 4 .
D N A e x t r a c t i o n f r o m a n c i e n t b o n e s , N u c l e i c A c i d s 1 0 . P r o m e g a C o r p o r a t i o n : A l o n s o A . , e t a l . , D N A
R e s e a r c h , 2 0 0 0 , v o l . 2 8 , n o 1 2 , p p . e 6 7 . t y p i n g f r o m s k e l e t a l r e m a i n s : e v a l u a t i o n o f m u l t i p l e x
4 . M o l e c u l a r P r o b e s , I n c . : P i c o G r e e n ® d s D N A a n d m e g a p l e x S T R s y s t e m s o n D N A i s o l a t e d f r o m
Q u a n t i t a t i o n R e a g e n t a n d K i t s , 2 0 0 3 . b o n e a n d t e e t h s a m p l e s , F e a t u r e A r t i c l e I n t r o d u c t i o n
5 . A p p l i e d B i o s y s t e m s : U s e r s M a n u a l , A m p F l S T R ® P r o f i l e s i n D N A J u l y 2 0 0 1 , p p . 3 - 8 .
S E f i l e r T M P C R A m p l i f i c a t i o n K i t . 2 0 0 1 , 2 0 0 2 .
6 . I w a m u r a E . S . M . , S o a r e s - V i e i r a J . A . , M u ñ o z A d r e s :
D . R . : H u m a n i d e n t i f i c a t i o n a n d a n a l y s i s o f D N A i n K a t e d r a i Z a k Ba d M e d y c y n y S d o w e j
b o n e s . R e v . H o s p . C l i n . F a c . M e d . S . P a u l o , 2 0 0 4 , A k a d e m i i M e d y c z n e j w G d a Ds k u
v o l . 5 9 ( 6 ) , 3 8 3 - 3 8 8 . u l . D b o w a 2 3 , 8 0 - 2 0 4 G d a Ds k
7 . W u r m b - S c h w a r k N . , H a r b e c k M . , W i e s b r o c k U . , p r o f . d r h a b . Z o f i a S z c z e r k o w s k a
S c h r o e d e r I . , R i t z - T i m m e S . , O e h m i c h e n M . : E x t r a c - s z c z e r k o @ a m g . g d a . p l
t i o n a n d a m p l i f i c a t i o n o f n u c l e a r a n d m i t o c h o n d r i a l m g r E w a K a p i Ds k a k a p i n i a c z e k @ w p . p l
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