34613

■    w laboratorium rozdrobnić

■    Pobrać próbkę (na ogół o masie 10, 20 lub 25 g) i zhomogenizować

■    dodać do 90 lub 180 g jałowego rozcieńczalnika (rozcieńczenie 1 : 10), a następnie przygotować do posiewu

Posiew ilościowy

1. Przygotowanie kolejnych rozcieńczeń.

■    Odważyć lub odmierzyć określoną ilość produktu (np. 1 g lub 1 cm³; 10 g),

■    rozdrobnić

■    umieścić w naczyniu i zalać 9 lub 90 cm³ roztworu rozcieńczalnika.

■    wymieszać- uzyskuje się rozcieńczenie wyjściowe 10¹ (1:10).

■    Kolejne rozcieńczenie 10'² (1:100) sporządza się przenosząc 1 cm³ zawiesiny do kolejnej probówki z 9 cm³ rozcieńczalnika.

2.Oznaczanie ogólnej liczby drobnoustrojów metodą zalewową:

■    Na dwie płytki Petriego przenieść po 1 ml z badanego rozcieńczenia (np. 10¹)

■    Na dwie kolejne płytki przenieść po 1 ml z kolejnego rozcieńczenia, itd., itp.

■    Płytki zalać upłynnioną, schłodzoną do ok. 45°C pożywką (np. agar odżywczy).

■    Wymieszać i pozostawić do zestalenia.

■    Po zestaleniu inkubować obrócone do góry dnem w temp. 30°C przez 72 godz.

3.    Oznaczanie ogólnej liczby drobnoustrojów metodą posiewu powierzchniowego:

■    Na gotowe płytki z zastygłym podłożem agarowym przenieść po 0,1 ml z odpowiedniego rozcieńczenia

■    Rozprowadzić równomiernie po powierzchni jałową, szklaną bagietką

■    Wstawić do cieplarki i inkubować j.w.

4.    Obliczanie ogólnej liczby drobnoustrojów:

■    Do liczenia wybrać płytki, na których nie więcej niż 300 kolonii

■    Z dwóch rozcieńczeń następujących po sobie

■    Przynajmniej jedna z 4 płytek powinna zawierać nie mniej niż 15 kolonii

Wzór:

ZC

L =    -

(nj+ 0,ln₂) d

ZC- suma kolonii na wszystkich płytkach wybranych do liczenia n, - liczba płytek brana pod uwagę przy niższym rozcieńczeniu n₂ - liczba płytek brana pod uwagę przy niższym rozcieńczeniu d- wskaźnik rozcieńczenia odpowiadający pierwszemu (niższemu) rozcieńczeniu

Otrzymaną liczbę zaokrąglić do 2 cyfr znaczących.

Wynik powinien być wyrażony jako liczba pomiędzy 1,0 a 9,9 pomnożona przez 10^x, gdzie x jest wykładnikiem potęgi.